血液一般检查PPT课件

-,1,血液一般检查,红细胞检查,-,2,一、红细胞计数,红细胞（redbloodcell）起源于骨髓造干细胞，在促红细胞生成素（erythropoi-etin，EPO）等作用下分化成原始红细胞，再经过数次有丝分裂依次发育为早幼、中幼和晚幼红细胞。晚幼红细胞已丧失分裂能力，经过脱核而成为网织红细胞。此过程约需72h。网织红细胞再经过48h左右即发育成完全成熟的红细胞。成熟红细胞和部分网织红细胞进入外周血。入血后红细胞平均寿命120d。衰老红细胞主要在脾脏破坏，分解为铁、原卟啉和珠蛋白，分别参与铁、胆色素和蛋白质代谢。,-,3,正常情况下，红细胞的生成破坏在红细胞生成素及其他神经体液因素的调节下保持动态平衡，血中红细胞数量相对恒定。一旦这一平衡被除数打破，红细胞可发生质和量的改变，从而引起一系列疾病。红细胞内主要成分是血红蛋白，其携带O2和CO2的生理功能是通过其内含的血红蛋白来完成的。,-,4,红细胞计数（redbloodcellcount，RBC）即测定单位体积血液中红细胞的数量。其方法有显微镜计数法及血细胞分析仪法本节主要述及显微镜计数法。红细胞显微镜计数法指用等渗稀释液将血液稀释一定倍数后，滴入改良Neubauer计数板，在显微镜下计数一定范围内的红细胞数，经换自即可求得每升血液中的红胞数。,-,5,红细胞稀释液有：Hayem液：由NaC1、Na2SO4、HgCl2和蒸馏水组成。它们的作用分别是调节渗透压，提高比重防止细胞粘连及防腐。此配方的主要缺点是遇高球蛋白血症患者，由于蛋白质沉淀而使红细胞易凝集。枸橼酸钠稀释液：配制简单，由枸橼酸钠和甲醛及水组成，此液可使红细胞在稀释后较长时间保持正常形态并且不凝集，故此液应用较广。普通生理盐水或加1%甲醛的生理盐水：急诊时如无红细胞稀释液可用此液代替。红细胞数/L5个中方格内红细胞数510201106,-,6,【测定方法及评价】同白细胞计数。【参考值】成年男性（4.05.5）1012/L成年女性（3.55.0）1012/L新生儿（6.07.0）1012/L【质量控制】1.计数误差同白细胞计数。2.白细胞的影响经红细胞稀释液处理后，白细胞与红细胞同时存在，通常在计数时把白细胞也计数在内。但在一般情况下白细胞较少，仅相当于红细胞的1/5001/1000，实际影响很小，可以忽略不计。但如遇白细胞过高者（一般WBC100109/L），做红细胞计数时，则应将其扣除。方法有两种：一种是直接将病人红细胞数减去白细胞数。,-,7,如某病人红细胞数为2.61012/L，白细胞数为200109/L，则病人实际红细胞数为2.41012/L。另一种方法是在高倍镜下注意识别，计数时勿将白细胞计入。在高倍镜下，白细胞体积常比红细胞略大，中央凹陷，细胞核隐约可见，无黄绿色折光。【临床意义】见血红蛋白测定。,-,8,二、血红蛋白测定,血红蛋白（hemoglobin，Hb）是红细胞的主要成分，由珠蛋白（blobin）与亚铁血红素（heme）组成。每个血红蛋白分子有4条珠蛋白肽链，每条折叠的珠蛋白肽链包裹一个亚铁血红素。血红蛋白按不带氧计算，分子量为64458。珠蛋白具有种属特异性。每个珠蛋白分子含有2条a链和2条非a链。正常成人的HbA包括含22珠蛋白肽链的HbA（占90%以上），含22珠蛋白肽链的HbA2（占2%3%）和含2r2珠蛋白肽链的（占2%以下）。新生儿和婴儿的HbF含量显著高于成人（新生儿HbF占HbF总量的70%左右），1岁后降至成人水平。,-,9,亚铁血红素无种属特异性，即人和各种动物者皆相同。它由2价铁和原卟啉组成。铁原子位于卟啉环中央，具有6条配位键。其中4条与原卟啉中心的4个吡咯氮原子连接。另2条配位键与血红素分子平面垂直，其中1条与珠蛋白肽链F肽段第8个氯基酸一组氨酸的咪唑氮原子连接；另一条为Hb呼吸载体，与O2结合时形成氧合血红蛋白（oxyhemoglobin，HbO2），如此配位键空着，则称还原血红蛋白（reducedhemoglobin，Hbred）。,-,10,如Fe2+被子氧化成Fe3+，则称高铁血红蛋白（hemiglobin，Hi）或正铁血红蛋白（methemoglobin，MHb）。如与O2结合的配位键被CO、S等占据，则形成各种血红蛋白衍生物，分别称为碳氧血红蛋白（BbCO）、硫化血红蛋白（SHb）等。在正常情况下，血液中血红蛋白主要为HbO和平共处Hbred，以及少量HbCO2和Hi。在病理情况下，HbCO和Hi可以增多，甚至出现SHb等血红蛋白衍生物。,-,11,血红蛋白测定，即测定血液中各种血红蛋白的总浓度。血红蛋白测定方法有多种，目前常用的是氰化高铁血红蛋白测定法和十二烷基月桂酰硫酸钠血红蛋白测定法。,-,12,【测定方法及评价】1.氰化高铁血红蛋白（HiCN）测定法血液在血红蛋白转化液中溶血后，除SHb外各种血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白（Hi），Hi再与试剂中CN-结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白（HiCN）。HiCN最大吸收波峰为540mm，波谷为504mm。在特定条件下，其毫摩尔消光系数为44L/（mmolcm）。故根据标本的吸光度，即可求得血红蛋白浓度。,-,13,氰化高铁血红蛋白转化液有多种配方，1983年全国临床检验方法学学术会议推荐采用文齐氏（VanKampenZijlstra）液，其主要由K3Fe（CN）6、KCN、KH2PO4及非离子表面活性剂等组成。此液特点是pH7.2+0.2，Hb转化快，5min即可完成，且加入非离子表面活性剂后能较好地防止混浊。,-,14,此法是ICSH和WHO推荐的参考方法，具有操作简便、结果稳定可靠、除SHb外其它Hb衍生物均可检测、读取吸光度后可直接定值等优点。计算公式如下：Hb(g/L)=251=A367.7式中为测定管吸光度，44为毫摩尔消光系数，64458/1000为1mmol/LHb溶液中所含Hb克数，251为稀释倍数。值得注意的是用此式直接计算必须使用符合WHO标准的分光光度计，否则需使用定值的HiCH参考液通过计算K值或制作标准曲线才能得到结果。,-,15,该法致命弱点是试剂中含剧毒药氰化钾，使用处理不当可造成严重公害。废液处理，首先以水稀释废液（1：1），再按每升上述稀释废液加次氯酸钠（安替福民）35ml，充分混匀后敞开容器口放置15h以上，使CN-氧化成CO2和N2挥发，或水解成CO32-和NH4+，再排入下水道。此法不能测定SHb，对HbCO转化较慢，遇高球蛋白或高白细胞血症试剂易混浊。,-,16,2.十二烷基月桂酰硫酸钠血红蛋白（SLS-Hb）测定法除SHb外，血液中各种Hb均可与低浓度十二烷基月桂酰硫酸钠（SLS）作用，生成SLS-Hb棕红色化合物。SLS-Hb最大吸收波峰538nm，波谷500nm。由于摩尔消光系数尚未最后确认因此不能用吸光度“A”值直接计算血红蛋白浓度。只有借助于经HiCN法定值的抗凝血或溶血液，制备标准工作曲线，间接得到血红蛋白浓度。,-,17,SLS-Hb突出优点是试剂无毒性，目前血红细胞分析仪测定Hb多采用此法以代替HiCN法。但其摩尔消光系数还未最后确定，故其需依赖HiCN法间接得到结果。另外SLS会破坏白细胞，不能用此稀释液做白细胞计数。,-,18,3.碱羟血红蛋白（AHD575）测定法准确度、精密度均较高，可用氯化血红素作标准品。但该法反应产物的吸收峰位于575nm处，溶液中碱性较高，目前血细胞分析仪均未采用。4.叠氮高铁轿红蛋白（HiN3）测定法与HiCN相似，准确度、精密度较高，试剂毒性比HiCN低，但仍存在公害问题。,-,19,5.溴代十六烷基三甲胺（CTAB）血红蛋白测定法该法试剂溶血性强又不破坏白细胞，可同时进行白细胞计数，可用于血细胞分析仪自动检测Hb和白细胞。缺点是对Hb测定结果的准确度和精密度略低于以上各法。,-,20,6.血细胞分析仪法：近年来，Hb测定逐渐以仪器法取代手工法，其优点是操作简单、快速，同时可以获得多项血细胞参数。但由于各型号仪器使用的溶血剂不同，形成Hb的衍生物也不同。某些溶血剂形成的衍生物稳定性较差，因此要严格控制溶血剂加入量及溶血时间，特别是半自动血细胞分析仪。有些溶血剂内虽加入了KCN，但其衍生物并非是HiCN，而是氰化血红蛋白，仪器需经过HiCN标准液校正后，才能进行Hb测定。,-,21,另外，在有些情况下，如低色素性贫血、某些肝病等病人的红细胞具有抵抗溶血剂作用，导致红细胞溶血不完全而影响Hb的测定。【参考值】成年男性120160g/L成年女性110150g/L新生儿170200g/L,-,22,【质量控制】1.技术误差手工法和半自动分析仪法稀释倍数尽量准确，分光光度计的波长、光缝、比色杯光径需经常校正，以尽量减小技术误差。2.HiCN转化液应置于棕色玻璃瓶内，不得使用塑料容器，以防CN-丢失。3.HiCN参考液是制备标准曲线、计算K值、校正仪器及其它测定方法的关键物质。ICSH已公布了制备方法和严格的规格，国内已有一些单位参照ICSH要求生产供应。我国HiCN部级参考品质量标准下：图形扫描符合ICSH文,-,23,件规定：即波峰540+1nm，波谷504502nm。Q=A540nm/A540nm=1.5901.630；A7500.002。无菌试验：普通培养和厌氧培养阴性。精密度：随机抽样10支测定，CV170g/L；成年女性RBC5.51012/L，Hb160/L，为红细胞和血红蛋白增多。（1）生理性增多多由于机体缺氧而使红细胞代偿性增多，如新生儿、高原生活、剧烈的体力劳动（或剧烈运动）时。成年男性比女性高，可能是由于男性雄性激素水平较高，而睾酮与促进红细胞造血作用有关。,-,26,（2）病理性增多相对性增多：由于大量失水、血浆量减少而使血液浓缩所致。见于剧烈呕吐、严重腹泻、大面积烧伤、排汗过多和水摄水量严重不足的患者。绝对性增多：见于严重的慢性心肺疾病，由于长期组织缺氧，诱发红细胞代偿性增生，形成继发性红细胞增多症。原发性红细胞增多症即真性红细胞增多症，系原因不明的造血系统增殖性疾病，红细胞可达（710）1012/L。,-,27,2.红细胞和血红蛋白减少红细胞和血红蛋白低于参考值的下限，为红细胞和血红蛋白减少，通常称贫血。（1）生理性减少6个月2岁的婴幼儿由于生长发育迅速所致造血原料相对不足及血容量的增加所致。妊娠中、晚期，为适应胎盘循环的需要，容量明显增加而使血液稀释。老年人造血功能逐渐减退。以上几种情况所致的贫血统称为生理性贫血。,-,28,（2）病理性减少骨髓造血功能低下：如再生障碍性贫血、白血病、恶性肿瘤骨髓转移等。造血原料缺乏：如缺铁引起的缺铁性贫血、缺乏VitB12或叶酸所致的巨幼细胞性贫血。红细胞破坏增加：各种溶血性贫血。红细胞丢失过多：急、慢性失血。,-,29,血红蛋白是成熟红细胞的主要成分，当红细胞数量发生变化时，必然会导致血红蛋白浓度发生相应的变化。但在各种贫血时，由于红细胞内血红蛋白含量不同，红细胞和血红蛋白减少程度可不一致。如小细胞低色素性贫血患者的Hb往往较RBC下降更明显，而大细胞性贫血患者则相反。血红蛋白测定可以用于了解贫血的程度，如需了解贫血的类型，则还需作红细胞计数等其它与红细胞相关的指标。,-,30,三、红细胞形态检查,贫血是血液携氧能力降低的一组疾病。贫血是一种症状，除了红细胞、血红蛋白低于参考值的下限外，某些类型贫血的红细胞形态会产生特殊的变化。所以在贫血的实验室诊断中，不仅要重视红细胞和血红蛋白的变化，还必须仔细观察红细胞的形态变化，从染色血涂片红细胞的大小、形态、染色及异常结构等观察，结合红细胞的其他参数综合判断才能准确地进行贫血的形态学分类，并初步推测贫血的病因。各种红细胞形态（彩图1-11）。,-,31,-,32,（一）正常红细胞形态经瑞氏或瑞吉氏等染色后，血涂片中正常的成熟红细胞呈淡红色圆盘状，直径6.77.7m，平均约7.2m，向心性浅染，中央有一苍白区，其直径约为红细胞直径的1/3。除健康人外，有些类型的贫血如再生障碍性贫血、急性失血性贫血和白血病等患者的红细胞亦呈正常形态。,-,33,（二）异常红细胞形态1.大小异常（1）小红细胞（microcyte）直径小于6m。常见缺铁性贫血和珠蛋白生成障碍性贫血，如地中海性贫血。常伴中心浅染区扩大，提示血红蛋白合成障碍。由慢性炎症引起的继发性贫血常呈单纯小细胞性，而无中心浅染区扩大。而遗传性球形红细胞增多症的小红细胞，生理浅染区消失。,-,34,2）大红细胞（macrocyte）直径大于10m。常见于巨幼细胞性贫血、急性溶血性贫血。前者因缺乏叶酸或VITB12，DNA合成障碍，细胞不能及时分裂所致。后者可能与不完全成熟的红细胞增多有关。（3）巨红细胞（megalocyte）直径15m。常见于巨幼细胞性贫血，有时甚至可见直径20m的超巨红细胞。此类体积较大的红细胞血红蛋白含量高，中心感染区常消失。（4）红细胞大小不均（anisocytosis）指红细胞之间直径相差一倍以上。常见于严重的增生性贫血。在重症巨幼细胞性贫血时尤为显著，第骨髓造血紊乱所致。,-,35,2.形态异常（1）球形红细胞（spherocyte）直径小于6m，厚度增加大于2m，无中心浅染区，形似球形。常见于遗传性红细胞增多症，血涂片中此类细胞高达25%以上。自身免疫性溶血性贫血、新生儿溶血病及红细胞酶缺陷所致溶血性贫血等可见少量球形红细胞。,-,36,（2）椭圆形红细胞（elliptocyte）红细胞呈椭圆形、杆形，长度可大于宽度34倍，最大直径可达12.5m，横径2.5m。因红细胞膜缺陷所致。此种红细胞置于高渗、低渗溶液内，其椭圆形保持不变，但幼红细胞及网织红细胞均不呈椭圆形。正常人血涂片中此类细胞约占1%；严重贫血患者可增多，巨幼细胞性贫血时可高达15%；超过25%对遗传性椭圆形红细胞增多症有诊断价值。,-,37,（3）靶形红细胞（targetcell）红细胞中心区和边缘染色深，其间为不染色的苍白环，形如射击之靶。有时不典型，“靶心”呈半岛形。靶形红细胞直径可稍大于正常红色细胞，但厚度小，细胞扁而薄。可能系Hb含量不足又颁布不均衡所致。常见于各种低色素性贫血，多见于珠蛋白生成障碍性贫轿（如地中海贫血）、异常血红蛋白病，靶形红细胞常占20%以上。少量也可见于缺铁性贫血及其他溶血性贫血等。应注意与在血涂片制作中未及时固定所致的改变相区别。,-,38,（4）镰形红细胞（sicklecell）红细胞形如镰刀状。由于红细胞内存在异常Hb（HbS），其对氧亲和力显著降低，致使细胞缺氧。主要见于镰形细胞性贫血（HbS病）。（5）口形红细胞（stomatocyte）红细胞中心苍白区呈扁平状，形如一个微张开的鱼口。正常人血涂片偶见此类细胞（4%），遗传性口形红细胞增多症患者常达10%以上。弥散性血管内凝血（DIC）及酒精中毒时可见少量此类细胞。,-,39,（6）棘形红细胞（acanthocyte）红细胞表面有刺状突起，其间距不等，不短不一。主要见于遗传性脂蛋白缺乏症，也可见于脾切除术后、酒精中毒性肝病、尿素症等。应注意与皱缩红细胞区别，皱缩红细胞周边呈锯齿状，突起排列均匀，长短一致，涂片上分布不均。（7）裂片细胞（schistocyte）为红细胞破坏后的碎片，大小不一，形态各异，边缘不规则。正常人血涂片中裂片细胞7.5m，称巨大型血小板，常见于脾切除术后、巨大血小板综合征等。2.形态异常幼稚型：大小正常，边缘清晰，胞质呈淡蓝色或淡紫色，颗粒少，无空泡。老年型：大小正常，边缘不规则，胞质呈红色，颗粒粗而呈离心状分布，常有空泡。,-,62,病理幼稚型：体积较大，胞质淡蓝色，几乎无颗粒。病理刺激型：体积增大，形态不一，胞质呈蓝色、紫红色，颗粒多且大小较一致。退化型：大小及形态不一，胞质呈质灰红色，有大空泡，常不见颗粒或颗粒聚集一侧。正常人外周血中血小板为成熟型，也可见少量异常形态的血小板，但所但比值一般少于2%。由于影响血小板多见于再生障碍性贫血、急性白血病、血小板病以及强化疗或放疗1周内的患者。幼稚型血小板增多见于急性失血后，病理幼稚型增多见于特发性和反应性血小板病。在ITP出现血小板减少危象和粒细胞性白血病时，可见到大量蓝色的巨大血小板。,-,63,3.分布异常血小板不聚集：血涂片中血小板散在分布，少见成堆出现的血小板，见于血小板无力症。血小板过度聚集：每堆血小板数量太多，有时甚至多达几千个，常见于原发性血小板增多症，骨髓纤维化等。,-,64,第三节血液其它检查,一、网织红细胞计数网织红细胞（reticulocyte，Ret）是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞。在正常情况下晚幼红细胞脱核后平均需2d才能发育成完全成熟的红细胞。在此期间胞质中尚残留部分嗜碱性物质（核糖体和核糖酸），可被某些染料（如新亚甲蓝、灿烂甲酚蓝、中性红等）活体染色成蓝色网状或颗粒状结构，故名为网织红细胞。,-,65,网织红细胞通常较成熟红细胞稍大，直径8.09.5m。HeiLmyer根据网织红细胞的形态特征和成熟程度将其分为五型：O型（花冠型）、I型（丝球型）、II型（网型）、III型（破网型）、IV型（点粒型）（彩图1-12）。近年ICSH和美国国家临床实验标准化委员会（NCCLS）对网织红细胞的定义是：网织红细胞是已不含有细胞核的红细胞，但用新亚甲蓝染色法，尚可查见含胶相当于核糖核酸的颗粒至少两个或两个以上。按照上述定义，网织红细胞分成IIV型更为适宜，因为O型是有核红细胞，不应归入网织红细胞。,-,66,正常情况下，I型存在于骨髓内，II型在外周血中也极难找到（0.08%），III型在外周血中少量存在（0.15%），IV型在外周血中多见，占网织红细胞的60%以上。,-,67,【测定方法及评价】,1.显微镜计数法网织红细胞经休外活体染色，网织红细胞内RNA的磷酸基带有负电荷，能与新亚甲划、灿烂甲酚兰（煌焦油蓝）和中性红等碱性染料带正电荷的有色反应基团结合，使RNA胶体间的负电荷减少，分子间斥力下降失去分散力，形成核酸与碱性染料复合物的多聚体，呈深染的颗粒状或彼此联缀成网状结构。凡含两个以上的深染颗粒或具有线网状结构的无核红细胞，即为网织红细胞。通过光镜检查可得网织红细胞在RBC中的相对值（%）和绝对值（109/L）。,-,68,绝对值的计算需在计数红细胞的同时做网织红细胞计数（同一标本），计算公式见实习指导。相对值计数结果受成熟红细胞浓度的影响大，红细胞计数减低时，网织红细胞百分数偏高，故国外学者主张用绝对值报告。用于网织红细胞体个活体染色的染料种类较多，WHO推荐使用新亚甲蓝染色液，因其对网织红细胞染色力强且稳定而被首推。灿烂甲酚蓝染液应用历史长、范围广，但易产生沉淀为之不足。,-,69,该法是当前国内计数网织红细胞的主要方法，无需昂贵的仪器，操作简单昆曲用低廉是其主要优点，但工作效率不高，实验精密度低，批内重复CV可高达20%以上。近年来国际血液学标准化委员会（ICSH）推荐用Miller窥盘检查网纳红细胞涂片，其CV值在10%左右。,-,70,用于网织红细胞显微镜计数的涂片制备有两种方法：玻片法和试管法。玻片法容易使混合血液中水分蒸发，造成涂片困难，再加上染色时间短及染料沉渣的干扰，使计数结果不准确。试管法克服了上述缺点，并且可以重复涂片复查，故被更为手工法网织红细胞计数的推荐方法。,-,71,2.网织红细胞仪器测定法目前，国内外逐步使用仪器法测定网织红细胞，一般采用流式细胞术。流式细胞仪法是将红细胞经特殊荧光染料染色后，使含RNA的网织红细胞被计数，进而得出网织红细胞的百分率和绝对值。同时还分出荧光强、中、弱的网织红细胞。仪器法的优点是测量细胞多、避免主观因素、方法易于标准化。国外已广泛推广应用。,-,72,【质量控制】,1.用煌焦油蓝乙醇染液时，应待乙醇完全挥发干后方能加入血液，否则可使血液凝固。染色时间一定要充足。2.染色时温度控制在37。C为宜。从前对网织红细胞体外活体染色时的温度多不加控制，近年来多有网织红细胞恒温染色的报道。指出不论使用何种染液，室温（25。C）以下染色的网织红细胞检出率均明显低于37。C恒温染色的结果（P10000g离心5min。取出后用尺量取血液总长度和血细胞层的长度，或用微量血细胞比容测定读数器报告结果。该法由于相对离心力较大，血细胞间残留血浆量较温氏法低（结果平均低2%）而且标本用量小，简便、快捷，被WHO作为首选推荐方法。,-,83,3.电阻抗微量比容法该法是利用血浆是电的良导体，而相对血细胞是电的不良导体，根据已校正血细胞含量的血液阻抗值与血细胞相对浓度的对应关系，可以检测血液阻抗值计算出血细胞比容。目前，国内外已有商品化的微量血细胞比容仪。电阻抗微量比容法自动化程度高，1530s报告结果，操作简便，便于推广。但血样中白细胞和血小板数量明显增多，或患者血浆中有异常蛋白质时会引起测量误差。,-,84,4.血细胞分析仪测定法目前，绝大多数血液分析仪使用电阻抗法进行细胞计数和血细胞比容测定。原理是当细胞通过小孔时，形成相应大小的脉冲，脉冲的多少即为血细胞的数目，脉冲的高度代表血细胞的体积。通过MCV和RBC即可求得血细胞比容。由于结果是仪器测定数万个血细胞体积产生的脉冲叠加后换算而来的，避免了血浆残留引起的误差。,-,85,5.其它方法血细胞比容测定除以上方法外，尚有折射仪法、粘度法，比重测定法和放射性核素法，后者被ICSH定为参考方法，但受多种因素制约，一般实验室尚不能常规开展。【参考值】温氏法男：40%50%；女：37%47,-,86,【临床意义】1.增高见于各种原因引起的血液浓缩：如大量出汗、严重呕吐、腹泻、大面积烧伤等。原发或继发性红细胞增多症：如真性红细胞增多症，有时可高达80%。新生儿。2.降低见于各种原因引起的贫血，但减少的程度并不一定与红细胞计数相一致。血细胞比容只能反映血液中红细胞的浓度，不说明红细胞的总量，如失血性休克伴血液浓缩时，HCT可正常甚至增高，但实际总量红细胞减少，因此，失血及输血后仅根据HCT来判断贫血不可靠。充血性心力衰竟，妊娠和输液过多等稀释血症。,-,87,3.可用作真性红细胞增多症、临床输血及轮渡治疗疗效观察的一项指标。4.可用作计算红细胞平均体积（MCV）和红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）的基础数据。这两项参数常用于贫血的形态学分类。同时也是影响全血粘度的决定因素之一。,-,88,五、嗜碱性点彩红细胞计数,嗜碱性点彩红细胞是因某些重金属中毒，胞质中残存的嗜碱性物质（RNA）变性沉淀而形成的。经瑞氏染色后，可见红细胞的粉红色胞质中有粗细不等的蓝黑色颗粒；如用碱性美蓝染色，则点彩红细胞的胞质呈淡蓝绿色，而颗粒为深蓝色，色泽鲜明易于识别。常规涂片以甲醇固定和碱性美蓝染色后，按网织红细胞计数方法，计数1000个红细胞中所见到的嗜碱性点彩红细胞数，以百分数报告。【参考值】0.03%,-,89,【临术意义】嗜碱性点彩红细胞增多常见于铅、汞、铋、硝基笨、笨胺等中毒的病人，在职业病防治中常用以判断铅、汞等重金属中毒情况。此外在溶血性贫血、恶性贫血、白血病、恶性肿瘤、疟疾等也可增多。,-,90,六、嗜酸性粒细胞直接计数,由于嗜酸性粒细胞在外周血中百分率较低，通过白细胞计数和白细胞分类计数换算而来的绝对值误差较大。因此，为了更加准确地了解嗜酸性粒细胞的变化情况，应采用直接计数法。【测定方法及评价】嗜酸性粒细胞直接计数，系选用适当的稀释液将血液稀释一定倍数，破坏红细胞和其他白细胞，并将嗜酸性粒细胞染色，混匀后充入计数池内，计数一定体积内嗜酸性粒细胞数，即可算出每升血液中嗜酸性粒细胞的数量。,-,91,嗜酸性粒细胞稀释液多为低渗溶液。其中多含有保护嗜酸性粒细胞不受破坏的成分（如乙醇、乙二醇、丙西酮等）和染色成分（如伊红、甲酚紫、石楠红等）。在众多西方中Hinkelman液是较为理想的稀释液，它可在室温保存较长时间。其它配方因含有丙酮、乙醇等挥发性物质，故不能长期保存。,-,92,【质量控制】1.血液稀释后应在0.51h内计数完毕，否则嗜酸性粒细胞逐渐破坏或不易辨认，使结果偏低。2.嗜酸性粒细胞在稀释液中容易发生聚集，要及时混匀。混合过程中不宜过分振摇，以免嗜酸性粒细胞破碎。3.住院病人作嗜酸性粒细胞计数，应尽量统一采血时间，以免受日间生理变化的影响。4.若使用含丙酮、乙醇等嗜酸性粒细胞保护剂的稀释液，应随时注意浓度的变化以防嗜酸性粒细胞破坏，使结果偏低。【参考值】（0.050.5）109/L,-,93,【临床意义】1.生理变化在劳动、寒冷、饥饿、精神刺激等情况下，交感神经系统兴奋，通过下后脑分泌促肾上腺皮质激素（ACTH），使肾上腺皮质分泌肾上腺皮质激素。肾上腺皮质激素可阻止骷髅释放嗜酸性粒细胞，并促使血中嗜酸性粒细胞向组织浸润，从而导致外周血中嗜酸性粒细胞减少。因此，正常人嗜酸性粒细胞白天较低，夜间较高，上午波动大，下午较恒定。,-,94,2.病理变化（1）嗜酸性粒细胞增多过敏反应性疾病：如支气管哮喘、荨麻疹、食物过敏、过敏性肺炎、血管神经性水肿等。寄生虫病：尤其是肠道寄生蛔虫、钩虫、绦虫等，血中嗜酸性粒细胞明显增多。其它如感染肺及虫、包虫、血吸虫、丝虫等也可见嗜酸性粒细胞增多。在某些钩虫病患者血中嗜酸性粒细胞数量明显增多时，可导致白细胞总数增高，分类时90%以上为嗜酸性粒细胞，呈嗜酸性粒细胞类白血病样反应，但细胞均属成熟型。随着治疗好转及感染消除，血象则逐渐恢复正常。,-,95,某些皮肤病：如湿疹、疱疹样皮炎、真菌性皮肤病等。血液病：如慢性粒细胞白血病，嗜酸性粒细胞常可高达10%以上，并可见少量的晚幼及中幼嗜酸性粒细胞。某些恶性肿瘤，特别是淋巴系统的恶性肿瘤，如何奇金病。以及某些上皮恶性肿瘤，如肺癌、宫颈癌、鼻咽癌等，均可见嗜酸性粒细胞增多，一般在10%左右。某些传染病：如猩红热。一般急性传染病时，血中嗜酸性粒细胞均减少。唯独猩红热除外，反而增高。这是由于该病致病菌（I型溶血性链球菌）所产生的酶能活化补体成分（C3a、C5a），其趋化作用导致嗜酸性粒细胞增多。某些内分泌疾病，如脑垂体功能低下及原发性肾上腺皮质功能不全等。,-,96,2）嗜酸性粒细胞减少见于伤寒、副伤寒、大手术后。长期使用肾上腺皮质激素，嗜酸性粒细胞常减少。,-,97,3.嗜酸性粒细胞计数的其它应用（1）观察急性传染病的预后肾上腺皮质激素有提高机体的应激性，促进机体抗感染的作用。因此当急性传染病（伤寒）时，肾上腺皮质激素分泌增加，血中嗜酸性粒细胞随之减少。如嗜酸性粒细胞持续下降，甚至完全消失，说明病情严重恢复期血中嗜酸性粒细胞又逐渐增多。若临床症状严重，而嗜酸性粒细胞不减少，说明肾上腺皮质功能衰竭。,-,98,（2）观察大手术和烧伤病人的预后大手术后4h血中嗜酸性粒细胞显著减少，甚至完全消失，2448h后逐渐增多，增多的速度与病情的变化基本一致。大面积烧伤病人数小时后嗜酸性粒细胞完全消失，且持续时间较长。若大手术和大面积烧伤后，病人嗜酸性粒细胞不下降或下降很少，均认为预后不良。,-,99,（3）肾上腺皮质功能测定由于ACTH能刺激皮肤上腺皮质，产生肾上腺皮质激素，使嗜酸性粒细胞减少。因此，可根据ACTH注射前后的嗜酸性粒细胞数量的变化情况，来反映肾上腺皮质功能。方法：用药前作嗜酸性粒细胞计数，随即矶注或静滴ACTH25mg，直接刺激肾上腺皮质或注射0.1%肾上腺素0.5ml，刺激垂体前叶分泌ACTH，间接刺激分泌肾上腺皮质激素。,-,100,肌注4h或静滴8h（从滴注开始时计时）后，再作嗜酸性粒细胞计数。结果判断：正常情况下，注射ACTH或肾上腺素后，嗜酸性粒细胞比注射前应减少50%以上。肾上腺皮质功能正常，而垂体前叶功能不良者，注射ACTH直接刺激时下降50%以上，注射肾上腺素间接刺激不下降或下降很少。垂体功能亢进时，直接刺激或间接刺激均可下降80%90%。垂体前叶功能正常，而肾上腺皮质功能不良者，无论直接刺激或间接刺激，下降均不到50%。艾迪生（Addison）病，一般下降不到20%，平均仅下降4%。,-,101,七、红细胞沉降率测定,红细胞沉降率（erythrocytesedimentationrate，ESR）是指红细胞在一定条件下沉降速度，简称血沉。正常情况下，血流中的细细胞因胞膜表面现象的唾液酸所具有的负电荷等因素而相互排斥，使细胞间距离约为25nm，故彼此分散悬浮而下沉缓慢，在许多病理情况下，ESR由于多种因素的作用可明显加快。ESR也是反映红细胞聚集性的一项常用指标。,-,102,【测定方法及评价】1.魏氏（Westergrem）法将一定量的抗凝血置于特制的血沉管中，垂直于血沉架上，观察红细胞在一守时间内沉降的距离，以mm/h报告之。该法是国血液学标准化委员会（ICSH）推荐的血沉测定方法。红细胞沉降率的快慢，取于两种对立力量的相互作用。红细胞的比重大于血浆的比重，在重力作用下，产生自然下沉浸沉力。但在红细胞下降的每一瞬间必须与红细胞等体积的血浆发生位置交换，这就形成了一个向上的阻逆力。在正常情况下，红细胞的下沉力与血浆阻逆力相差不多，因此血沉很慢。影响血沉快慢的因素很多，现分别叙述如下：,-,103,（1）血浆因素一般认为，血沉加快主要是血浆中各种蛋白质成分比例的改变，而与总蛋白的浓度无关。清蛋白带负电荷，纤维蛋白原、球蛋白带正电茶。正常情况下，血浆蛋白所带的正负电荷呈平衡状态。在病理条件下，血液中纤维蛋白原和球蛋白增加或清蛋白减少，改变了电荷的平等，致使红细胞表面的负电荷减少，排斥力减弱，再加上长链状结构的纤维蛋白原对红细胞显著的“桥联”作用，促使红细胞聚集成缗钱状结构。聚集的红细胞团块与血液接触的总面积缩小，受到血浆的阻逆力减弱而使血沉增快,-,104,相反，如血浆中纤维蛋白原减少，而清蛋白增加时，血沉减慢。现已公认，血浆中带有正电荷的不对称的大分子物质纤维蛋白原是最强有力的促红细胞形成缗钱状聚集的物质，其次为r球蛋白、球蛋白，此外，胆固醇、甘油三酯等也有促使红细胞形成缗钱状聚集的作用。所以高血脂的病人血沉也增快。清蛋白质、糖蛋白质及卵磷脂等可使血沉减慢。,-,105,（2）红细胞因素红细胞的数量：如不考虑血浆因素，红细胞数量越多下降时遇到的阻逆力越大，血沉越慢。反之，血沉越快。因此有人建议贫血患者血沉加快时，要作适当的校正。但红细胞太少时，反而不易成缗钱状聚集，所以血沉的加快并不完全与红细胞减少程度不同成比例。红细胞的形态：球形、镰形等异常形态红细胞或红细胞严重大小不匀时，较不易形成缗钱状聚集，因此血沉不快。红细胞大小及形态变化莫测，只有在严重病例对血沉的影响才有意义。,-,106,红细胞的聚集状态：病毒、细菌、药物、抗原抗体复合物等改变了红细胞表面的结构和组成，使红细胞表面电荷减少，细胞之间的排斥力减小，红细胞聚集体就易形成，血沉会明显增快。所以血沉测定也是反映红细胞聚集性的一项常用指标。,-,107,3）其它因素血沉管的位置：当血沉管垂直时，红细胞受到的阻逆力最大，血沉较慢。当血沉管倾斜时，红细胞多沿一侧管壁下滑，而血浆沿另一侧上升，致使血沉加快。温度：血沉测定规定在1825。C范围内进行，超过此温度可影响测定结果，应予以校正。,-,108