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文档简介
实验七生化反应培养基制备,一、目的,1、掌握各类培养基的名称和成分;2、掌握各类生化反应原理和结果;3、掌握各类培养基制备程序及注意事项。,二、内容,1、糖发酵培养基300ml1组;2、双糖铁培养基150ml2组+7组;3、蛋白胨水培养基150ml3组;4、葡萄糖蛋白胨水培养基150ml4组、5组;5、枸橼酸盐培养基150ml6组。,三、操作,1、称量一定要先注一层水在烧瓶底层,然后倒入粉剂药粉;2、溶化反复溶化到肉眼见不到较大颗粒为止;溶化前需标注水线,供溶化后补水;溶化时需要玻棒搅拌,注意不要使培养基溢出;,3、调节pH到7.4,蛋白胨水pH调至7.2;4、分装每组25支试管分装;糖发酵培养基和双糖铁培养基分装2/5高度,其他的(葡萄糖蛋白胨水、蛋白胨水、枸橼酸盐培养基)1/3高度;糖发酵管中小倒管一定要排空其中气体;,5、高压灭菌含糖培养基(糖发酵、双糖铁、葡萄糖蛋白胨水培养基)10磅压力灭菌,其他的(蛋白胨水、枸橼酸盐培养基)15磅压力灭菌;6、摆斜面、冷却、放置冰箱保存,四、结果记录,记录颜色、斜面、高层斜面、分析各生化实验选用什么培养基。,五、课后小结,本次实验称量和灭菌温度非常重要,希望大家多加注意。,附注:,1、双糖铁培养基成分:蛋白胨1g、牛肉膏3g、NaCl5g、乳糖10g、葡萄糖1g、硫代硫酸钠0.2g、硫酸亚铁0.2g、琼脂16g、蒸馏水1000ml、0.4酚红46d。2、糖发酵培养基成分:蛋白胨水或肉膏汤(pH7.47.6)1000ml、所需糖、醇或苷类物质510g、1.6溴甲酚紫乙醇溶液1ml。,3、蛋白胨水成分:蛋白胨20g、NaCl5g、蒸馏水1000ml。4、葡萄糖蛋白胨水成分:蛋白胨5g、葡萄糖5g、K2HPO45g、蒸馏水1000ml。5、枸橼酸盐培养基成分:NaCl5g、硫酸镁0.2g、磷酸二氢胺1g、枸橼酸钠5g、蒸
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