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文档简介

一、 A 型题 1. F因子从一个细胞转移至另一个细胞的基因转移过程称为 (A) 转导 (B) 转化 (C) 转座 (D) 转染 (E) 接合 2. 通过自动获取或人为地供给外源DNA使受体细胞获得新的遗传表型,称为 (A) 转化 (B) 转座 (C) 接合 (D) 转导 (E) 转染 3. 由插人序列和转座子介导的基因移位或重排称为 (A) 接合 (B) 转染 (C) 转导 (D) 转座 (E) 转化 4. 由整合酶催化、在两个DNA序列的特异位点间发生的整合称 (A) 位点特异的重组 (B) 同源重组 (C) 随机重组 (D) 基本重组 (E) 人工重组 5. 发生在同源序列间的重组称为 (A) 非位点特异的重组 (B) 位点特异的重组 (C) 基本重组 (D) 人工重组 (E) 随机重组 6. 限制性核酸内切酶切割DNA后产生 (A) 5磷酸基和3羟基基团的末端 (B) 5磷酸基和3磷酸基团的末端 (C) 5羟基和3羟基基团的末端 (D) 3磷酸基和5羟基基团的末端 (E) 以上都不是 7. 可识别并切割特异DNA序列的称 (A) 非限制性核酸外切酶 (B) 限制性核酸内切酶 (C) 限制性核酸外切酶 (D) 非限制性核酸内切酶 (E) DNA酶(DNase) 8. 在重组DNA技术中催化形成重组DNA分子的是DNA (A) 解链酶 (B) 聚合酶 (C) 连接酶 (D) 内切酶 (E) 拓扑酶 9. 在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指 (A) 建立多克隆抗体 (B) 建立单克隆抗体 (C) 有性繁殖DNA (D) 无性繁殖DNA (E) 构建重组DNA分子 10. 在下述双链DNA序列(仅列出其中一条链序列)中不属于完全回纹结构的是 (A) GGAATTCC (B) TGAATTCA (C) AGAATTCT (D) CGTTAAGC (E) AGATATCT 11. 无性繁殖依赖DNA载体的最基本性质是 (A) 卡那霉素抗性 (B) 青霉素抗性 (C) 自我复制能力 (D) 自我表达能力 (E) 自我转录能力 12. 在已知序列的情况下获得目的DNA最常用的是 (A) 筛选cDNA文库 (B) 筛选基因组文库 (C) 化学合成法 (D) 聚合酶链式反应 (E) DNA合成仪合成 13. 重组DNA技术领域常用的质粒DNA是 (A) T病毒基因组DNA的一部分 (B) 细菌染色体外的独立遗传单位 (C) 细菌染色体DNA的一部分 (D) 真核细胞染色体外的独立遗传单位 (E) 真核细胞染色体DNA的一部分 14. 某限制性内切核酸酶按GGGCGCCC方式切割产生的末端突出部分含 (A) l个核苷酸 (B) 2个核苷酸(C) 3个核苷酸 (D) 4个核苷酸 (E) 5个核苷酸 15. 某限制性内切核酸酶切割5GGGGGGAATTCC3序列后产生 (A) 5突出末端 (B) 5或3突出末端 (C) 5及3突出末端 (D) 3突出末端 (E) 平末端 16. 直接针对目的DNA进行筛选的方法是 (A) 氨苄青霉素抗药性 (B) 青霉素抗药性 (C) 分子杂交 (D) 分子筛 (E) 电泳 17. “克隆”某一目的DNA的过程不包括 (A) 重组DNA分子导人受体细胞 (B) 外源基因与载体的拼接 (C) 基因载体的选择与构建 (D) 筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞 (E) 表达目的基因编码的蛋白质 18. 表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是 (A) 酵母表达体系 (B) 原核表达体系 (C) Ecoli表达体系 (D) 昆虫表达体系 (E) 哺乳类细胞表达体系 19. 不能用作克隆载体的DNA是 (A) 质粒DNA (B) 噬菌体DNA (C) 细菌基因组DNA (D) 腺病毒DNA (E) 逆转录病毒DNA 20. 克隆的基因组DNA可在多种系统表达,例外的是 (A) Ecoli表达体系 (B) 昆虫表达体系 (C) 酵母表达体系 (D) COS细胞表达体系 (E) CHO细胞表达体系 二、选择题(单选或多选) 1 关于DNA的修复,下列描述中,哪些是不正确的?( ) (a)UV照射可以引起嘧啶碱基的交联 (b)DNA聚合酶可以修复单链的断裂 (c)双链的断裂可以被DNA聚合酶修复 (d)DNA的修复过程中需要DNA连接酶 (e)细菌可以用一种核酸内切酶来除去受损伤的碱基 (f)糖苷酶可以切除DNA中单个损伤的碱基 2 DNA最普遍的修饰是甲基化,在原核生物中这种修饰的作用有: ( ) (a)识别受损的DNA以便于修复 (b)复制之后区分链,以确定是否继续复制 (c)识别甲基化的外来DNA并重组到基因组中 (d)保护它自身的DNA免受核酸内切酶限制 (e)识别转录起始位点以便RNA聚合酶能够正确结合 3 单个碱基改变是DNA损伤的一种形式,它们: ( ) (a)影响转录但不影响复制,在此过程中一个ATG起始密码可能被修改 (b)影响DNA序列但不影响DNA的整个结构 (c)将继续引起结构变化但不影响复制循环 (d)可能由错配复制或酶的DNA修饰(如脱氨基)所引起 (e)可以由UV照射(如嘧啶二聚体)或加成化合物形成(如烷基化)所引起 4 错配修复是基于对复制期间产生的错配的识别。下列叙述正确的是:( ) (a)UvrABC系统识别并靠DNA聚合酶I促使正确核苷酸的引人而使错配被修复 (b)假如识别发生在被重新甲基化的半甲基化DNA之前,那么修复可能偏向野生型序列(Dam甲基化,MutH,MutSL) (c)错配一般由单链交换所修复,这要靠RecA蛋白恢复正常拷贝序列的能力 (d)错配修复也可被认为是对DNA的修饰活动,如去烷基化或再氨基化,但是不会替换损伤的核苷酸 (e)错配修复是靠正常情况下被LexA蛋白抑制的修复功能完成的(SOS反应) 5 非均等交换:( ) (a)发生在同一染色体内 (b)产生非交互重组染色体 (c)改变了基因组织形式,未改变基因的总数 (d)在染色体不正常配对时发生 (e)减少一个基因簇的基因数,同时增加另一个基因簇的基因数 6 许多细菌在它们的基因组中几乎平均分配重组敏感热点,这些热点在大肠杆菌E.coli中称为chi,它们是:( ) (a)是双链经常断裂的部位,它可来诱导重组 (b)是单链经常断裂的部位,导致单链同化作用 (c)是RecBCD复合物作用的位点,在这些位点,受双链断裂激活的RecBCD复合物切开一个自由3-OH端 (d)是顺式作用元件,在该元件内可以产生个单链的自由3OH末端 (e)是RecA蛋白结合的DNA位点,RecA蛋白从该位点沿着DNA移动直到断裂点三、 B 型题(A) 位点特异的童组 (B) 同源重组 (C) 随机重组 (D) 自然重组 (E) 人工重组 21. 基本重组又称 () 22. 由整合酶催化、发生在两DNA序列的特定位点间 ()23. 将目的基因与载体DNA拼接成重组DNA分子于 ()(A) 基因载体的选择与构建 (B) 外源基因与载体的拼接 (C) 重组DNA分子导人受体细胞 (D) 筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞 (E) 表达目的基因编码的蛋白质 24. 产生嵌合DNA分子 ()25. 可能应用限制性核酸内切酶 () 26. 获得DNA克隆 ()27. 应用转化、转染或感染技术 () (A) 5突出末端(B) 3突出末端 (C) 5及3突出末端 (D) 5或3突出末端 (E) 平末端 28. 某识别6核苷酸序列的限制性内切酶切割5AGCTGAATTC3产生 ()29. 某识别6核苷酸序列的限制性内切酶切割5CTGCAGAGTC3产生 ()30. 某识别6核着酸序列的限制性内切酶切割5AGGTTAACAG3产生 ()四、填空题 1 在大肠杆菌中发现了-种DNA聚合酶。DNA修复时需要DNA聚合酶-。 2 真核生物中有5种DNA聚合酶,它们是:(1)-(2)-(3)-(4)-(5)-。 3 在DNA修复过程中,需要第二种酶,-,作用是将DNA中相邻的碱基-起来。DNA聚合酶具有外切核酸酶的活性。有两种外切核酸酶的活性,它们分别从-和-降解DNA。DNA聚合酶-只有外切核酸酶活性。 4 只有真核DNA聚合酶-和-显示-外切核酸酶活性。 5 DNA大多数自发变化都会通过称之为-的作用很快被校正。仅在极少情况下,DNA将变化的部分保留下来导致永久的序列变化,称为-。 6 偶然情况下,在同一基因两个稍微不同拷贝(等位基因)间发生重组的过程中,一个等位基因经过-过程会被另一等位基因代替。 7 通过-基因重组,游动DNA序列和一些病毒可进人或离开一条目的染色体。 8 DNA修复包括3个步骤:-酶对DNA链上不正常碱基的识别与切除,-酶对已切除区域的重新合成,-酶对剩下切口的修补。 9 一种主要的DNA修复途径称-,包括一系列-酶,它们都能识别并切去DNA上不正常碱基。 10-途径可以切去任何造成DNA双螺旋大片段改变的DNA损伤。 11大肠杆菌中,任何由于DNA损伤造成的DNA复制障碍都会诱导-的信号,即允许跨过障碍进行复制,给细胞一个生存的机会。 12在-中,基因交换发生在同源DNA序列间,最常见是发生在同一染色体的两个拷贝间。 13在交换区域,一个DNA分子的一条链与另一个DNA分子的一条链相互配对,在两个双螺旋间形成一个-。 14通过-,两个单链的互补DNA分子一起形成个完全双链螺旋,人们认为这个反应从一个慢的-步骤开始。 15大肠杆菌的染色体配对需要-;它与单链DNA结合并使同源双链DNA与之配对。16一般性重组的主要中间体是-,也用它的发现者名字命名为-。 五、判断题 1 拓扑异构酶I和可以使DNA产生正向超螺旋。 2 拓扑异构酶I解旋需要ATP酶。 3 RNA聚合酶I合成DNA复制的RNA引物。 4 线粒体DNA的复制需要使用DNA引物。 5 噬菌体整合到大肠杆菌基因组上是由一个位点专一的拓扑异构酶(丸整合酶)催化的,它可以识别在两条染色体上短的特异DNA序列。 6 在真核生物染色体DNA复制期间,会形成链状DNA。 7 所有已知的基因转变都需要一定量的DNA合成。 8 根据不同物种同一蛋白质中氨基酸的不同来估计突变率往往较实际的突变率低,因为一些突变体由于危及蛋白质功能,在选择压力下从种群中消失。 9 因为组蛋白H4在所有物种中都是一样的,可以预期该蛋白基因在不同物种中也是一样的。 10DNA修复机制有很多种,但所有这些机制都依赖于二倍体染色体上两套遗传信息的存在。 11自发的脱嘌呤作用和由尿嘧啶DNA糖基化酶切去一个已脱碱基的胞嘧啶都会产生可被无嘌呤嘧啶内切核酸酶作为底物识别的同样的中间产物。 12DNA修复的第一步是由专用于修复过程的酶催化的,下面的步骤由DNA代谢过程中的常用酶催化。 13大肠杆菌中SOS反应的最主要作用是通过在原始DNA损伤区附近导人补偿突变来提高细胞存活率。 14DNA中四个常用碱基自发脱氨基的产物,都能被识别出来。 15在细菌细胞中,短片段修复是由损伤诱导的。相反,长片段修复是组成型的,且往往涉及长约15009000bp损伤DNA片段的替换。 16真核生物中DNA的修复没有原核生物重要,这是因为体细胞的二倍体特征。 17一般性重组需要交换的双方都有一长段同源DNA序列,而位点专一重组仅需要短而专一的核苷酸序列,某些情况下,只需要交换双方中的一方具有该序列即可。 18一般性重组包括DNA片段的物理交换,该过程涉及DNA骨架上磷酸二酯键的断裂和重新形成。 19RecA蛋白同时具有位点专一的单链切割的活性和将单链从双螺旋DNA分子上脱离的解旋酶的功能,但需要依赖于ATP活性。 20大肠杆菌的单链结合蛋白通过与糖磷酸骨架结合并使碱基暴露,从而解开单链上的短发夹结构。 21RecA蛋白同时与单链、双链DNA结合,因此它能催化它们之间的联会。 22交叉链互换包括交叉链和未交叉链,至少其中一条链的磷酸骨架断裂才可能使这个过程逆转。 23基因转变是真菌类偶然改变性别的方式;正常情况下,一次接合产生等量的雄性与雌性孢子,但偶然也会出现1:3或3:1的比例。 六、简答题 1 假如发生了碱基对的错配会产生什么表型,它们怎样被修复? 2 为什么DNA的甲基化状态可以为复制的调节和DNA的修复所利用? 3, 错配修复的方向可以怎样被调节(突变型到野生型或野生型到突变型)? 4 RecA蛋白是怎样调节SOS反应的? 5 为什么基因内互补只发生在:(1)某一基因座的等位基因间;(2)这些基因座的特殊等位基因对间? 七、分析题 1 实验结果表明所研究细菌的一个操纵子具有三个相似拷贝,它编码一个关键酶的亚基。由于没有检测到第三个碱基简并性(摇摆性)现象,由此说明接近的相同性(99)是由于DNA修饰作用的结果。请问这涉及哪些可能的机理? 2 根据对细菌限制和修复系统的知识,设计一个简单的实验来检测你收集的菌株是否有原噬菌体的存在。 3 除了uvrABC内切核酸酶修复、重组修复和SOS修复,细菌还具备一种对嘧啶二聚体更有效的修复系统。这个现象是在一个关于紫外线对细菌影响的调查中为了确定一个失控的数量而发现的。发现过程可以假设为:你与你的同事正试图利用紫外线作为诱变剂来分离大肠杆菌中的突变体,为得到足够的突变子,你觉得有必要使用对细菌杀伤率为9999的辐射剂量。比起你的同事你已经获得了更可靠的结果,而他要用10倍至100倍的辐射剂量才能获得同样的杀伤率。因为你常在晚上他离开后才做实验,所以他有点怀疑你结果的可靠性,他坚持你早上来做一个平行实验。当你们都得到同一结论时你们两人都感到惊奇,你有些懊恼,因为结果更接近你同事的结论;当你在晚上重复平行实验时,你的同事对结果感到很惊奇,结果正如你以前所描述的一样。你发现在下午要取得同样的杀伤率需要用比早上更高的辐射剂量,晴天比阴天需要的剂量高,你的实验室朝西,是什么因素影响着你的实验? 4. 一个基因型为a+b+c+d+e+并对链霉素敏感的E.coli Hfr菌株与基因型为a-b-c-d-e-并对链霉素耐性的F-菌株结合,30分钟后,用链霉素处理,然后从成活的受体中选出e+型的原养型,发现他们的其它野生型(+)基因频率如下:a+ 70%, b+ 0%, c+ 85%, d+ 10%。问:a, b, c, d, 四个基因与供体染色体的起点(最先进入F受体之点)相对位置如何?2、 红色面包霉中一染色体的一个臂上有a、 b、c三个基因,现a b + + c得到如下子囊,试判断基因顺序,并计算所有基因间及基因一着丝粒间的距离。 45 5 146 1 10 20 15 58 a b + a b + a b + a b + a b + a b + a b + a b + + b c a + + a b + + + + a + c + + c a b c + b + a + + + b c + + c a b c + b + a b + + + + a + c + + c + + c + + c + + c + + c + + c + + c + +c本章习题1解释下列名词:F-菌株、F+菌株、Hfr菌株、F因子、F因子、烈性噬菌体、温和性噬菌体、溶原性细菌、部分二倍体。2 为什么说细菌和病毒是研究遗传学的好材料?3试比较大肠杆菌和玉米的染色体组。 4对两个基因的噬菌体杂交所测定的重组频率如下:a-b+a+b-3.0%a-c+a+c-2.0%b-c+b+c-1.5% 试问:(1)a、b、c 3个突变在连锁图上的次序如何?为什么它们之间的距离不是累加的?(2)假定三因子杂交,ab+ca+bc+,你预期哪种类型的重组体频率最低?(3)计算从 所假定的三因子杂交中出现的各种重组类型的频率。5 噬菌体三基因杂交产生以下种类和数目的后代:+235pqr270pq+62p+7+q+40p+r48+qr4+r60共:726 试问:(1)这一杂交中亲本噬菌体的基因型是什么?(2)基因次序如何?(3)基因之间的图距如何?6试比较转化、接合、转导、性导在细菌遗传物质传递上的异同。7假定你证明对过去一个从未描述过的细菌种有遗传重组,如使ab+菌株与a+b菌株混合培养,形成a+b+、ab的重组类型,试说明将采用哪种方式来确定这种重组是转化、转导还是接合的结果。8在接合实验中,Hfr菌株应带有一个敏感的位点(如azis或strs),这样,在发生接合后可用选择培养基消除Hfr供体。试问这个位点距离Hfr染色体的转移起点(O)应该远还是近,为什么?9.供体菌株为Hfr arg- leu+ aziS strS,受体菌株F- arg+ leu- aziR strS。为检出和收集重组体F- arg+ leu+ aziR,应用下列哪一种培养基可以完成这一任务,为什么其它的培养基不可以?. 基本培养基加链霉素,. 基本培养基加叠氮化钠和亮氨酸,. 基本培养基加叠氮化钠,. 选择培养基中不加精氨酸和亮氨酸,加链霉素,. 基本培养基加链霉素和叠氮化钠。10大肠杆菌3个Hfr菌株利用中断交配技术,分别与营养缺陷型F-菌株交配,获得下表结果:供体位点进入时间(min)HfrP4XHfrKL98HfrRa-2gal+116770thr+945087xyl+73298lac+25879his+389443ilu+77334arg+621819试利用上述资料建立一个大肠杆菌染色体图,包括以min表示的图距。并标出各Hfr菌株F因子的插入位点及转移方向。11利用大肠杆菌菌株杂交,一个是a+b+c-d+,另一个是a-b-c+d-。从重组体中选择b+c+基因,而不选a及d的等位基因,当检查b+c+时,大部分都是a-d-。试问:.哪一个菌株是供体?.从这个实验可以得到什么结论?12如果把一个大肠杆菌放在含的培养基上它并不裂解,你是否认为这个大肠杆菌是溶原性的?13Hfr met+ thi+ pur+F- met- thi- pur-杂交。中断杂交试验表明,met+最后进入受体。所以只在含thi和pur 的培养基上选择met+接合后重组体。检验这些接合后体存在的thi+和pur+,发现各基因型个体数如下:met+ thi+ pur+280met+ thi+ pur-0met+ thi- pur+6met+ thi- pur-52试问:(1)选择培养基中为什么不考虑met?(2)基因次序是什么?(3)重组单位的图距有多大?(4)这里为什么不出现基因型met+ thi+ pur-的个体? 14大肠杆菌中3个位点ara、leu和ilvH是在1/2min的图距内,为了确定三者之间的正确顺序及图距,用转导噬菌体P1侵染原养型菌株ara+leu+ilvH+,然后使裂解物侵染营养缺陷型菌株ara-leu-ilvH-,对每个有选择标记基因进行实验,确定其未选择标记基因的频率,获下表结果:实验选择的标记基因未选择的标记基因1ara+60%leu+ 1%ilvH+2ilvH+5%ara+ 0%leu+3ara+ilvH+0%leu+根据上表3个实验结果,试说明:(1)三个基因间的连锁顺序如何?(2)这个转导片段的大小。15肺炎双球菌中基因型为strS mtl -(mtl +为发酵甘露醇(mannitol)的基因,mtl -不能发酵甘露醇)的细菌在一个试验中由具有strRmtl + 的DNA进行转化,在另一个试验中由具有strRmtl -的以及具有strSmtl+的两种DNA混合物进行转化,其结果如下:供体DNA转化产生的基因型的百分数strRmtl-strSmtl+strRmtlstrRmtl-4.30.400.17StrR mtl-strSmtl-2.80.850.0066试问:(1) 上表中第一横行所列结果说明了什么?为什么?(2) 上表中第二横行所列结果说明了什么?为什么?16在普遍性转导中,供体大肠杆菌细胞的基因型是trpC+pyrF-trpA-,受体细胞的基因型是trpC-pyrF+trpA+。由P1噬菌体媒介转导,对trpC+进行选择,用选择的细胞进一步检查其它基因的转导情况,得到以下的结果:基因型后代数目trpC+ pyrF- trpA-274trpC+ pyrF+ trpA-279trpC+ pyrF- trpA+2trpC+ pyrF+ trpA+46试问:(1)这3个基因的次序是什么?(2)TrpC和pyrF以及trpC和trpA的合转导频率是多少?(3)假定P1染色体长为10mm,这些基因之间的物理距离是多少?17大肠杆菌Hfr gal+lac+(A)与F-gal-lac-(B)杂交,A向B转移gal+比较早而且频率高,但是转移lac+迟而且效率低。菌株B的gal+重组体仍旧是F-。从菌株A可以分离出一个变体叫做菌株C,菌株C向B转移lac+早而且频率高,但不转移gal+。在CB的杂交中,B菌株的lac+重组体一般是F+。问菌株C的性质是什么?18在大肠杆菌中发现了一个带有麦芽糖酶基因(mal)的F因子。将Fmal+引入F-mal-菌株。这样所产生的细胞多数能转移Fmal+到F-细胞中,偶然有些细胞可以从mal-基因开始把整个细菌染色体转移到F-中。这些细胞可分为两类:(a)转移mal+很早,mal-很迟;(b)转移mal-很早,mal+很迟。画出F因子与染色体相互作用的图,表明(a)型细胞最大的可能是如何产生的,(b)型细胞又是如何产生的。 参考答案1解释下列名词:F-菌株、F+菌株、Hfr菌株、F因子、F因子、烈性噬菌体、温和性噬菌体、溶原性细菌、部分二倍体。F-菌株:未携带F因子的大肠杆菌菌株。F+菌株:包含一个游离状态F因子的大肠杆菌菌株。Hfr菌株:包含一个整合到大肠杆菌染色体组内的F因子的菌株。F因子:大肠杆菌中的一种附加体,控制大肠杆菌接合过程而使其成为供体菌的一种致育因子。F因子:整合在宿主细菌染色体上的F因子,在环出时不够准确而携带有染色体一些基因的一种致育因子。烈性噬菌体:侵染宿主细胞后,进入裂解途径,破坏宿主细胞原有遗传物质,合成大量的自身遗传物质和蛋白质并组装成子噬菌体,最后使宿主裂解的一类噬菌体。温和性噬菌体:侵染宿主细胞后,并不裂解宿主细胞,而是走溶原性生活周期的一类噬菌体。溶原性细菌:含有温和噬菌体的遗传物质而又找不到噬菌体形态上可见的噬菌体粒子的宿主细菌。部分二倍体:当F+和Hfr的细菌染色体进入F-后,在一个短时期内,F-细胞中对某些位点来说总有一段二倍体的DNA状态的细菌。2 为什么说细菌和病毒是研究遗传学的好材料?答:与其他生物体相比,细菌和病毒能成为研究遗传学的好材料,具有以下7个方面的优越性:(1)世代周期短:每个世代以min或h计算,繁殖速度快,大大缩短了实验周期。(2)易于管理和进行化学分析 个体小,繁殖方便,可以大量节省人力、物力和财力;且代谢旺盛,繁殖又快,累积大量的代谢产物。(3)便于研究基因的突变 细菌和病毒均属于单倍体,所有突变都能立即表现出来,不存在显性掩盖隐性的问题。(4)便于研究基因的作用 通过基本培养基和选择培养基的影印培养,很容易筛选出营养缺陷型,利于生化研究。(5)便于基因重组的研究 通过细菌的转化、转导和接合作用,在一支试管中可以产生遗传性状不相同的后代。(6)便于用于研究基因结构、功能及调控机制的材料 细菌和病毒的遗传物质简单,基因定位和结构分析等易于进行且可用生理生化方法进行基因的表达和调控分析。(7)便于进行遗传操作 细菌质粒和病毒作为载体,已成为高等生物的分子遗传学研究和生物工程的重要工具。3试比较大肠杆菌和玉米的染色体组。答:大肠杆菌属于原核生物、而玉米是真核生物,二者基因组存在很大的区别:.基因组大小不同:大肠杆菌DNA以单个染色体的形式存在,长约1100m,分子量约为2.6109;玉米以10对染色体存在(n=10),基因组非常庞大。.染色体组成不同:大肠杆菌DNA不与组蛋白结合,也不形成核小体结构,是一个封闭的大环结构;而玉米DNA与组蛋白结合,形成典型的核小体结构,呈直线排列,并多级折叠成光学显微镜下可见的染色体结构。.大肠杆菌的基因发生突变,在当代个体中即可表现出来,而在玉米中基因组中则存在基因的显隐性关系。.DNA合成时期不同:大肠杆菌DNA在整个细胞生长过程中都可进行,而玉米DNA只在细胞周期的S期合成。.复制起点不同:大肠杆菌只有一个复制起点,在而玉米存在多个复制起点。.DND组成不同:大肠杆菌中一般由单一序列组成,且基因的排列方式非常紧凑,存在重叠基因现象;而玉米中则存在大量的重复序列,许多基因以基因家族方式存在。4对两个基因的噬菌体杂交所测定的重组频率如下:a-b+a+b-3.0%a-c+a+c-2.0%b-c+b+c-1.5% 试问:(1)a、b、c 3个突变在连锁图上的次序如何?为什么它们之间的距离不是累加的?(2)假定三因子杂交,ab+ca+bc+,你预期哪种类型的重组体频率最低?(3)计算从 所假定的三因子杂交中出现的各种重组类型的频率。答:.a、b、c3个突变在连锁图上的次序为右图,由于噬菌体的DNA是环状结构,而不是线状排列,因此它们之间的距离不是累加的。.根据的三个基因间的连锁距离可知,基因间重组率较低的是ac和bc,因此ab+c+和a+bc两种类型的重组体频率最低。. 根据 的重组率可知:c基因在中间:bc间单交换产生acb和a+ c+b+的频率共为1.5%;ac间单交换产生a+cb+和a c+b的频率共为2.0%;双交换a c+b+和a+cb的频率共为0.03%。5 噬菌体三基因杂交产生以下种类和数目的后代:+235pqr270pq+62p+7+q+40p+r48+qr4+r60共:726 试问:(1)这一杂交中亲本噬菌体的基因型是什么?(2)基因次序如何?(3)基因之间的图距如何?答:(1)这一杂交中亲本基因型是+和pqr;(2)根据杂交后代中双交换类型和亲本基因型,便可推断出基因次序为:qpr或rpq;(3)基因之间的图距:类型基因型数目比例()重组率()亲本类型+235505pqr270单交换型Ipq+6212216.8+r60单交换型IIp+r488812.1+q+40双交换型p+7111.5+qr4共:72618.313.629 pr之间的遗传距离为18.3遗传单位;pq之间的遗传距离为13.6遗传单位;因为有双交换的存在,qr之间的遗传距离为:28.921.5=31.9遗传单位。6试比较转化、接合、转导、性导在细菌遗传物质传递上的异同。答:这四种现象的相同之处是:都是细菌的遗传物质DNA在不同的细菌细胞之间传递,从而使受体细胞遗传物质发生重组。不同之处是:转化是裸露的DNA直接与处于感受态的细胞之间的互作,进入受体细胞,发生重组;接合是由于F因子的整合产生Hfr菌株,在F因子进行转移时,供体菌遗传物质也被带入受体菌,实现重组;性导是Hfr菌株中F因子的错误环出,产生了携带有供体菌遗传物质的F因子,接合时随F因子的转移而使供体菌遗传物质导入到受体菌中;转导是细菌的一段染色体被错误地包装在噬菌体的蛋白质外壳内,并通过感染而转移到另一个受体菌内。7假定你证明对过去一个从未描述过的细菌种有遗传重组,如使ab+菌株与a+b菌株混合培养,形成a+b+、ab的重组类型,试说明将采用哪种方式来确定这种重组是转化、转导还是接合的结果。答:参照戴维斯的U型管试验,将两菌株放入培养,后代中发现如无重组类型,则该遗传重组类型为接合产生的;后代中如有重组类型,可能是转化或转导产生的;可进一步试验,在U型管中加入DNA酶,检测后代有无重组,如无重组则为该类型为转化产生的,如有则是转导产生的。8在接合实验中,Hfr菌株应带有一个敏感的位点(如azis或strs),这样,在发生接合后可用选择培养基消除Hfr供体。试问这个位点距离Hfr染色体的转移起点(O)应该远还是近,为什么?答:这个位点距离Hfr染色体的转移起点(O)应该是远。因为如这个敏感位点距转移起点(O)近情况下,Hfr菌株的基因从原点处开始进入受体菌,使得敏感位点较早地重组进受体菌中,在中断杂交后,除去Hfr菌株的同时也除去了重组有敏感位点的重组个体,这样就无法检测敏感位点之后的基因重组距离了。9.供体菌株为Hfr arg- leu+ aziS strS,受体菌株F- arg+ leu- aziR strS。为检出和收集重组体F- arg+ leu+ aziR,应用下列哪一种培养基可以完成这一任务,为什么其它的培养基不可以?. 基本培养基加链霉素,. 基本培养基加叠氮化钠和亮氨酸,. 基本培养基加叠氮化钠,. 选择培养基中不加精氨酸和亮氨酸,加链霉素,. 基本培养基加链霉素和叠氮化钠。答:3号培养基合适,因为:1号培养基,所有菌株均为链霉素敏感,在该培养基中将抑制所有的菌株;2号培养基,无法区分重组体和受体菌;3号培养基,加叠氮化钠可以抑制供体菌的生长,同时又不加亮氨酸,受体菌也无法生长;4号培养基中,加链霉素将抑制所有菌株;5号培养基,加链霉素也将将抑制所有菌。10大肠杆菌3个Hfr菌株利用中断交配技术,分别与营养缺陷型F-菌株交配,获得下表结果:供体位点进入时间(min)HfrP4XHfrKL98HfrRa-2gal+116770thr+945087xyl+73298lac+25879his+389443ilu+77334arg+621819试利用上述资料建立一个大肠杆菌染色体图,包括以min表示的图距。并标出各Hfr菌株F因子的插入位点及转移方向。答:根据上表结果可知各基因位点在不同菌株中的排列顺序:菌株供体位点HfrP4Xlac+gal+his+arg+xyl+ilu+thr+HfrKL98arg+xyl+ilu+thr+lac+gal+his+HfrRa-2ilu+xyl+arg+his+gal+lac+thr+11利用大肠杆菌菌株杂交,一个是a+b+c-d+,另一个是a-b-c+d-。从重组体中选择b+c+基因,而不选a及d的等位基因,当检查b+c+时,大部分都是a-d-。试问:.哪一个菌株是供体?.从这个实验可以得到什么结论?答:(1)一般重组类型占比例比亲本类型少,当检查b+c+时,大部分都是a-d-,因此a-b-c+d-基因型为受体菌。(2)本实验说明了F因子插入位点位于b c 之前,而离ad较远。12如果把一个大肠杆菌放在含的培养基上它并不裂解,你是否认为这个大肠杆菌是溶原性的?答:这个原始大肠杆菌是溶原性的。因为:当溶原性的大肠杆菌放入含噬菌体的培养基中时,由于大肠杆菌本身存在抗超数感染性质,因此不裂解;另外噬菌体是温和性噬菌体,侵染大肠杆菌之后,进入溶原状态,并不马上走裂解途径。13Hfr met+ thi+ pur+F- met- thi- pur-杂交。中断杂交试验表明,met+最后进入受体。所以只在含thi和pur 的培养基上选择met+接合后重组体。检验这些接合后体存在的thi+和pur+,发现各基因型个体数如下:met+ thi+ pur+280met+ thi+ pur-0met+ thi- pur+6met+ thi- pur-52试问:(1)选择培养基中为什么不考虑met?(2)基因次序是什么?(3)重组单位的图距有多大?(4)这里为什么不出现基因型met+ thi+ pur-的个体?答:(1)因为met+最后进入受体,易于检测出。(2)基因次序是thi+ pur+ met+。(3)重组单位的图距是:(4)在三个位点间发生双交换才有可能发生met+ thi+ pur-的个体,由于中断杂交的时间短或者所筛选的群体小,未能发现该个体。14大肠杆菌中3个位点ara、leu和ilvH是在1/2min的图距内,为了确定三者之间的正确顺序及图距,用转导噬菌体P1侵染原养型菌株ara+leu+ilvH+,然后使裂解物侵染营养缺陷型菌株ara-leu-ilvH-,对每个有选择标记基因进行实验,确定其未选择标记基因的频率,获下表结果:实验选择的标记基因未选择的标记基因1ara+60%leu+ 1%ilvH+2ilvH+5%ara+ 0%leu+3ara+ilvH+0%leu+根据上表3个实验结果,试说明:(1)三个基因间的连锁顺序如何?(2)这个转导片段的大小。答:. 三个基因间的连锁顺序:由实验1可知,ara基因距leu基因近,而距ilvH基因远;由实验2可知,ilvH基因距ara基因近,而距leu基因远;由实验3进一步验证,ilvH基因与ara基因间,无leu基因。因此三个基因的连锁顺序为:. 这个转导片段的大小:ilvH基因与ara基因间的并发转导中有15,与leu基因间未发生过转导,因此,这个转导片段的大小是从ilvH位点到ara和leu位点之间。15肺炎双球菌中基因型为strS mtl -(mtl +为发酵甘露醇(mannitol)的基因,mtl -不能发酵甘露醇)的细菌在一个试验中由具有strRmtl + 的DNA进行转化,在另一个试验中由具有strRmtl -的以及具有strSmtl+的两种DNA混合物进行转化,其结果如下:供体DNA转化产生的基因型的百分数strRmtl-strSmtl+strRmtlstrRmtl-4.30.400.17StrR mtl-strSmtl-2.80.850.0066试问:(1) 上表中第一横行所列结果说明了什么?为什么?(2) 上表中第二横行所列结果说明了什么?为什么?答:. strRmtl+的比例很小,说明这两个位点的相距较远。因为,DNA

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