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文档简介
厦门大学2013年招收攻读硕士学位研究生入学考试试题科目代码620科目名称细胞生物学招收专业生命科学学院、化学系、海洋与地球学院、环境与生态学院、药学院各相关专业考生须知答题书写须使用黑(蓝)色字迹钢笔、签字笔或圆珠笔;各类答案(包括选择题、填空题)均必须写在答题纸上规定处,不得直接在试卷(试卷纸)或草稿纸上作答凡未按上述规定作答均不予评阅、判分,后果考生自负。一、名词解释(5题,每题6分,共30分1端粒TELOMERE2纺锤体组装监控点(SPINDLEASSEMBLYCHECKPOINT)3胚胎干细胞(EMBRYONICSTEMCELL)4粘着斑FOCALADHESION5细胞衰老CELLSENESCENCE二、是非题20题,每题1分,共20分。请将答案按题目序号写在答题纸上,答“是”写“V”,答“非”写“X”1氯霉素抑菌是因其可抑制原核70S核糖体肽酰转移酶。2线拉体通过ATP合成酶参与细胞凋亡。3前体RRNA甲基化的重要性在于防止前体RRNA被加工。4催化三羧酸循环、脂肪酸和丙酮酸氧化等有关的主要酶类存在于线粒体的脊上。5在自然条件下,有遗传效应的染色体交换发生在非同源染色体的姊妹染色体之间。6啤酒酵母的交配型转变MATINGTYPEINTERCONVERSION机制属于转录后水平调控。7哺乳类动物体内唯一能产生抗体免疫球蛋白分子的细胞是TC细胞。8原核细胞的呼吸酶定位在类核区内。9真核细胞染色体的每个细胞周期中仅复制一次因为S期时间很短。10INSITUHYBRIDIZATION是将基因定位于染色体上的研究手段。11瘤细胞通常由正常细胞转化而来,与原来的细胞相比,癌细胞的分化程度通常表现为分化程度高。12白细胞表面抗原CD45是一种受体酪氨酸磷酸脂酶。13推动细胞周期由G2相向M相过渡的驱动器为CDK1。14细胞中具有催化功能的成份是蛋白质与核酸。15与真核细胞相比,原核细胞在DNA复制、转录与翻译上具有时空连续性的特点。16溶酶体在动物、植物、原生动物和细菌中均有存在。17特异显示DNA在细胞中分布的方法是PAS反应。18染色质纤维上非组蛋白的主要功能是调控基因表达。19突变后的RAS蛋白不能结合GTP,从而使RAS蛋白维持于活化状态,不断激活靶分子,导致细胞大量增殖,而发生恶性转化。20冰冻蚀刻技术主要用于隧道显微镜。三、选择题每题可能多个答案,多远或漏选皆不得分;15题,每题2分,共30分1流式细胞术可用于测定A、细胞的大小和特定细胞类群的数量B、分选出特定的细胞类群C、细胞中DNA、RNA或某种蛋白的含量D、以上三种功能都有2在粗面内质网上合成的蛋白质包括A、线粒体中的蛋白质B、分泌蛋白C、膜蛋白D、溶酶体中的蛋白3能抑制CDK活性的酶是A、WEELB、CAKC、CDC25D、P214所有膜蛋白都具有方向性,其方向性在什么部位中确定A、细胞质基质B、高尔基体C、内质网D、质膜5属于蛋白酪氨酸激酶类型的受体是A、EGF受体B、PDGF受体C、TGF受体D、IGF1受体6下列技术中能用于研究膜蛋白流动性的方法是A、荧光抗体免疫标记B、荧光能量共振转移C、光脱色荧光恢复D、荧光标记细胞融合7中心粒和鞭毛的基粒A、都是92结构B、前者是92结构,后者是90结构C、都是90结构D、前者是90结构,后者是92结构8下列结构中属于细胞膜上的结构有A、内吞小泡B、有被小窝C、脂质筏D、微囊9缬氨霉素是一种可动离子载体,运输A、NAB、KC、CA2D、MG210线粒体参与细胞凋亡通过A、释放细胞色素CB、释放ACHEC、合成酶ATPD、SOD11关于第一次减数分裂下列观点中哪些是错误的A、同源染色体不分裂B、着色粒不分裂C、染色单体分离D、不出现交叉12关于核孔复合体正确的论述有A、有核定位信号的蛋白进入细胞核不需要核孔复合体B、介导蛋白质入核转运,介导RNA、核糖核蛋白颗粒出核转运C、核蛋白通过核孔复合体由细胞质转运到核内需要能量D、生物分子通过被动扩散和主动运输进出核孔复合体13内质网中含有的可以识别不正确折叠的蛋白并促使其重新折叠A、BIP蛋白B、SEC61蛋白C、钙结合蛋白D、蛋白二硫键异构酶14存在于真核细胞的细胞膜上质子泵是A、P型质子泵B、V型质子泵C、HATP酶D、三种都有15活性染色质具有如下哪些特性A、甲基化程度高B、H2B的低磷酸化C、很少有组蛋白H1与其结合D、组蛋白乙酰化程度高四、问答题4题,每题10分,共40分1试述膜流动性的生物学意义。2请根据溶酶体的形成过程,说明溶酶体不同阶段及其功能的特点。3请说明免疫荧光细胞化学中荧光抗体示踪(免疫荧光细胞化学)的技术原理、方法与实验步骤及其在细胞生物学研究中的应用。42012年诺贝尔生理学或医学奖授予英国发育生物学家约翰、戈登(JOHNGURDON)与日本京都大学教授山中伸弥(SHINYAYAMANAKA)。两位科学家取得的成果都与诱导多功能干细胞(IPS)相关。试论述IPS的在生物医学科学领域中的理论与实践意义。五、实验与分析题(3题,每题10分,共30分1细胞划痕实验是指将细胞培养在培养皿或平板上,待细胞融合后用细胞刮在中央区域画一条线,这条线内的细胞被机械力去除掉了,然后将细胞继续培养,观察细胞向无细胞的划痕区域迁移的情况,来判断细胞的迁移能力。某课题组,为研究MTOR基因对肿瘤迁移能力的影响,以敲减细胞中MTOR基因为实验组,对照正常细胞进行划痕实验,结果如下图依据上述信息后,请作答(1)何为基因敲减(GENEKNOCKDOWN)(2)MTOR在肿瘤细胞的迁移能力上有何影响,依照该影响请预期初期肿瘤患者与晚期患者的肿瘤细胞中MTOR基因表达的高地情况。(3)已知雷帕霉素为MTOR的抑制剂,请对加入雷帕霉素处理的细胞进行划痕实验的结果进行预期,并试述原因。2细胞的分化是由于组织专一性的关键基因表达的结果。某人通过DNAARRAY发现三个在肌肉分化中表达的基因。为了研究它们的功能,他分别做了基因剔除小鼠实验,发现当A基因剔除时,小鼠肌肉特别发达;当B基因剔除时,小鼠在胚胎肌肉发育前死亡;当C基因剔除时,小鼠出生后三周开始肌肉萎缩,请根据以上结果分析,A、B、C三个基因在肌肉发育中的功能。3细胞内的一些膜细胞器,如内质网、高尔基体、溶酶体、内吞体等组成了一个动态的体系。将利用特异性抗体来标记不同的细胞器时,在荧光显微镜下发现除内质网在细胞质中呈现均匀分布外,其他几种细胞器主要以大量囊泡状结构集中在细胞核附近的一个区域。而且,这种集中方式在处于有丝分裂的细胞中看不到。问(1)你推测这些聚集在一起的细胞器与胞内的什么结构相关如何用实验来证明(2)你认为它们为何会出现这样的组织方式如何用实验来证明(3)你认为这种组织方式会有什么意义答案一、名词解释(5题,每题6分,共30分1端粒TELOMERE端粒是线状染色体末端的DNA重复序列,是真核染色体两臂末端由特定的DNA重复序列构成的结构,使正常染色体端部间不发生融合,保证每条染色体的完整性。端粒有许多重要的生物学功能稳定染色体末端结构,防止染色体间末端连接,并可补偿滞后链5末端在消除RNA引物后造成的空缺,维持染色体的完整性和独立性;端粒的长度与细胞及生物个体寿命相关等等。【考查重点】第十章第四节一、中期染色体的形态结构2纺锤体组装监控点(SPINDLEASSEMBLYCHECKPOINT)细胞有丝分裂过程中,纺锤体组装检控点监控着染色体在赤道板的队列和向纺锤体两极的分离,确保动粒微管的黏附和有丝分裂器的完整,使所有的染色体都置于赤道板并双极定向后才进入后期,保证遗传物质均等地分配给两个子代细胞。若纺锤体组装完成,动粒全部被纺锤体微管捕捉,MAD2从动粒上消失,解除对CDC20抑制,促使APC活化,降解M期周期蛋白,从而介导细胞周期从中期向后期推进。【考查重点】第十二章第一节二、细胞周期中各个不同时相及其主要事件3胚胎干细胞(EMBRYONICSTEMCELL)胚胎干细胞是早期胚胎(原肠胚期之前)或原始性腺中分离出来的一类细胞,它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境,ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。胚胎干细胞具有万能分化性功能,特点是可以细胞分化成多种组织的能力,但无法独自发育成一个个体。它可以转化成为外胚层、中胚层及内胚层三种胚层的成员,然后再转化成为人体的220多种细胞种类。【考查重点】第十四章第一节二、影响细胞分化的因素4粘着斑FOCALADHESION细胞外基质与一个细胞的肌动蛋白细胞骨架之间的物理联系由被称为“粘着斑”FOCALADHESION的细胞器组成,它们通过“整联蛋白”(或称整合素)发挥作用。它们在人体生理中具有根本性的重要性,因为它们调控细胞粘附、机械传感和控制细胞生长及分化的信号。现在,“粘着斑”的分子架构已通过利用三维超分辨率荧光显微镜在纳米尺度上观测蛋白组织方式而被确定。【考查重点】第十五章第一节二、锚定连接5细胞衰老CELLSENESCENCE由于正常体细胞中DNA端粒长度随复制次数增加而缩短,以及氧化损伤等原因,使正常细胞经有限次数分裂后,停止分裂,细胞形态和生理代谢活动发生显著改变。例如细胞内水分减少,体积变小,新陈代谢速度减慢;细胞内酶的活性降低;细胞内的色素会积累;细胞内呼吸速度减慢,细胞核体积增大,核膜内折,染色质收缩,颜色加深。线粒体数量减少,体积增大;细胞膜通透性功能改变,使物质运输功能降低等等。【考查重点】第十三章第二节一、细胞衰老的概念及特征二、是非题20题,每题1分,共20分。请将答案按题目序号写在答题纸上,答“是”写“V”,答“非”写“X”1氯霉素抑菌是因其可抑制原核70S核糖体肽酰转移酶。正确【考查重点】第十一章第二节二、蛋白质的合成2线拉体通过ATP合成酶参与细胞凋亡。错误【答案解析】在细胞凋亡的内源途径中,线粒体会向细胞质基质中释放出凋亡相关因子,引发细胞凋亡。【考查重点】第十三章第一节一、动物细胞的程序性死亡3前体RRNA甲基化的重要性在于防止前体RRNA被加工。错误【答案解析】甲基化可能对RRNA的加工起到引导作用【考查重点】第十一章第一节一、核糖体的基本类型与化学组成4催化三羧酸循环、脂肪酸和丙酮酸氧化等有关的主要酶类存在于线粒体的脊上。错误【答案解析】主要存在与线粒体基质上【考查重点】第六章第一节一、线粒体的形态结构5在自然条件下,有遗传效应的染色体交换发生在非同源染色体的姊妹染色体之间。错误【答案解析】染色体交换发生在同源染色体的非姊妹染色单体之间【考查重点】第十二章第二节二、减数分裂6啤酒酵母的交配型转变MATINGTYPEINTERCONVERSION机制属于转录后水平调控。正确【考查重点】第十四章第三节真核细胞基因表达的调控7哺乳类动物体内唯一能产生抗体免疫球蛋白分子的细胞是TC细胞。错误【答案解析】哺乳动物体内能产生抗体的是效应B细胞和记忆B细胞,TC细胞能消灭被感染的细胞8原核细胞的呼吸酶定位在类核区内。错误【答案解析】原核细胞的呼吸酶定位在细胞质膜上【考查重点】第二章第二节二、原核细胞的主要代表9真核细胞染色体的每个细胞周期中仅复制一次因为S期时间很短。错误【答案解析】DNA执照假说指出,每个前DNA复制复合体只能行使一次功能【考查重点】第十二章第三节五、细胞周期运转调控10INSITUHYBRIDIZATION是将基因定位于染色体上的研究手段。正确【考查重点】第三章第二节四、细胞内特异核酸序列的定位与定性11瘤细胞通常由正常细胞转化而来,与原来的细胞相比,癌细胞的分化程度通常表现为分化程度高。错误【答案解析】癌细胞的分化程度低【考查重点】第十四章第二节一、癌细胞的基本特征12白细胞表面抗原CD45是一种受体酪氨酸磷酸脂酶。正确【考查重点】第八章第四节二、细胞表面其他酶联受体13推动细胞周期由G2相向M相过渡的驱动器为CDK1。正确【考查重点】第十二章第三节五、细胞周期运转调控14细胞中具有催化功能的成份是蛋白质与核酸。正确【考查重点】第十一章第一节三、核糖体蛋白质与RRNA的功能15与真核细胞相比,原核细胞在DNA复制、转录与翻译上具有时空连续性的特点。正确【考查重点】第十一章第二节一、多聚核糖体16溶酶体在动物、植物、原生动物和细菌中均有存在。错误【答案解析】溶酶体只存在于真核生物中【考查重点】第七章第二节三、溶酶体的形态结构与功能17特异显示DNA在细胞中分布的方法是PAS反应。错误【答案解析】PAS法用于确定多糖的存在,而福尔根反应可以特定显示DNA的分布【考查重点】第三章第二节二、细胞内核酸、蛋白质、糖与脂质等成份的显示方法18染色质纤维上非组蛋白的主要功能是调控基因表达。正确【考查重点】第十章第二节三、染色质蛋白19突变后的RAS蛋白不能结合GTP,从而使RAS蛋白维持于活化状态,不断激活靶分子,导致细胞大量增殖,而发生恶性转化。错误【答案解析】突变的RAS能够与GTP结合,但不能将其水解为GDP,使其锁定在开启状态,引起赘生性细胞增生。【考查重点】第八章第四节一、受体酪氨酸激酶及RTKRAS蛋白信号通路20冰冻蚀刻技术主要用于隧道显微镜。错误【答案解析】冰冻蚀刻技术主要与电镜相结合,将形成的碳膜在电镜上观察【考查重点】第三章第一节二、电子显微镜技术三、选择题每题可能多个答案,多远或漏选皆不得分;15题,每题2分,共30分1流式细胞术可用于测定A、细胞的大小和特定细胞类群的数量B、分选出特定的细胞类群C、细胞中DNA、RNA或某种蛋白的含量D、以上三种功能都有D【考查重点】第三章第二节六、定量细胞化学分析技术2在粗面内质网上合成的蛋白质包括A、线粒体中的蛋白质B、分泌蛋白C、膜蛋白D、溶酶体中的蛋白ABCD【考查重点】第七章第二节一、内质网的形态结构与功能3能抑制CDK活性的酶是A、WEELB、CAKC、CDC25D、P21AD【考查重点】第十二章第三节四、CDK激酶和CDK激酶抑制物4所有膜蛋白都具有方向性,其方向性在什么部位中确定A、细胞质基质B、高尔基体C、内质网D、质膜C【考查重点】第七章第二节一、内质网的形态结构与功能5属于蛋白酪氨酸激酶类型的受体是A、EGF受体B、PDGF受体C、TGF受体D、IGF1受体ABD【考查重点】第八章第四节一、受体酪氨酸激酶及RTKRAS蛋白信号通路6下列技术中能用于研究膜蛋白流动性的方法是A、荧光抗体免疫标记B、荧光能量共振转移C、光脱色荧光恢复D、荧光标记细胞融合ACD【考查重点】第三章第一、二节7中心粒和鞭毛的基粒A、都是92结构B、前者是92结构,后者是90结构C、都是90结构D、前者是90结构,后者是92结构C【考查重点】第九章第二节八、纤毛和鞭毛的结构与功能8下列结构中属于细胞膜上的结构有A、内吞小泡B、有被小窝C、脂质筏D、微囊ABC【考查重点】第四、五章9缬氨霉素是一种可动离子载体,运输A、NAB、KC、CA2D、MG2B【考查重点】第五章10线粒体参与细胞凋亡通过A、释放细胞色素CB、释放ACHEC、合成酶ATPD、SODA【考查重点】第十三章第一节一、动物细胞的程序性死亡11关于第一次减数分裂下列观点中哪些是错误的A、同源染色体不分裂B、着色粒不分裂C、染色单体分离D、不出现交叉ACD【考查重点】第十二章第二节二、减数分裂12关于核孔复合体正确的论述有A、有核定位信号的蛋白进入细胞核不需要核孔复合体B、介导蛋白质入核转运,介导RNA、核糖核蛋白颗粒出核转运C、核蛋白通过核孔复合体由细胞质转运到核内需要能量D、生物分子通过被动扩散和主动运输进出核孔复合体CD【考查重点】第十章第一节二、核孔复合体13内质网中含有的可以识别不正确折叠的蛋白并促使其重新折叠A、BIP蛋白B、SEC61蛋白C、钙结合蛋白D、蛋白二硫键异构酶AD【考查重点】第七章第二节一、内质网的形态结构与功能14存在于真核细胞的细胞膜上质子泵是A、P型质子泵B、V型质子泵C、HATP酶D、三种都有A【考查重点】第五章第二节15活性染色质具有如下哪些特性A、甲基化程度高B、H2B的低磷酸化C、很少有组蛋白H1与其结合D、组蛋白乙酰化程度高BCD【考查重点】第十章第三节一、活性染色质与非活性染色质四、问答题4题,每题10分,共40分1试述膜流动性的生物学意义。【答案解析】生物膜的流动性是指膜脂与膜蛋白处于不断的运动状态,它是保证正常膜功能的重要条件。在生理状态下,生物膜既不是晶态,也不是液态,而是液晶态,即介于晶态与液态之间的过渡状态。在这种状态下,其既具有液态分子的流动性,又具有固态分子的有序排列。当温度下降至某一点时,液晶态转变为晶态;若温度上升,则晶态又可溶解为液晶态。这种状态的相互转化称为相变,引起相变的温度称相变温度。在相变温度以上,液晶态的膜脂总是处于可流动状态。膜脂分子有以下几种运动方式侧向移动;旋转运动;左右摆动;翻转运动。膜蛋白分子的运动形式有侧向运动和旋转运动二种。生物膜的流动性有利于物质运输和交换,比如矿质离子的主动运输,内吞外排作用等等;有助于能量流动和信息传递;有助于自我修复;还有它是细胞融合技术的基础。【考查重点】第四章第二节一、膜的流动性2请根据溶酶体的形成过程,说明溶酶体不同阶段及其功能的特点。【答案解析】溶酶体是动物细胞中的一种膜结合细胞器,含有多种水解酶类,在细胞内起消化和保护作用,在与吞噬泡或者胞饮泡结合,消化和利用其中的物质。溶酶体的发生过程溶酶体酶是在粗面内质网上合成并经过N链接的糖基化修饰,然后转至高尔基体,在高尔基体顺面膜囊中寡糖链上的甘露糖残基发生磷酸化形成M6P,在高尔基体反面膜囊和TNG膜囊上存在M6P受体,这样溶酶体的酶与其他蛋白区分开,并得以浓缩,最后以出芽的形式转运至溶酶体中。溶酶体是一种多样性和异质性的细胞器,根据溶酶体所处生理功能的不同阶段,可以区分为1初级溶酶体,内容物均一,含有许多水解酶类,包括蛋白酶、核酸酶、糖苷酶等;2次级溶酶体,是初级溶酶体与细胞内的自噬泡、胞饮泡、吞噬泡融合形成的复合体;3残余小体,这些小体已经失去酶,仅剩下未消化的残渣,又叫残体。溶酶体的功能防御供能;作为细胞内的消化器官为细胞提供营养;在分泌细胞中,溶酶体常常含有摄入的分泌颗粒,参与分泌过程的调节;两类发育过程中蝌蚪尾巴的退化,哺乳动物断奶后乳腺的退行性变化等都涉及某些特定细胞编程性死亡及周围活细胞对其的清除,这些过程都与溶酶体有关;在受精过程中,精子的顶体相当于特化的溶酶体,其中含有多种水解酶类,例如透明质酸酶,它能溶解卵细胞的外被及滤泡细胞,产生孔道,使精子进入卵细胞。【考查重点】第七章第二节三、溶酶体的形态结构与功能3请说明免疫荧光细胞化学中荧光抗体示踪(免疫荧光细胞化学)的技术原理、方法与实验步骤及其在细胞生物学研究中的应用。【答案解析】技术原理免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色),可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及利用定量技术测定含量。方法免疫学的基本反应是抗原抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应实验步骤1细胞爬片;24多聚甲醛固定10分钟(固定细胞器用预冷的70甲醇30丙酮);3PBS漂洗;405TRITON通透穿孔;5PBS漂洗61BSA封闭;7加入1BSA稀释的一抗,于37度杂交;8PBS漂洗;9加入1BSA稀释的二抗,于37度杂交;10PBS漂洗;115G/MLDAPI染色;12抗猝灭封片剂封片13观察。应用免疫细胞化学技术与亲和化学技术如葡萄球菌A蛋白、生物素、与卵白素、植物血凝素相结合拓宽了领域;与激光技术、电子计算机和扫描电镜等技术结合发展为定量免疫荧光细胞化学技术;荧光激活细胞分类器(FACS)的应用是免疫荧光细胞化学技术发展到更高的阶段,开创了免疫荧光技术的新领域。细胞显微分光光度计与图像分析仪的结合使免疫荧光组织化学的定量检测更加准确。在免疫荧光细胞化学中应用单克隆抗体日益增多,将会不断提高特异性、敏感性和应用范围。激光扫描等聚焦显微镜的应用又开创了新的发展时代。由于免疫荧光细胞化学的特异性、快速性和在细胞和分子水平定位的敏感性与准确性,在免疫学、微生物学、细胞和组织学、病理学、肿瘤学、以及临床检验学等生物学和医学许多方面得到广泛应用,日益发挥重要作用。【考查重点】第三章第二节三、特异蛋白抗原的定位与定性(对一些在生物学研究领域应用较为广泛的实验技术的整体把握)42012年诺贝尔生理学或医学奖授予英国发育生物学家约翰、戈登(JOHNGURDON)与日本京都大学教授山中伸弥(SHINYAYAMANAKA)。两位科学家取得的成果都与诱导多功能干细胞(IPS)相关。试论述IPS的在生物医学科学领域中的理论与实践意义。【答案解析】诱导多能干细胞(INDUCEDPLURIPOTENTSTEMCELLSIPS)2006年日本京都大学SHINYAYAMANAKA在世界著名学术杂志细胞上率先报道了诱导多能干细胞的研究。他们把OCT3/4,SOX2、CMYC和KLF4这四种转录因子基因克隆入病毒载体,然后引入小鼠成纤维细胞,发现可诱导其发生转化,产生的IPS细胞在形态、基因和蛋白表达、表观遗传修饰状态、细胞倍增能力、类胚体和畸形瘤生成能力、分化能力等方面都与胚胎干细胞相似。IPS细胞的出现,在干细胞研究领域、表观遗传学研究领域以及生物医学研究领域都引起了强烈的反响,这不仅是因为它在基础研究方面的重要性,更是因为它为人们带来的光明的应用前景。在基础研究方面,它的出现,已经让人们对多能性的调控机制有了突破性的新认识细胞重编程是一个复杂的过程,除了受细胞内因子调控外,还受到细胞外信号通路的调控。对于OCT4、SOX2和NANOG等维持于细胞自我新能力的转录因子的研究正在逐渐地展开;利用IPS细胞作为实验模型,只操纵几个因子的表达,这更会大大加速对多能性调控机理的深入研究。在实际应用方面,IPS细胞的获得方法相对简单和稳定,不需要使用卵细胞或者胚胎。这在技术上和伦理上都比其他方法更有优势,IPS细胞的建立进一步拉近了干细胞和临床疾病治疗的距离,IPS细胞在细胞替代性治疗以及发病机理的研究、新药筛选方面具有巨大的潜在价值。此外,IPS细胞在神经系统疾病、心血管疾病等方面的作用也日益呈现,IPS细胞在体外已成功地被分化为神经元细胞、神经胶质细胞、心血管细胞和原始生殖细胞等。在临床疾病治疗中具有巨大应用价值。【考查重点】第十四章需要关注近年来的诺贝尔奖与细胞生物学有关的技术、原理与方法五、实验与分析题(3题,每题10分,共30分1细胞划痕实验是指将细胞培养在培养皿或平板上,待细胞融合后用细胞刮在中央区域画一条线,这条线内的细胞被机械力去除掉了,然后将细胞继续培养,观察细胞向无细胞的划痕区域迁移的情况,来判断细胞的迁移能力。某课题组,为研究MTOR基因对肿瘤迁移能力的影响,以敲减细胞中MTOR基因为实验组,对照正常细胞进行划痕实验,结果如下图依据上述信息后,请作答(1)何为基因敲减(GENEKNOCKDOWN)(2)MTOR在肿瘤细胞的迁移能力上有何影响,依照该影响请预期初期肿瘤患者与晚期患者的肿瘤细胞中MTOR基因表达的高地情况。(3)已知雷帕霉素为MTOR的抑制剂,请对加入雷帕霉素处理的细胞进行划痕实验的结果进行预期,并试述原因。【答案解析】(1)基因敲减,即基因敲除,就是通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点,以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的的一种技术。此法可产生精确的基因突变,也可正确纠正机体的基因突变。(2)从图中可以看出,当敲减MTOR基因48小时之后,实验组相对与对照组,肿瘤细胞迁移能力明显降低,这说明MTOR基因能否促进肿瘤的迁移。由于肿瘤转移能力的是恶性肿瘤相对于良性肿瘤的最重要的特征,因此可以初步推断初期肿瘤患者MTOR表达量低于晚期肿瘤患者。(3)由于雷帕霉素为MTOR抑制剂,因此当给两组同时加入雷帕霉素,4小时之
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