电大：动物检疫技术二

主要内容：第四章 动物检疫基本技术,动物检疫技术二,第一节 临诊检疫技术一、群体检疫群体检疫是指对待检动物群体进行的现场检疫。 (一)群体检疫的组织 1.群体划分 同场、同圈(舍)；同一产地来源的；同车、同船、同机运输的划为一群。在畜群过大时,要适当分群,以利于检查。2.检疫顺序 大群小群；幼年成年；种用畜群其它用途的；健康染病畜群。,(二)群体检疫的方法和内容1.静态观察 静态观察是在动物安静休息,完全保持自然状态下,观察其站立、睡卧姿势；精神状态；营养程度和呼吸、反刍等基本生理活动现象。注意有无异常站立、睡卧姿势,有无咳嗽、喘息、呻吟、流涎、嗜睡、孤立一隅等反常现象。2.动态观察 经静态观察之后,将被检动物驱赶起来,观察其自然活动和驱赶活动。重点看起立、运动的姿势与步态；精神状态。,3.饮食观察 目的在于检查动物的食欲和口腔疾病。可以观察动物自然采食饮水动作,亦可有意少给食物看其抢食行为。从中发现不食不饮、少食少饮、吞咽困难和退槽、呕吐、流涎等可疑患病动物。二.个体检疫个体检疫是对群体检疫时检出的可疑病态动物进行详细和系统的临诊检查。,（一）个体检疫的方法和内容1.视诊 (1)看精神状态健康动物静止时安静,行动时灵活,对各种外界刺激敏感。(2)看营养程度营养状况：肌肉的丰满度、皮下脂肪的蓄积量、被毛状况三方面观察。(3)看姿势与运动观察动物站立、睡卧的姿势是否自然,运动时动作是否灵活而协调。(4)看皮肤被毛(5)看可视黏膜(6)看排泄物 (7)看呼吸与反刍,2.触诊 （1）耳根、角根、鼻端、四肢末端（2）体表皮肤（3）体表淋巴结3.听诊 4.测体温 健康动物：早晨温度较低,午后略高,波动范围在0.51之间。猪：38-39.5，牛：37.5-39.5，羊：38-39.5，禽：40-42。,临床检疫,个体检疫,群体检疫,群检正常 抽检,群检异常个体检查,静态观察,食态观察,动态观察,三.各种动物临诊检疫特点（一）猪的临诊检疫特点1.健康猪 站立平稳,不断走动拱食,并发出“吭吭”声。对外界刺激敏感,遇人接近表现警惕性凝视。睡卧常取侧卧,四肢伸展,头侧地，呼吸均匀；爬卧时后腿屈于腹下。排泄物正常。体温正常。被毛整齐光亮。起立敏捷,行动灵活,走跑时摇头摆尾或上卷尾。遇驱赶,随群前进,不断发出叫声。饿时叫唤,饮喂时抢食,大口吞咽有响声且响声清脆,全身鬃毛随吞食而颤动。,2.病猪 精神萎靡,离群独立,全身颤抖或头颈歪斜。蜷卧,不愿起立。被毛粗乱无光,鼻盘干燥,眼有分泌物,肷窝凹陷。行动迟缓,步态踉跄,跛行或出现神经症状。食欲下降,懒于上槽,或只吃几口就退槽,有些只闻而不食,亦有的食欲废绝。排泄物异常。多有体温异常。,(二)牛的临诊检疫特点1.健康牛 站立平稳,神态安静。睡卧时常呈膝卧姿势,四肢弯曲。全身被毛平整有光泽,鼻镜湿润,眼、嘴及肛门周围干净。反刍有力，正常嗳气，呼吸平稳。肉用牛垂肉高度发育；乳用牛乳房清洁,泌乳正常。排泄物、体温正常健康牛走起路来精力充沛,腰背灵活,四肢有力,摇耳甩尾,自由自在。饮食中争抢饲料,咀嚼有力,采食时间长,采食量大。放牧中喜采食高草,常甩头用力扯断。运动后饮水不咳嗽。,2.病牛 精神沉郁,头颈低伸,拱背弯腰或有异常体态。睡卧时四肢伸开,横卧或曲颈侧卧,嗜睡,久卧不起或起立困难。被毛粗乱。反刍迟缓或停止。排泄物异常。体温、呼吸多异常。运动时常跛行掉队或不愿行走。饮食时表现厌食或不食,或采食缓慢,咀嚼无力。出现运动后饮水咳嗽。,(三)羊的临诊检疫特点1.健康羊 站立平稳,乖顺。被毛整洁。呼吸平稳。常于饱腹后合群卧地休息，反刍。遇炎热相互把头藏于对方腹下避暑。走起路来精神活泼,合群不掉队；放牧中虽很分散,但不离群。山羊活泼机敏,喜攀登,善跳跃,好争斗,尤其是羔羊和幼龄羊。饲喂时互相争食，放牧时常边走边吃草,边走边排粪，排泄物正常。食后肷窝臌起。,2.病羊 精神萎靡不振,常独卧一隅,遇人接近不起不走。不反刍。排泄物异常。呼吸异常。被毛粗乱,脱毛,皮肤干裂。行走摇摆,或出现异常运动,异常姿势。食欲不振或停食,食后肷窝仍下陷。山羊喜卧懒动，多有体温异常。,(四)家禽的临诊检疫特点1.健康家禽 神态活泼,反应敏锐。站立时伸颈昂首翘尾,且常高收一肢,目光伶俐,时常侧视。卧时头叠放在翅内。冠、髯红润,羽绒丰满光亮,排列匀称。口鼻洁净,呼吸正常,排泄物正常。体温正常。平养鸡行动敏捷,步态稳健；鸭、鹅陆地行走稳健,水中游牧自如,放牧时不掉队。健康家禽啄食连续,食欲旺盛,食量大,嗉囊饱满。2.病禽 精神萎靡,缩颈垂翅,闭目似睡。冠、髯苍白或紫黑,喙、蹼色泽变暗。有的头颈部肿胀,眼、鼻等天然孔有异常分泌物。羽绒蓬乱无光。行动迟缓,跛行或有肢翅麻痹及其它神经症状。食欲减退或废绝,嗉囊空虚。排泄物异常。多有体温异常。,第二节 病理学检查技术一、病理剖检检查技术（一）对动物尸体剖检的要求1、剖检前检查 剖检前仔细检查尸体体表特征及天然孔有无异常，以排除炭疽等恶性传染病。患炭疽病的动物及其尸体，禁止剖检。若怀疑动物死于炭疽，先采取耳尖血液涂片镜检，排除炭疽后方可剖检。,2、剖检时间 剖检进行的越早越好，最好在白天进行剖检。3、剖检地点 病理解剖室或；在野外或其它检疫现场剖检时，应选地势高燥并远离居民区、畜舍及交通要道的地方进行。4、剖检数量 家禽：5只以上；大中动物至少剖检3头。5、剖检术式 6、安全防护 工作人员的安全防护工作；防止环境污染。常用的消毒液有：1%2%硼酸、0.1%新洁尔灭、5%碘酊、70%酒精等,（二）外部检查1检查尸体变化尸僵、尸斑、尸腐、血液凝固2检查皮肤、被毛及营养状况3检查天然孔（三）内部检查1、皮下检查 2、内脏器官的检查对有病变和病变严重的器官要重点检查，分辩病理变化特点，判定病变性质。3、口腔、鼻腔和颈部器官的检查,第三节 检疫材料的采集一采集原则1适时采集 2典型采样 典型采样要求样品具有代表性。动物活体采样选择典型动物即未经药物治疗、病状典型的动物，这对细菌性传染病的检查尤其重要。选择典型材料A、采集病原体可能在其中含量最高的材料。B、在采取病料前，对动物可能患某种疫病作出初步诊断，侧重采集该病原体常侵害的部位。,从动物尸体采样采集有病变的组织、器官或病变最明显、最典型的部位。供病理组织切片的样品，应连带部分健康组织。淋巴结、心、肝、脾、肺、肾，不论有无病变，一般均应采取。 3合理采样 动物群体发病，至少采取5头（只）动物的病料。每一种样品应有足够的数量，除确保本次实验用量外，以备必要的复检用。4无菌采样,二供病原学检查材料的采集、处理1、供微生物学检查材料的采集、处理（1）血液采血部位：颈静脉或尾静脉或耳静脉；家禽从翅静脉或心脏。死亡动物从右心房采血。采血量： 10ml（大、中动物）； 35ml（小动物和家禽）。全血抗凝：EDTANa2、枸橼酸钠、肝素。枸橼酸钠不宜用于病毒血样。10ml血液+4%枸橼酸钠溶液1ml或0.1%肝素1ml或EDTANa21520。 病毒样品：1ml血样=青霉素+链霉素各5001000IU，以抑制血源性或在采血过程中污染的细菌。,（2）分泌物和渗出液口腔、鼻腔、喉气管、泄殖腔及阴道分泌物：用灭菌的棉球蘸取。咽食道分泌物：采前禁食12h，食道探子刮取。乳汁：清洗乳房并消毒弃去最初挤出的几把乳汁挤出的1020ml乳汁。尿液：排尿时采集或用导尿管采取，常取3050ml。水泡液、水肿液、关节囊液，胸腹腔渗出液：用注射器抽取，至少采取1ml。脓汁：已破口的脓疱，用棉球蘸取；未破口的用注射器吸取。过于浓稠不好抽取时，可切开脓疱，用棉球蘸取。,保存与送检分泌物和渗出液采集放入灭菌容器密封外贴标签冷藏送检。病毒性病料的保存：含抗生素的PH7.27.4磷酸盐缓冲液、50甘油磷酸盐缓冲液、50甘油生理盐水。细菌性病料的保存：30甘油磷酸盐缓冲液、30甘油生理盐水、灭菌液体石蜡。,2、供寄生虫检查材料的采集、处理（1）血液多从耳静脉采集，立即制成涂片标本。（2）阴道分泌物用棉拭子擦拭采取（3）粪便直肠采集或采集新排出的粪便。（4）被寄生虫寄生的组织、器官组织、器官常连带寄生虫一并采集，放入510福尔马林溶液中。,（5）皮肤刮下物螨病病料：在病变皮肤和健康皮肤交界处采集。（6）寄生虫体表寄生虫：用手或镊子捏取或把附有虫体的羽毛剪下70酒精、甘油酒精或5福尔马林容液中。体内寄生虫：小型线虫用毛笔将虫体挑出 生理盐水洗净70酒精、甘油酒精或巴氏夜固定。大型蠕虫像蛔虫、棘头虫、绦虫用510福尔马林溶液固定。,四供病理组织学检查材料的采集、处理1.选材 应选择病变部位与健康部位交界处的组织作为检材。较重要的病变要多取几块，以展示病变的发展过程。若同一器官有不同的病变，分别采取。2.采集 供切片时用的组织块大小为1.5cm1.5cm0.5cm，3.固定 供石蜡切片用的组织块切好后，用清水轻轻冲洗血污，立即浸入固定液中。但胃肠、胆囊、膀胱等组织不要用水冲洗。,第四节 病原学检查技术一、细菌性传染病病原检查（一）显微镜检查法1.病料处理将病料涂成薄而均匀的涂片室温下自然干燥若为细菌培养物涂片火焰固定常用的染色方法有：革兰氏染色法、美蓝染色法、瑞氏染色法和姬姆萨染色法。2.显微镜检查 染色水洗后的涂片标本吸水纸吸干（切勿磨擦）或在酒精灯火焰的远端烘干滴加香柏油用油浸镜观察细菌的形态结构和染色特性。,（二）培养检查法1固体培养基上菌落性状的检查 其菌落的大小、形状、色泽、表面性状、透明度、边缘性状等因菌种而异。因此，菌落特征是鉴别细菌的重要依据。2.液体培养基上液体性状的观察 细菌在液体培养基中生长可使液体出现混浊、沉淀、液面形成菌膜以及液体变色、产气等现象。（三）动物试验最常用的实验动物有：小鼠、大鼠、豚鼠和家兔。,二病毒性传染病病原检查（一）病毒分离培养1.样品处理 2.病毒分离培养 （1）鸡胚接种痘病毒：绒毛尿囊膜接种，用912日龄鸡胚；鸡新城疫病毒：绒毛尿囊腔接种，用910日龄鸡胚；流行性乙型脑炎病毒：卵黄囊内接种，用68日龄鸡胚。（2）动物组织培养在病毒分离培养中广泛采用的是细胞培养技术。（3）动物接种,（二）病毒检查方法1.包涵体检查 狂犬病、伪狂犬病、犬瘟热病毒病毒的包涵体2.病毒培养性状观察 鸡新城疫病毒：鸡胚全身皮肤有出血点鸡痘病毒：产生痘斑病变。细胞病变有：细胞变形皱缩，胞浆内出现颗粒，核浓缩，核裂解或细胞裂解，出现空泡。3.病毒形态学观察 有直接电镜观察和免疫电镜技术。4.病毒核酸检测 最常用的检测方法是聚合酶链式反应。,三寄生虫病病原检查（一）虫卵检查法1直接涂片镜检2集卵法检查 ：水洗沉淀、饱和盐水漂浮（二）虫体检查法1.蠕虫虫体检查法 （1）成虫检查法：肉眼观察其形态特征。（2）幼虫检查法：低倍镜下观察液体中活动的幼虫。,第六节 免疫学检查技术一、血清学检测技术血清学检测技术种类繁多，可利用抗原抗体中已知的任何一方去检测未知的另一方，以达到检疫目的。（一）凝集反应1直接凝集反应 布氏杆菌病和猪传染性萎缩性鼻炎：平板凝集和试管凝集反应；鸡白痢、鸡支原体病：全血平板凝集反应。,2间接凝集反应 间接凝集反应若用已知抗原吸附在载体来鉴定抗体，称为正向间接凝集反应。主要用于猪细小病毒病、猪伪狂犬病、牛日本血吸虫病、猪喘气病等的检测。间接凝集反应若用已知抗体吸附在载体上来鉴定抗原，称为反向间接凝集试验。主要用于猪传染性水泡病与猪口蹄疫检测。,（二）沉淀反应1.环状沉淀反应（阿司克里氏反应）常用于炭疽病的诊断和皮张炭疽检疫。2.琼脂扩散反应是马传染性贫血病、鸡马立克氏病、鸡传染性支气管炎、鸡传染性喉气管炎及鸡传染性法氏囊病常用的诊断