凝集反应课件听课.ppt

？,概述,一、定义凝集反应是指颗粒性抗原（细菌、红细胞）或附着在载体上的可溶性抗原(或抗体)与相应的抗体（或抗原）在适量的电解质存在的条件下，经一定时间后凝聚成肉眼可见的凝集物。,参加反应的抗原称为凝集原,抗体称为凝集素。,二、分类,（coombs试验）,直接凝集反应,定义：直接用颗粒性抗原与抗体结合，出现肉眼可见的凝集现象。特点：*抗原呈颗粒状，制成的液体为悬液*抗原颗粒相对比抗体大,形成的凝集物主要成分为抗原*抗原的比表面积比抗体小，试验时为使抗体不过剩，通常稀释抗体*以出现凝集现象的抗体最高稀释度判断效价,一、玻片凝集试验,已知抗体,未知抗原（待检标本）,?,+,凝集团块,混浊,YES,NO,O抗原（菌体抗原）致密的颗粒状凝集物O凝集H抗原（鞭毛抗原）疏松的絮状凝集物H凝集Vi抗原（表面抗原）致密的颗粒状凝集物Vi凝集,ABO血型鉴定,血型系统,实验原理,标准抗A血清,含抗凝集素使型、AB型红细胞的凝集原凝集,含抗凝集素使型、AB型红细胞的凝集原凝集,标准抗B血清,实验步骤,1、标记玻片：取洁净玻片一张，用笔在玻片两端分别标明AB,B,A,2、滴加血请：在玻片AB两端分别滴加标准抗A和抗B血清各一滴。,抗A抗体,抗B抗体,3、消毒取血,用无菌棉签蘸取消毒液，消毒左手无名指指腹皮肤，用消毒采血针垂直刺入消毒皮肤处取血各一滴分别涂于玻片的标准抗A血清和标准抗B血清中，分别用牙签将其混匀,4、观察结果,静置1015分钟后用肉眼观察有无凝集现象。,结果判断,A型,标准抗A血清,标准抗血清,根据有无凝集现象判定血型,B型,AB型,O型,方法评价:定性试验简便和快速敏感度低,临床应用:菌种鉴定血清学分型血型鉴定,试管凝集试验,定量抗原（已知）,+,系列稀释抗体（待检血清）,不同程度的凝集反应（阳性）,确定抗体的滴度(凝集效价),实验材料：伤寒杆菌O菌液、待测血清、生理盐水,2.方法：,0.5,0.5,0.5,0.5,0.5,0.5,0.5,0.5,0.5,1:20,1:40,1:80,1:160,1:320,0.5,弃掉,1,2,3,4,5,0.1,6,0.9,生理盐水(ml),待测血清,对照管,0.5ml,0.5ml,0.5ml,0.5ml,0.5ml,伤寒杆菌O菌液,0.5ml,0.5ml,0.5ml,0.5ml,0.5ml,0.5ml,抗体稀释度,彻底混匀,56,1h,4.预期结果,+,很小的凝集颗粒,混浊,-,无凝集现象,与对照相同,+,小、部分凝集块,中等混浊,+,大多凝集管底,轻度混浊,+,大的凝集块,清亮,凝集程度,沉淀,上清,管底沉淀,凝集程度,最高稀释比例,待测血清的滴度,方法评价：半定量试验简便、快速敏感度低,临床应用：肥达试验外斐试验布鲁菌病交叉配血试验,间接凝集试验,将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象,分类,正向间接凝集,用抗原致敏载体-检测抗体,间接乳凝试验检测类风湿因子间接炭凝试验检测梅毒反应素间接血凝试验检测猪瘟抗体,反向间接凝集试验,用抗体致敏载体-检测抗原,反向间接血凝试验检测甲胎蛋白、乙肝表面抗原,间接凝集抑制试验,用抗原致敏载体-检测抗原,妊娠免疫诊断试验,孕妇尿中，绒毛膜促性腺激素（HCG）含量明显增高。（HCG是可溶性抗原）反之，非孕妇尿中HCG含量甚微，不足以消耗掉抗HCG抗体。,实验材料,1、标本：孕妇尿（HCG阳性）、待检尿、正常尿、试剂：兔抗人HCG血清、HCG致敏的乳胶颗粒、器材：载玻片、滴管、玻棒,四、实验方法,加尿液标本加兔抗人HCG免疫血清加HCG致敏的乳胶颗粒观察结果,混匀静止2分钟,混匀静止2分钟,孕妇尿,待检尿,正常尿,1,2,3,五、实验结果,待检尿若出现白色细小凝集为妊娠诊断试验阴性若呈均匀浑浊乳状液为妊娠诊断试验阳性。,孕妇尿呈现白色均匀浑浊乳状液。,正常尿出现均匀一致的白色细小凝集物。,间接凝集试验,小结,凝集反应是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被抗原的颗粒性载体与相应抗体结合后，可出现肉眼可见的凝集现象。可以分为直接凝集