高中物理实验室检验课件人教版必修2.ppt

1,实验室检验,血液的一般检验,2,血液的一般检验,红细胞压积容量（）测定血红蛋白测定（hb）红细胞（rbc）计数白细胞（wbc）计数白细胞分类计数,3,红细胞压积容量（）测定,是指将抗凝血液置于特制的温氏管中，并经离心沉淀，沉出压紧的红细胞体积所占全血体积的百分比。主要用于脱水程度及贫血的判定。,4,测定方法：红细胞压积管法（温氏法）用尾端装有橡皮乳头的长针头，吸取na2抗凝血液，插入温氏管底部，自下而上注入血液至刻度“10“处。将温氏管置于电动离心机中，以3000r/min速度离心3060min，取出读取红细胞柱的高度数，即得红细胞压积值。正常值：家畜红细胞压积容量正常值（）参见下表。标准制的换算：pcv(l/l)=pcv(%)0.01。例如马pcv30.2%，换算为标准制乘以0.01，即得0.302l/l。,5,家畜红细胞压积容量正常参考值（）,6,诊断意义：可呈现增高或降低。红细胞压积容量值增高多因机体脱水而血液浓缩，使红细胞数相对增多所致。可见于各种脱水性疾病过程中。是判定动物脱水程度的标准之一，并可依此而计算补液数量，但要结合临床症状及其他检测方法综合判断之。如病畜精神稍差，口粘膜轻度干涩，皮肤弹性实验持续时间24s，血浆蛋白89%，pcv达50，可提示为轻度脱水。病畜精神差，喜卧少动，口粘膜干涩，皮肤弹性实验持续时间610s，血浆蛋白910%，pcv达55，可提示为中度脱水。病畜精神极差，不能站立，口粘膜极干涩，皮肤弹性实验持续时间2045s，血浆蛋白12g，pcv达60，可提示为重度脱水。,7,红细胞压积容量值降低多为红细胞减少所致。可见于各型贫血及伴有贫血的其他疾病过程中。注意事项温氏管壁一侧自上而下标有010刻度，供测定血沉之用；另一侧自下而上标有010刻度，供测定pcv用，010之间共有100个刻度，测定时正确选用。抗凝剂宜选用edtana2，因其不改变细胞体积及形态。血样不能溶血，充入管内的血液不能有气泡。读取结果时，不能把细胞层最上层的灰白层（白细胞和血小板）计入。,返回,8,血红蛋白测定（hb）,主要用于贫血的诊断测定方法：沙利氏法原理：红细胞与盐酸作用生成褐色盐酸高铁血红蛋白，再经稀释与标准色柱比色，即可求得血红蛋白含量。试剂：0.1mol/l盐酸溶液：浓盐酸8.5ml加蒸馏水至1000ml。操作：于测定管内加入0.1mol/l盐酸溶液至百分刻度“20“或重量刻度“2“处。,9,用沙利氏吸血管吸取被检血液至“20“刻度处，并用棉球或纱布拭去管壁外血液。迅速将沙利氏吸血管插入测定管底部盐酸液中，缓慢挤出血液，再吸取上部清液，反复冲洗沙利氏吸血管23次，并混匀，静置10min。沿着管壁加入蒸馏水或0.1mol/l盐酸溶液，逐步稀释至与标准色柱色调一致后，读取重量（或百分）刻度值报告结果。正常值：标准制换算：血红蛋白(g/l)=血红蛋白（g/dl）10诊断意义血红蛋白含量增高常见于机体脱水而致血液浓缩的各种疾病过程中。血红蛋白含量降低可见于各种贫血性疾病，如各型贫血、马传染性贫血、重症寄生虫病等。,10,家畜血红蛋白正常参考值（沙利氏法）,返回,11,红细胞（rbc）计数,是将一定量的供检血液经一定倍数稀释后，计数一定容积内的红细胞数，并换算为每1l血液中的红细胞数。主要用于贫血性疾病的判定。,12,计数法：用显微镜计数法红细胞稀释液0.9%氯化钠溶液赫姆氏液配法为氯化钠1g，氯化汞0.5g，结晶硫酸钠5g，加蒸馏水溶解至总量200ml，再加石炭酸品红溶液数滴，借以与白细胞稀释液区别。计数方法血液稀释：取清洁、干燥小试管一支，加红细胞稀释液4ml，而后用沙利氏吸血管吸取供检血液至10刻度(10l)处，用棉球或纱布拭去管壁外血液，将沙利氏吸血管插入小试管内稀释液中，挤出血液，并吸洗23次，混匀。血液被稀释400倍（因家畜红细胞比人多，200倍稀释不易计数）。,13,充液：取清洁、干燥的计数板和专用于计数板的盖玻片。将盖玻片紧密覆盖于血细胞计数板上；将计数板于显微镜载物台上，用低倍镜先找到计数室；然后用小吸管吸取已经摇匀稀释血液，使吸管尖端血接触盖玻片边缘和计数室交界处，稀释血液即可自然流入并充满计数室。计数：计数室充液后，应静置12min，待红细胞分布均匀并下沉后开始计数。计数红细胞应使用高倍镜。一般计数红细胞计数室四角及中央一个中方格或呈对角线中方格（共5个中方格）内的红细胞数（即80个小方格内的细胞数）。为避免重复和遗漏，计数每个中方格内红细胞数时，均应从左至右，再从右至左，计数完16个小方格内的红细胞数。,14,在计数每个小方格内红细胞时，只计压在上边和左边线上的红细胞，不计压在下边和右边线上的红细胞。即所谓“数左不数右，数上不数下“的计数法则。红细胞呈圆形中央透亮，勿与异物混淆。计算按下式计算红细胞计数（万/mm3=r510400=r20000r-计数得5个中方格（80个小方格）内红细胞数。5-因为所计数5个中方格的面积为15mm2，要换算为1mm2时，应乘以5。10-因为计数室深度为0.1mm，要换算为1mm时，应乘以10。400-为血液被稀释倍数。,15,标准制的换算：红细胞（1012l）红细胞（万mm3）0.011012l。例如正常值为652万mm3，则每升血液中红细胞数6520.011012l6.521012l。正常值健康家畜红细胞正常值（万mm3）约为：马、牛600700，绵羊900，山羊1300，猪600，鸡350，犬6700。详见下页表。诊断意义红细胞数增多可分为相对性和绝对性增多。相对性增多，常见于脱水而致血液浓缩的疾病过程中；绝对性增多，可见于因患慢性心、肺疾病导致机体长期缺氧，或长期生活在高原低氧地区等情况下。红细胞数减少常见于各种贫血性疾病过程中，为贫血的特征。,16,家畜红细胞正常值（单位：万mm3）,返回,17,返回,18,白细胞（wbc）计数,是用冰醋酸将血液中的红细胞破坏后，计数一定容积的白细胞数，再推算出每升血液中的白细胞数（109l；旧单位：个mm3）,19,计数法：用显微镜计数法白细胞稀释液13冰醋酸溶液或1盐酸溶液，均可作稀释液。其中加1结晶紫数滴，使溶液呈淡紫色，以便与红细胞稀释液相区别。计数方法血液稀释：试管稀释法：取清洁、干燥小试管一支，加白细胞稀释液0.38ml，用沙利氏吸血管吸取供检血液至20刻度(20l)处，加入试管内，混匀，即可得20倍稀释的血液。,20,白细胞稀释管稀释法：用白细胞稀释管吸取供检血液至“0.5“刻度处，拭去管壁外血液，再吸取白细胞稀释液至“11“刻度处，用拇、食二指捏住吸管两端，振荡混匀即得20倍稀释血液。充液与红细胞计数法相同。计数基本与红细胞计数法相同，所不同的是将计数室四角上的4个大方格内的白细胞依次全部计数完。白细胞呈圆形有核，周围透亮，勿与异物相混淆。计算可按下式计算。白细胞计数（万/mm3=w（14）1020=w50,21,w-为4个大方格（白细胞计数室）内白细胞总数14-因4个大方格的面积为4mm2，要换算为1mm2，应乘以14。10-计数室的深度为0.1mm，换算为1mm，应乘以10。20-为血液的稀释倍数。标准制的换算：白细胞（109l）白细胞（个mm3）0.001109l。例如正常值为7000个mm3，则每升血液中白细胞数70000.001109l7109l。诊断意义白细胞总数增多可见于多种细菌感染性疾患、各种重剧炎症及败血性疾病、白血病等。白细胞总数减少可见于某些病毒性疾病（如猪瘟、流行性感冒、马传染性贫血等）、牛梨形虫病、牛泰勒虫病、马梨形虫病、长期使用磺胺类药及氯霉素、x线照射、恶病质及各种疾病的濒死期等。,22,家畜白细胞正常值（单位：千mm3）,返回,23,白细胞分类计数,是指将血液制成薄片，染色后油镜观察，求出各种白细胞所占百分比。步骤方法一般分血片制作、染色、镜检分类计数三步进行。血片的制作：选取一边缘光滑平整的载玻片作推片，用左手的拇指和中指夹持一洁净载玻片，取被检血液一滴，置于其右端，右手持推片置于血滴前方，并轻轻向后移动推片，使与血滴接触，待血液扩散开后，再以300400角度向前均速同力推进涂抹，即形成一血膜，迅速自然风干。所涂,24,血片，血液分布均匀，厚度适当，对光观察呈霓虹色，血膜位于玻片中央，两端留有适当空隙，以便注明畜别、编号及日期，即可染色，反之，重行制作，直至合格后，再行染色。血片染色瑞特氏染色法瑞特氏染色液的配制：瑞氏染粉0.1g甲醇60ml将染粉置于研体中，加少量甲醇研磨，使其溶解，然后将已溶解的染液倒入洁净的棕色瓶，剩下未溶解的染料再加少量甲醇研磨，如此连续操作，直至染料全部溶解和甲醇用完为止。在室温中保存1周（每日振摇一次）后，过滤，即可应用。,25,染色：先用玻璃铅笔在血膜两端各划一线，以防染液外溢，将血片平放于水平支架上；滴加瑞特氏染液于血片上，直至将血膜盖满为止；待染色12min后，再加等量磷酸盐缓冲液（ph6.4）并轻轻摇动或用口吹气，使染色液与缓冲液混合均匀，再染色35min；最后用蒸馏水冲洗血片，待自然干燥或用吸水纸吸干后镜检。所得血片呈樱红色者为佳。镜检计数先用低倍镜做大体观察，如染色合格再换用油镜计数。通常在血片的两端或两端的上下部按二区或四区计数法，有顺序地移动血片，计数白细胞100200个，分别记录各种白细胞数，最后算出各种白细胞所占百分比。,26,白细胞分类计数时，必须要先正确识别各型白细胞。染色良好的血片上，可见嗜酸性白细胞的胞浆中有很多较大的红色颗粒。嗜碱性白细胞的胞浆中含有明显的紫色颗粒。嗜中性白细胞的胞浆中含有细小的淡玫瑰色颗粒。主要依其发育各阶段的细胞核形态特征又分为中幼细胞、晚幼细胞、杆状核细胞和分叶核细胞。中幼细胞的核为圆形或随圆形；晚幼细胞的核为凹陷的肾形；杆状核细胞的核粗细基本均匀而呈马蹄形或“s“形；分叶核细胞的核分为26个叶不等，各叶之间有细丝连接，或截然分为几叶。淋巴细胞的细胞核多为圆形或椭圆形，细胞浆均染为天蓝色。单核细胞体积大，核成肾形马蹄铁形、分叶或不正形，细胞浆呈烟灰色或淡蓝色。,27,正常值：见课本。诊断意义各种白细胞所占百分比值的病理改变都可表现为增多或减少。嗜中性白细胞增多与减少嗜中性白细胞增多嗜中性白细胞病理性增多是机体抵抗外来感染和对体内炎症性刺激的一种防御性反应，常见于各种急性感染性疾患、急性炎症及重症烧伤、创伤时。分析嗜中性白细胞的增减变化时，应特别注意核象的变化，杆状核和晚幼细胞增多，并出现中幼细胞甚至早幼细胞及原始粗细胞，称为“核左移“，通常表示骨髓造血机能增强。如分叶核细胞显著增多，并且细胞核分45叶甚至多叶的比例较多者，则称为“核右移“，表示造血机能减退。判定嗜中性白细胞核型移动的情况，也可以核指数为依据。,28,中幼细胞晚幼细胞杆状核细胞核指数分叶核细胞家畜核指数的正常参考值：马为110，牛羊为近似110，猪为15。如核指数大于0.1（马、牛、羊），称核左移，表示未成熟嗜中性白细胞比例增多；如小于0.1则称核右移，为分叶型白细胞增多所致。结合白细胞总数的变化，分析嗜中性白细胞核象的变化，更有意义。核左移，同时白细胞总数也增多，称为再生性核左移，为骨髓造血机能增强，机体处于紧急动员，积极防御阶段的表现；核左移，但白细胞总数仍维持在正常范围内，甚至减少者，则称为退行性核左移，为感染严重，骨髓造血机能衰竭，释放功能不良，机体抗病能力降低的表示；核右移则为骨髓造血功机能减退、机体抗病能力降低的表示。,29,嗜中性白细胞减少多由于骨髓造血机能受到抑制，对嗜中性白细胞的生成不足，或因最急性感染，致使嗜中性白细胞向组织中的游走速度超过由骨髓向血液中的释放速度等因素所致。常见于病毒性疾病及各种疾病的重危期（如中毒性休克、胃肠破裂等）。另外驴怀骡妊娠毒血症及急性出血性盲结肠炎时，均可见嗜中性白细胞显著减少。嗜酸性白细胞增多与减少嗜酸性白细胞的功能，可能与机体的过敏反应有关，具有抗组织胺及吞噬抗原抗体复合物的作用。嗜酸性白细胞增多常见于某些寄生虫病（如肝片吸虫病、球虫病、旋毛虫病等），某些过敏性疾病（荨麻疹等）以及湿疹、疥癣等皮肤病过程中。,30,嗜酸性白细胞减少常见于某些疾病的重症期，也见于应用皮脂类固醇药