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文档简介

免疫实验,1,免疫学实验六,2,免疫实验,操作1、溶菌酶测定P.562、豚鼠过敏性休克3、血脑屏障,3,免疫实验,【实验原理】溶菌酶是一种小分子蛋白,分子量约14kD,由129个氨基酸组成,属一种碱性蛋白质。它能与细菌牢固结合,并通过水解革兰阳性菌细胞壁中的粘肽成份,而致细菌溶解。革兰阴性菌的细胞壁粘肽层的外面含有脂多糖和脂蛋白,在一般情况下不受溶菌酶的影响。【主要试剂与器材】1.溶壁微球菌溶壁微球菌是从空气中分离出的一种革兰阳性球菌,其对营养要求不高,在普通培养基生长良好,菌落呈黄色,1个月传代1次或冻干保存。2.琼脂粉(优质)溶于1/15mol/LpH6.4PBS。3.溶菌酶溶菌酶标准品。4.新鲜鸡蛋清、唾液、人血清。5.无菌打孔器(孔径5mm左右)、毛细滴管。,4,免疫实验,【结果判断】加唾液孔和标准溶菌酶孔周围的溶壁微球菌被溶解,可见圆形透亮区,即溶菌环。溶菌环的大小与溶菌酶的含量成正比。,5,免疫实验,6,免疫实验,原理注射异种蛋白IgE(致敏状态)再次较大剂量相同抗原注射,抗原与IgE结合肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒释放活性介质过敏性休克(兴奋不安、抓鼻、呃逆、竖毛、大小

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