贫血其他检查PPT课件

.,1,内容,网织红细胞计数红细胞比积及相关数值测定红细胞比积（Hct）平均红细胞体积（MCV）平均红细胞血红蛋白含量（MCH）平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）溶血性贫血红细胞渗透脆性试验酸溶血试验(Hma,stest)抗人球蛋白试验(Coomb,stest)尿内含铁血黄素检查(Roustest),.,2,一、网织红细胞计数（reticulocytecount）,(一)原理网织红细胞晚幼红细胞成熟的红细胞,.,3,网织红细胞（reticulocytecount）,.,4,(二)方法活体染色法.近年来还可通过某些血液自动分析仪及流式细胞术检测法进行网织红细胞计数。,(三)参考值(活体染色法)成人0.5%1.5%新生儿2%6%网织红细胞绝对值(2484)109/L,.,5,（四）临床意义直接反应骨髓造血功能疗效观察的指标反映骨髓增生或重建情况,增高溶血性贫血缺铁性贫血巨幼细胞性贫血,减低再生障碍性贫血,.,6,二、红细胞比积（hemotocrit，HT，Hct）,(一)原理将定量的经双草酸盐抗凝全血灌注于Wintrobe分血管中，以一定的速度和时间离心沉淀后，读取红细胞层在全血中所占体积的百分比。(二)方法温氏法,.,7,二、红细胞比积,（三）参考值成人男性4050成人女性3748,.,8,（四）临床意义,增加相对：血液浓缩绝对：真性红细胞增多症减少各种贫血Hct改变与RBC数不一定完全平行计算RBC各项平均值才有意义,.,9,三、红细胞平均数值计算,(一)原理根据红细胞计数、血红蛋白浓度和红细胞比积，通过公式可分别计算出下列红细胞平均数值，多参数血液自动分析仪可直接获得此类参数。(二)计算方法及参考值,.,10,平均红细胞体积（MCV：80100fL）指每个红细胞的平均体积，以飞升(fl)为单位。Hct（L/L）MCV=1015fLRBC（1012/L）平均红细胞Hb含量（MCH：2634pg）指每个红细胞内所含有的血红蛋白的平均量，以皮克(pg)为单位。Hb（g/L）MCH=pgRBC（1012/L）,.,11,平均红细胞Hb浓度（MCHC：31070g/L）指平均每升红细胞中所含血红蛋白浓度，以克/升(g/L)表示。Hb（g/L）MCHC=g/LHct（L/L）,临床意义根据MCV、MCH、MCHC测定可对贫血进行形态学分类，并对其鉴别诊断也有一定意义。既：有助于贫血形态学分类选择合理治疗方案,.,12,贫血的形态学分类鉴别表,细胞形态学MCVMCHMCHC病因参考值80-100fL26-34pg310-370g/L大细胞性贫血-巨幼细胞性贫血正常细胞性贫血-急性失血、溶贫再障、白血病小细胞性贫血-感染、中毒恶性肿瘤小细胞低色素缺铁性贫血慢性失血,.,13,四、溶血性贫血的实验室检查,.,14,.,15,(一)溶血性贫血的实验诊断步骤,HA的诊断一般分为四个步骤：确定有无贫血明确溶血的存在判定溶血部位查明溶血原因,.,16,(一)溶血性贫血的实验诊断步骤,1.确定有无贫血若红细胞数量、血红蛋白浓度、红细胞比积低于参考值的下限则为贫血。,.,17,2.明确溶血的存在,（1）红细胞破坏增加血液中网织红细胞显著增多血浆游离血红蛋白含量增高肝珠蛋白含量减低血清间接胆红素增高尿胆原含量增高,.,18,2.明确溶血的存在,（2）骨髓红系细胞高度代偿性增生骨髓有核细胞增生明显活跃,粒红比值明显减低或倒置，红系以中、晚幼红细胞增生为主，原红和早幼红细胞亦增多，可见染色质小体(Howell-jolly小体)、Cabot环及核分裂幼红细胞增多。血涂片中红细胞形态异常，出现嗜多色性红细胞和幼红细胞等。,.,19,骨髓增生程度和粒红比,成熟红细胞：有核细胞极度活跃1：1明显活跃10：1活跃20：1减低50：1极度减低200：1粒红比粒细胞各阶段细胞总和与各阶段红细胞总和之比正常3：1,.,20,（粒、红比）M:E正常2：1-4：1,1、粒、红比正常：M-E-正常2、M:EME-：化脓、粒细胞白血病M-E-ITPM-E：纯红再障ME：红白血病ME：再障3、M:E或倒置：M-E：各种增生性贫血、巨幼红细胞性贫血、真红；ME-：粒细胞缺乏症。,.,21,各系统骨髓细胞量和质的改变,1、粒系：原粒、早幼粒、形态改变急粒早、中、晚幼、嗜酸-慢粒中性中、晚幼、杆状WBC中毒变化感染粒系-粒缺,.,22,2、红系,各阶段成比例-溶贫、失血贫伴胞浆发育落后于胞核缺铁贫伴巨幼红细胞出现营养性巨幼红细胞贫血伴余二系-再障,.,23,3、淋巴系,原淋或幼淋-急淋相对、其他系-再障-慢淋,.,24,4、单核系,原单/幼单-单核细胞型白血病单核C-慢性感染（结核）,.,25,巨核C系,-ITP、脾亢/-再障,.,26,6、浆C、网C,浆C系-再障、结核浆C系、形态改变骨髓瘤、浆细胞性白血病网C、形态改变恶网网C-感染、溶贫、再障,.,27,3.判定溶血部位,血管内溶血血管外溶血,.,28,4.查明溶血的原因,HA的原因较复杂一般先做常用的筛选试验，如红细胞形态观察红细胞渗透脆性试验抗人球蛋白试验蔗糖水溶血试验血红蛋白电泳根据筛选试验结果再选择适当的确诊试验,绝大部分患者的HA原因可以查明。,.,29,（二）溶血性贫血的分类,遗传性红细胞膜异常红细胞酶异常珠蛋白合成异常获得性机械性理化及生物因素免疫性单核-巨噬系统破坏,按病因和发病机制分：,.,30,（二）溶血性贫血的分类,血管内血管外,按溶血的部位分：,.,31,按溶血发生的部位分,红细胞破坏发生于血循环中血管内溶血。临床表现明显，伴有血红蛋白血症、血红蛋白尿、含铁血黄素尿；红细胞破坏发生于单核-巨噬细胞系统血管外溶血。主要发生于脾脏，临床表现一般较轻。,.,32,.,33,(三)溶血性贫血确诊的实验室检查,1.显示红细胞破坏增加的依据(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验红细胞寿命测定红细胞形态改变血浆乳酸脱氢酶测定(2)血浆游离血红蛋白增高的检查血浆游离血红蛋白测定血清珠蛋白测定血浆高铁血红素白蛋白测定血红蛋白尿检验含铁血黄素尿试验(Rous试验)（3）胆红素代谢异常的表现,.,34,(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验红细胞寿命测定：用51Cr标记红细胞测定其半衰期（T1/2）正常2532天溶贫15天,.,35,(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验红细胞形态改变可见红细胞破坏的征象,.,36,(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验血浆乳酸脱氢酶测定红细胞破坏乳酸脱氢酶,.,37,(三)溶血性贫血确诊的实验室检查,(2).血浆游离血红蛋白增高的检查血浆游离血红蛋白测定血清珠蛋白测定血浆高铁血红素白蛋白测定血红蛋白尿检验含铁血黄素尿试验(Rous试验),.,38,血浆游离血红蛋白测定,原理：游离血红蛋白中血红素部分有类似过氧化物酶的作用，能使邻甲苯胺氧化显色，与已知血红蛋白浓度的标准液比较而求得其含量。标本采集：用肝素或EDTA抗凝血均可。参考值：1mm才能在光镜下检出)，含有含铁血黄素的上皮细胞的未完成其衰老脱落的过程等均可呈阴性反应，必要时反复检查或取晨尿、午睡后的尿液进行检查。,.,46,（3）胆红素代谢异常的表现,血非结合胆红素尿中的尿胆原尿胆红素（）,.,47,(三)溶血性贫血确诊的实验室检查,2.显示红细胞代偿增加的依据(1)外周血网织红细胞明显增高(2)外周血涂片红细胞形态改变(3)增生性贫血骨髓象,.,48,(四)溶血性贫血的病因诊断,.,49,溶血性贫血病因,红细胞内在缺陷遗传性溶血：红细胞膜缺陷红细胞酶缺陷珠蛋白异常红细胞外部因素异常：免疫因素（患者产生红细胞抗体）非免疫因素（人工瓣膜置换术、蛇毒、疟原虫）,.,50,1.红细胞膜缺陷的检验,红细胞膜缺陷主要是指膜成分或膜支架结构异常,导致红细胞表面积与体积比、可塑性及脆性等改变，有的还伴有红细胞形态异常而易于破裂导致溶血性贫血。膜成分异常主要是指脂质和膜支架结构的异常，常见的是收缩蛋白(区带、)、肌动蛋白(区带)及区带-1蛋白的磷酸化或相互结合障碍,不能形成牢固的膜骨骼。针对红细胞膜缺陷常用的筛选试验是测定红细胞在各种实验条件下抗溶解的能力，若通过生化方法直接测定膜成分的异常,则更为准确而特异。,.,51,（1）.红细胞渗透脆性试验（2）.温孵育后渗透脆性试验（3）.自身溶血试验及其纠正试验（4）.酸溶血试验（5）.蔗糖水溶血试验,1.红细胞膜缺陷的检验,.,52,（1）红细胞渗透脆性试验(red-cellosmoticfragilitytest,ROFT),原理：正常红细胞为双凹圆盘状,在低渗盐水中吸水膨胀的适应性较大(可增加70%的体积而不破裂)。遗传性球形细胞增多症(HS)等红细胞的表面积/体积(S/V)的比值小,对低渗盐水的适应性小(脆性增大)。本试验是测定红细胞在一系列不同浓度低渗氯化钠盐水内开始溶血和完全溶血的氯化钠浓度。标本采集：用肝素抗凝血,也可取静脉血立即测定。,.,53,红细胞脆性实验,脆性增高开始溶血及完全溶血时氯化钠溶液的浓度均较正常对照提前两管（0.04%）或更高，即开始溶血0.50%,完全溶血0.38%NaCl时为脆性增高，即红细胞对低渗NaCl溶血的抵抗力减低；脆性减低即红细胞对低渗NaCl溶血的抵抗力增高；,.,54,参考值：开始溶血4.24.6g/LNaCl完全溶血2.83.4g/LNaCl意义：遗传性球形RBC增多症自身免疫性溶血性贫血：低色素性贫血(IDA，地中海贫血),.,55,温孵育渗透脆性试验,红细胞孵育过程中，葡萄糖消耗增加，储备的ATP减少红细胞对阳离子的主动传递受阻，钠离子在红细胞内集聚，细胞膨胀渗透脆性增加。,.,56,（2）温孵育后渗透脆性试验,原理略意义：正常人轻度增加轻症遗传性球形RBC增多症丙酮酸激酶缺陷症,.,57,自身溶血试验及纠正试验,先天性非球形细胞性溶血性贫血病人，由于红细胞内酶缺陷，葡萄糖酵解障碍，不能提供足量ATP以维持红细胞内的钠泵作用。病人红细胞无菌条件下在自身血浆中温育48h，使ATP储备减少，钠泵作用减弱导致溶血增强。在孵育过程中分别加入葡萄糖、ATP作为纠正物，并以氯化钠溶液对照，观察溶血是否被纠正。遗传球：明显纠正型先天型性非球（G-6PD缺陷症）加葡萄糖、ATP均可纠正型先天型性非球（丙酮酸激酶缺陷症）加ATP纠正,.,58,（3）.自身溶血试验及其纠正试验,原理参考值：孵育48h,4.0%;+葡萄糖orATP75%意义：G-6-PD缺乏症，如蚕豆病、伯氨喹啉型药物溶血性贫血,.,72,红细胞酶检测,变性珠蛋白小体生成试验G6PD缺乏可致红细胞内的还原型谷胱甘肽含量减少高铁血红蛋白增高形成变性珠蛋白小体。取G6PD缺乏患者血液+乙酰苯肼37温育2-4h，推薄血片，用1%煌焦油蓝染色，计