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文档简介
全自动血细胞分析仪(三分群)基础理论,一、血液生理概要,1、血液:血液是由血细胞(红细胞、白细胞、血小板)和血浆组成的红色、粘稠、不透明、带腥味的混悬液。离体后的血液自然凝固后,分离出来的淡黄色液体称为血清,血液加抗凝剂后分离出来的淡黄色液体称为血浆。,2、血液的组成:,3、血液的功能:运输功能:气体、营养物质、代谢产物等协调功能:激素、酶类维护机体内环境稳定:pH、温度防御功能:止血、抗微生物、免疫反应等4、白细胞(1)人体外周血中的白细胞包括粒细胞、单核细胞和淋巴细胞,根据粒细胞胞浆中所含的特殊颗粒,将粒细胞分为中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。白细胞的主要功能是通过不同的方式和机制消灭病原体,消除过敏原及参与免疫反应、产生抗体,是机体抵御病原微生物等异物的主要防线。,(2)白细胞的生理,(3)参考值范围白细胞计数:成人:(410)109/L新生儿:(1520)109/L白细胞分类计数:百分率(%)绝对值(109/L)淋巴细胞2040(0.84)单核细胞38(0.120.8)中性粒细胞5070(27)嗜酸性粒细胞0.55(0.020.5)嗜碱性粒细胞01(01),5、红细胞:(1)红细胞检测的主要临床意义是用于贫血的诊断和治疗。正常的成熟红细胞形态为双凹圆盘状,细胞大小一致,平均直径7.2m,厚度约2m,淡粉红色,中央1/3为生理淡染区,胞质内无异常结构。在各种贫血时,红细胞可出现大小不一。凡直径10m者称为大红细胞,15m者称为巨红细胞,常见于巨幼细胞性贫血、肝脏疾病等;直径6m者称为小红细胞,多见于缺铁性贫血等疾病。,(2)红细胞生理:红细胞是血液中数量最多的有形成分,成熟红细胞的平均寿命约120d,衰老红细胞主要在脾破坏,分解为铁、珠蛋白和胆红素。(3)红细胞的功能:交换和携带气体。通过胞内血红蛋白来实现。(4)参考值范围:女性:(3.55.0)1012/L男性:(4.05.5)1012/L新生儿:(6.07.0)1012/L6、血红蛋白(1)血红蛋白是成熟红细胞的主要成分,是一种微红色的胶体物质,是呼吸载体,每克血红蛋白可携带氧1.34ml。血红蛋白约65%合成于有核红细胞,35%合成于网织红细胞。正常血红蛋白由珠蛋白与亚铁血红素组成。(2)参考范围:女性:110150g/L男性:120170g/L新生儿:170200g/L,7、血小板(1)骨髓中的骨髓造血干细胞分化成巨核细胞后,其胞浆裂解剥落即形成血小板。全身约有1/3的血小板滞留于脾脏细胞间,这种现象称“脾池化”,脾池内的血小板与循环中的血小板可互换。初生成的血小板体积较大,黏着力强,易于聚集和发生释放反应,有很强的止血和凝血功能,在循环血液中只有出生成的血小板有止血功能,且只能维持2d。血小板一部分在发挥其生理功能时解体,另一部分血小板衰老后在脾脏、肝脏、骨髓单核-巨噬细胞系统中破坏。(2)参考范围:(100300)109/L,8、血液标本的采集(1)静脉采血法部位:主要是肘静脉。其次:手背部、手腕部等静脉,幼儿可采用颈外静脉采血。采血器材:一次性注射器,检验用真空定量采血装置。采血步骤及注意事项(略),(2)毛细血管采血法部位:左手无名指指尖内侧。婴幼儿可采拇指或足跟内侧,特殊人员视情况而定。采血器材:一次性采血针、微量吸管采血步骤及注意事项(略),9、血液标本的保存标本若不能及时检测或需要保留以备复查时,应在室温保存。抗凝血在室温下,WBC、RBC、PLT可稳定24h,白细胞分类可稳定6-8h,血红蛋白可稳定数日,但2h后粒细胞形态即可发生变化,故需做镜下分类者应及早推制血片。虽然4条件下可延长血液贮存期,但会影响PLT和MPV值。,二、血液分析仪,1、现代血液分析仪特点:自动化程度增高、检测参数增多、精度增高、速度增快、指控功能强大、智能化程度增高。2、血液分析仪检测原理:电阻抗法(库尔特原理)设计基础光散射法3、血液分析仪主要功能:血细胞计数功能血细胞分类功能,电阻抗法原理(库尔特原理)1、20世纪50年代初,美国库尔特(CoulterWH)发明并申请了粒子计数技的设计专利,其原理是根据血细胞非传导性的性质,对电解质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测作为基础,来进行血细胞计数和体积测定。2、库尔特原理图细胞计数池中,小孔内外两个电极和稀释液(等渗电解质溶液)构成一个电流回路,在负压作用下,血细胞通过小孔,电极能感应到一个瞬间的电压变化,并将其转换成脉冲信号。脉冲大小反映细胞体积,脉冲的数量代表细胞计数的结果。,3、电阻抗法仪器的主要组成信号发生器(脉冲检测器)放大器(把微伏放大为伏级的脉冲信号)阀值调节(计数不同细胞有不同的阀值)甄别器(去除假脉冲信号)整形器(把波形调整为标准一致的平顶波)计数系统(把不同的脉冲区分成不同细胞并计数)4、白细胞检测原理根据电阻抗的原理,经溶血剂处理脱水的不同体积的白细胞(35-450fL)通过小孔时产生脉冲的大小的明显差异而区分相应的三群细胞,5、红细胞检测原理(注意白细胞增高干扰)(1)稀释血液中含有白细胞,当血液进入红细胞检测通道时,红细胞检测的各项参数中均含有白细胞因素。正常时,血液红细胞与白细胞的比列约为(500-750):1,因此,白细胞因素可忽略不计。(2)当病理情况下,如白血病时,白细胞数明显增高,同时又伴有贫血时,使所得红细胞参数可产生明显误差。(3)红细胞其他参数的检测:MCV、MCH、MCHC、HCT、RDW等6、血红蛋白检测原理(比色原理),7、血小板检测原理根据电阻抗法,血小板随红细胞在一个系统中进行检测,在红细胞/血小板计数池中计数2fL30fL的颗粒为血小板。为了增加血小板准确性,设置了血小板直方图(浮动界标计数、拟合曲线技术等)。8、血液分析仪检测参数英文缩写词和中文名称及单位。英文缩写中文名称单位英文缩写中文名称单位WBC白细胞计数109/LMCV红细胞平均体积fLLymph#淋巴细胞绝对值109/LMCH红细胞平均血红蛋白量pgMid#中间细胞绝对值109/LHCT血细胞比容/红细胞压积%Gran#中性粒细胞绝对值109/LRDW-SD红细胞体积分布宽度标准差fLLymph%淋巴细胞百分率%RDW-CV红细胞体积分布宽度变异系数%Mid%中间细胞百分率%PLT血小板计数109/LGran%中性粒细胞百分率%MPV血小板平均体积fLRBC红细胞计数1012/LPCT血小板比容/血小板压积HGB血红蛋白g/LPDW血小板体积分布宽度%MCHC红细胞平均血红蛋白浓度g/LP-LCR大血小板比率%,三、血液分析仪的临床应用,1、细胞直方图:细胞体积分布图形,横坐标为细胞体积大小,纵坐标为不同体积细胞的相对频率(数量)。(1)白细胞直方图正常白细胞直方图,在35450fL范围内将白细胞分为3群,左侧峰又高又陡为淋巴细胞峰,最右侧又低又宽为中性粒细胞峰,左右两峰间的谷区较平坦为单核细胞区。,白细胞直方图变化的部分原因淋巴细胞峰左侧异常:提有核红细胞、血小板聚集、巨大血小板、未溶解红细胞、疟原虫、冷凝集蛋白、脂类颗粒、异形淋巴细胞淋巴细胞峰右移,与单核细胞谷左侧相连并抬高:急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、异形淋巴细胞单核细胞谷抬高、增宽:原始或幼稚细胞、浆细胞、嗜酸性粒细胞增多、嗜碱性粒细胞增多、单核细胞增多单核细胞谷与中性粒细胞峰之间异常:未成熟的中性粒细胞、异常细胞亚群、嗜酸性粒细胞增多中性粒细胞峰右移、抬高、增宽:中性粒细胞绝对值增多直方图多区出现异常:以上多种原因引起,(2)红细胞直方图正常红细胞直方图,在36360fL范围内分布两个细胞群体,从50125fL区域有一个两侧对称、较狭窄的曲线,为正常大小的红细胞,从125200fL区域有另一个低而宽的曲线,为大红细胞、网织红细胞。当红细胞体积大小发生变化时,峰可左移或右移,或出现双峰。(3)血小板直方图正常血小板直方图,在230fL范围内分布,呈左偏态分布,集中分布于215fL内。当血小板体积增大时,有明显的拖尾现象。小红细胞或红细胞碎片干扰会出现尾部抬高。,2、检测参数临床意义(1)白细胞参数中性粒细胞:病理性增多:急性感染或炎症、广泛组织损伤或坏死、急性溶血、急性失血、急性中毒、恶性肿瘤等。减少:中性粒细胞绝对值低于1.5109/L,称为粒细胞减少症;低于0.5109/L时称为粒细胞缺乏症。病因:病毒感染性疾病、血液系统疾病(再障、某些急性白血病)、物理化学因素(放射线等)、单核-巨噬细胞系统功能亢进(门脉性肝硬化)、系统性红斑狼苍、某些自身免疫性疾病、过敏性休克等。淋巴细胞:病理性增多:病毒感染性疾病、再障(相对增多)、淋巴细胞性白血病、淋巴瘤、组织移植后排斥反应等。减少:主要见于应用肾上腺皮质激素、烷化剂、抗淋巴细胞球蛋白、接触放射线、免疫缺陷性疾病、丙种球蛋白缺乏症等。单核细胞:病理性增多:某些感染(疟疾、黑热病、结核病等)、血液病(单核细胞白血病、骨髓增生异常综合征等)、急性传染病或急性感染的恢复期。减少:临床意义不大。,(2)红细胞参数MCV(fL)MCH(pg)MCHC(g/L)举例正常细胞性贫血82-9527-31320-360再障、急性失血性贫血、急性溶血性贫血、白血病等大细胞性贫血巨幼红细胞性贫血单纯小细胞性贫血慢性感染、炎症、肝病、尿毒症、恶性肿瘤、风湿性疾病等所致的贫血小细胞低色素性贫血缺铁性贫血、地中海贫血、铁粒幼细胞性贫血等MCVRDW常见疾病大细胞均一性贫血增高正常部分再障大细胞非均一性贫血增高增高巨幼红细胞性贫血、免疫溶血性贫血、镰状细胞性贫血正细胞均一性贫血正常正常急性失血性贫血、慢性病、脾切除正细胞非均一性贫血正常增高再障、PHN、骨髓纤维化、骨髓发育不良小细胞均一性贫血减低正常珠蛋白生成障碍性贫血、球形细胞增多症小细胞非均一性贫血减低增高缺铁性贫血,(3)血小板参数PLT减少:通常50109/L,患者即有自动出血症状。见于:血小板生成障碍、血小板破坏过多、血小板消耗增多、血小板自身异常、血小板分布异常(脾大、肝硬化等)PLT增多:慢性粒细胞性白血病、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、急性
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