香豆素和木脂素

木脂素和香豆素,第一节木脂素木脂素是一类由苯丙素双分子聚合而成的天然成分，组成木脂素的单体有四种：桂皮酸，偶有桂皮醛。桂皮醇。丙烯苯。烯丙苯。分类依据：按木脂素的基本碳架和缩合情况进行分类。,理化性质,1物理性状白色结晶、不挥发。2.溶解性游离木脂素-亲脂性木脂素苷-水溶性增大，并易被酶或酸水解具酚羟基木脂素-可溶于碱水中。,3.显色反应1.Labatreaction:鉴定5%没食子酸溶液+浓H2SO4，呈绿色（+）。2.Emersonreaction:酚羟基对位无取代基,3.Gibbsreaction:判断-OH对位有无取代基。Gibbs试剂是2，6-二氯（溴）苯醌氯亚胺，其在弱的碱性条件下与酚对位活泼氢缩合成兰色物。有游离酚-OH,且-OH对位无取代者（+）对位有取代者（-）。,多用来判断C6位是否有取代基存在。,4.异羟肟酸铁反应：碱性条件下，内酯开环，与盐酸羟胺中的羟基缩合生成异羟肟酸，然后在酸性条件下与三价铁盐络合而显红色。,鉴别,理化鉴别常用的有亚甲二氧基官能团特征性的鉴别反应，如Labat反应和Ecgrine反应等。但由于该鉴别反应的干扰因素较多，专属性较差。色谱鉴别取五味子粉末1g,加三氯甲烷20ml,加热回流30min,滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取五味子甲素对照品，加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述三种溶液各2L，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚（3060）-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。,化学法取本品粗粉约1g加水10ml，浸渍10min，时时振摇，滤过，滤液浓缩至23ml，加5倍量的乙醇，强烈振摇5min，滤过，滤液挥去乙醇，加水稀释至10ml，加活性炭少量，振摇后滤过。取滤液2ml，加氢氧化钠试液中和后，加硫酸汞试液1滴，煮沸，滤过，滤液加高锰酸钾试液1滴，紫红色即消失，并发生白色沉淀。,含量测定,（一）变色酸比色法,测定具有亚甲二氧基的木脂素,五味子酯甲,-五味子素,总木脂素,1.TLC法吸附剂硅胶G展开剂三氯甲烷，苯2.HPLC法填充剂C18流动相乙腈-水，甲醇-水检测器UV,（二）色谱法,单木脂素,例护肝片Ch.P.（2010）【处方】柴胡，茵陈，板蓝根，五味子，猪胆粉，绿豆【含量测定】HPLC法固定相C18流动相甲醇-水（63:37）检测波长250nm对照品五味子醇甲供试液乙酸乙酯加热回流，蒸干，甲醇溶解残渣,香豆素是邻羟桂皮酸内酯，具芳香甜味。其结构母核为：,苯骈-吡喃酮,1,2,3,6,7,8,4,5,苯骈-吡喃酮,（Chromone),第二节香豆素,物理性质：为白色晶体，溶于乙醇、氯仿、乙醚，不溶于水，较易溶于热水。显色反应：1.异羟肟酸铁反应碱性条件下，香豆素内酯可开环，与盐酸羟肟缩合成异羟肟酸，然后在酸性条件下与三价铁离子络合呈红色。2.三氯化铁反应含有酚羟基的香豆素可与三氯化铁试剂产生颜色反应。,理化性质,3.Gibbs反应2，6-二氯（溴）苯醌氯亚胺，在弱碱性条件下可与酚羟基对位的活泼氢缩合成蓝色化合物。4.Emerson反应氨基安替比林和铁氰化钾，可与酚羟基对位活泼氢生成红色缩合物。3、4都要求香豆素分子中必须有游离的酚羟基，且酚羟基对位没有取代基时才呈阳性反应。,荧光特征香豆素类化合物多为无色或淡黄色结晶，有紫外吸收，且在紫外光下多显蓝色或紫色荧光，在碱性溶液中荧光增强。光谱特征未取代的香豆素在274nm和311nm处呈现两个吸收峰。母核上引入取代基，其吸收峰发生相应的位移。含酚羟基的香豆素，在碱性溶液吸收峰红移，且吸收强度增强。,鉴别,化学反应法利用异羟肟酸铁反应、三氯化铁试剂反应、重氮化反应、Gibbs反应等可对香豆素类成风进行鉴别。荧光法羟基香豆素大多能产生荧光，利用此性质可进行鉴别。可直接观察提取溶液的荧光，也可观察薄层荧光斑点。薄层色谱法,白芷的薄层定性分析取白芷粉末0.5g，加乙醚10ml，浸泡1h，时时振摇，滤过，滤液挥干乙醚，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取欧前胡素、异欧前胡素对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的混合液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各4l，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚（3060）-乙醚（3：2）为展开剂，在25以下展开，取出，晾干，置紫外灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相对应的位置上，显相同颜色的斑点。,含量测定,分光光度法利用香豆素类成分的显色反应进行比色测定。举例：补骨脂素注射液的含量测定，可在样品中加入重氮化试剂，生成紫色偶氮染料，于580nm处测定含量。利用香豆素类成分都具有紫外吸收，样品较纯时，也可进行分光光度法测定。举例：消痔液中补骨脂素的测定，检测波长246nm。,说明：中药制剂成分复杂，可先用薄层色谱分离，在紫外灯下荧光定位，找出香豆素成分，将其吸附层刮下，用适宜溶剂洗脱，再加入重氮化试剂，进行比色测定。如健腰丸中补骨脂素、异补骨脂素的测定。但应同时进行空白试验及净化回收率实验。荧光光度法羟基香豆素成分大多能产生强烈荧光，用荧光光度计进行荧光测定有较高的灵敏度及选择性。当干扰成分较多时，可先用色谱法净化。,薄层扫描法样品经薄层分离后，于荧光灯下定位，利用香豆素类成分具有紫外吸收或能产生荧光的特性，不经显色，直接进行荧光扫描测定。举例：复方制剂中补骨脂素，异补骨脂素，白瑞香素，欧前胡素等。气相色谱法某些相对分子质量小，具有挥发性的香豆素类成分。可用气相色谱法测定（如蛇床子素，香柑内素，花椒毒素，花椒毒酚等）常用检测器：SE-30石英毛细管柱，氢火焰离子化检测器。,高