fish应用技术简介

,-,r- ，因同吨M同钮,自,什么是FISH ?令 f luorescencen Situ Hybridization,技术 ，被广泛应用到基因图谱研究 ，染色体变异序E列识别（肿瘤诊断 ，遗传病诊断 ，产前诊断等研！究h。利用的是DNA的结构特性和免疫荧光标记技术 。,、- .甲1,纳Jj科技,回国、圃，工,二二， 二气二F 干”,圃，同钮，,什么是FISH?,各 f luorescencen S.itu Hybridization令 是一种利用荧光分子去标记基因或者染色体片段的 技术 ，被广泛应用到基因图谱研究 ，染色体变异序 列识别 （肿瘤诊断，遗传病诊断 F 产前诊断 等研 究中。令 利用的是DNA的结构特性和免疫荧光标记技术 。,纳瑞科技二一，气牛，三F 干飞二，咽，.圃”“圃，回,什么是GENE ?DNA 脱氧核糖核酸GENE 遗传子 ，基因1.DNA链，1含有大量 的基肉 片断2.DNA链形成染色体,3.某种变物体的染色体种类,、和 总盏是非11同的,般将细胞内 副主信息的携带,者；染色体m包含的ONA 包：本,称为基肉组（genome),纳民i科技l、圃，同t,什么是GENE?DNA 脱纸核糖核酸GENE 遗传子 ，基因,叫 ,1.DNA链巾含有大量的基冈片断2.DNA链形成染色体3.某和种牛物体相 的染色体种类总盏是同的 势班必歹自AF得7/i）州内d川fJ!;!J11舍;卢楼萨称为基肉生（genome),纳 括科技,._- .一-,-.,.- .干 干.一一,，、一一一一,剧A lt(l已。、2飞 J lrm,高-nm 停,则m摊,DNA的结构和复制,饥。闹、,双,每,成这复一,。,在,导,怡条完 拍现 开两。分的 链新 双成 Mm形,已,F,体胞时表,多,锚,的 构 结 旋 螺双制 分于在数列中 以时复程后由以 。由 裂别,色细个上 人素差染个一性的两同特 胞成从肿 细裂是物,（ 悯现,大陆u山山EWY易最界容,卧 ,制受,程,过然胞所传 复 过 。,体成 分分,h,此 细 遗 于仆的异,色组 胞链怕 过制个的 一由陆制变 染链 细条四 通复两制致 但万复致,纳Ji前科技,纳 喻科技,f,纳瑞科技,遗传和变异与我们的关系心 变异,令 遗传,令 子代继承父代的特征 ，0 物种的进化和淘汰,保持物种的稳定性,令 但同时也会把不利的基因保留下来人类基因组计划是人类 企图认识自身的庞大科 研计划。希望揭示人类 的秘密,)飞。肿瘤等备种疾病的产生 、,令 都和DNA的变异有直接或者间接的变化心 如何鉴别这种变异的发 生，是临床的一个重要 目标,纳J1M科技,纳L贺科技,FISH是怎么使用的,:FISH技术需要准备 一小段单 链DNA序列 ，称作Probe C 探 针） 。令这段探专i二与研究者研究的I标DNA厅，州是互 补的 。F通过 DNA杂交技术，将这段 探针与互补的染色体结 合。 由于探针上标记了特殊颜包的荧光，使得研究者可以通过荧光显微镜 ，找到被标记 上探针的染色体 。进而可 以 确定该序列在染色体 上的定 位。,”吨,FISH技术的应用,根据探针的不同 ，大体分为三类应用1.特别位点探针2.端粒或者着丝粒重复探针3.全染色体探针,叫,l、1,纳 市科技,-,- 一-一,_._,.,._,._,一一一一咽，,J,根据探针的不同，大体分为 三类应用丁特别位点探针2.端粒或者着丝粒重复探针3.全染色体探针,FISH技术的应用,纳瑞科技,特别位点探针各 准备特定序列的探针 ，与标 本杂交后 ，通过特异的荧光 信号确定该序列在染色体上 的定位各 用于功能基囚的染色体定 位，或者某些遗传病肿瘤 的诊断。,纳 命科以,端粒或者着丝粒重复探针令利用某种染色体端粒或者着丝粒上的重复序列，设计此染色体的特征探 针，可以明确找到某特定染色体。争 应用于某些遗传病的诊断,纳L贺科技图例：用不叫颜巴探针标记出的人 才 7号染色体,全染色体探针,条 是一组探针的组合应用。会 针对每条染色体的特征序列 设计不同的探针 ，每种探针 标记上不同的颜色。条 同时杂交后 ，通过图像的光不同的颜色。各 比传统的Karyotyping能够 提供更多的信息公 用于染色体缺失 ，易位等异 筒分析,纳 击j;f斗才. -,，,、？ ！,， .,嘈 !3,” ”,lo,曾,8 ,s,;,1111, Ir,售，,Inv I,理“Bo, ”,，、,Ifla 司,D,t,画 E,，,一 ,全染色体探针,、.,！,州,., 响 Bl,嘈,. ,.,S世, ,e, ,4 ;,ie l,，,a ,Ir,I川 1,属“,甸 ”,.,，,. 1ila-.,， ; na, .,!i,？,画 E,嘈,条 是一组探针的组合应用。争 针对每条染色体的特征序列 设计不同的探针，每种探针 标记上不同的颜色。争 同时杂交后，通过图像的光i普分析给每个染色体标记 土不同的颜色 。,条 比传统的KaY.otyping能够 提供更多的 信 息公 用于染色体缺失 ，易位等异 常分析,纳 市斗才,-L,国“国，圄,d ,b,MFISH 或者SKY令 属于前述的“全染色体探针 ”令 MFISH-Multi-colorFISH令 SKY- Spectral Karyotype光谱染色体组型分析令 将人的23对染色体以不同的荧光颜色标记 出 来一可以明显的观察到DNA序列的易位或者 缺失 。需要软件配合。纳J1M科技,一- . ，.,圃”,-一一、回F,咽,啕,l,令 左 图为正常人的血细胞SKY图令 右图为癌细胞 ，可以看到大量的 DNA易位和失常纳瑞科技,Fiber FISH,令 在FISH基础上发展出 来的更高分辨率的技 术,。将染色体拉伸为丝 状，提高碱基对的分 辨率到 1-2K b,Resolution in Fluorescence in situ Hybridization,Flgure1,电崎 Nu f us,何时eohll幅chrom.贸ne,rj I期染色件， 分辨率） 1Mb, 1 Mb,肌teroh棚 I.p,nuc eusI,eo l100 kb,Chromot怡， .，.一_r,白ber flS饨，仁.r,l kb,问期染色体，分辨率 100Kb,Fiber FISH,分辨率） 1Kb,Unconde闹剧Chrom剖in,Chromatin Fibers,Fiber FISH,1J 1 期染色件，分辨率） 1Mb,问期染色体，分辨率 100Kb,Fiber FISH,分辨率） 1Kb, 1 Mb,蛐r阳InucleuI,ti,eo I100 Kb,俐在I kb,Meepha回chromo,令 在FISH基础上发展出 来的更高分辨率的技 术,。将染色体拉 伸为丝 状，提高碱基对的分 辨率到1-2Kb,国FISH实验过程,目前有多种商品化的探针 供用户边择实验室步骤 荧光显微镜观察拍照 专门的染色体组型分析软件， M-FISH或者SKY更需要专门的分析软件,叮正,吨。,A斗,探针的准备和标记； 探针和染色体的杂交 ； 信号检测： 杂交信号与分带染色体的比较。,43,叮L,句J,A件,EF,MH？,nT,工,忖？,”千MH？,字” ？,C,E,E,E,川MH,立T,回 归于R UG,HT,MU 竖,立,盟 ”们 UQ红立国EEJdd冉ddd1llil i,叫,；二.- I,-,(.l卢也,一“，； ，y :.:.,：又1；， #,FISH实验过程,目前有多种商品化的探针 供用户选择实验室步骤 荧光显微镜观察拍照 专门的染色体组型分析软件 ，M-FISH或者SKY更需要专门的分析软件,叮L,句J,A斗,探针的准备和标记 ； 探针和染色体的杂交 ； 信号检测 ： 杂交信号与分带染色体的比较。,唱， 呵，,qJV,A,I： :.v;_, t,I 旦旦旦,旦坦,t （ 12 ！,I豁口坦坦 Utt!:!,、；吐，也,E,I I,.,:.11,I I . 噜产,，气，p ,. il,早早早,帽、二,I I 立巳立；工工t:,我们提供什么（ 1 ),1.荧光显微镜 CUBE要根据肘户的探针选常见荧光色素：，而l 最大吸收光谱490-495nm ，最大 发射光谱520-530nm ，呈 明亮的黄绿色荧光会 囚甲基异硫氨酸罗丹明（ TRITC ） 最大吸收光谱 550nm ，最 大发射光谱600-620nm ，呈现橙红色荧光 ，用于双标记示踪 技术会 藻红蛋白（ PE） 最大吸收光谱490-560nm ，最大发射光谱575nm ，星红色荧光 ，双标记争 7 氨基 4 甲基香豆素（AMC )最大吸收光谱 354nm，最 大发射光谱430nm ，呈蓝色荧光 ，双、多标记令 锵系元素销（ Eu3）、够（Sm3）、锁（Tb3）等，在 紫外光 C 340nm ）激发下，发射出高强度荧光（ 613nm ) , 持续时间较长（ 10-1000 艳阳恨单、双 、多标记,？,我们提供什么（ 1 )?,1.荧光显微镜一CUBE要根据用户 的探针选常见荧光色素 z_时h最大吸收光谱490-495nm ，最大 发射光谱520-530nm ，呈明亮的黄绿色荧光条 囚甲基异硫氨酸罗丹明（ TRITC ） 最大吸收光谱 550nm ，最 大发射光谱600-620nm ，果现橙红色荧光，用于双标记示踪 技术条 藻红蛋白 CPE ） 最大吸收光谱490-560nm ，最大发射光谱575nm ，皇红色荧光 ，双标记会7 氨基 4 甲基香豆素 （AMC ) 最大吸收光谱354nm ，最 大发射光谱430nm ，垦荒色荧光 ，双、多标记令 锵系元素错 C Eu3）、够 C Sm3）、锁 C Tb3）等，在 紫外光 C 340nm）激发下，发射出高强度荧光 C 613nm ) , 持续时间较长（ 10-1000 艳阳恨单、双、多标记,-L,国“国，圄,d ,b,我们提供什么 也）？令 CCD和软件,嗡黑 白CCDC QICAM 、EXI、RETIGA系列 d高灵敏度 ，制冷CCD更适合 d分辨率不是关键 ，140万左右足够 咱不需要Karyotype 的应用可 以提供IPP/IPE,台需要Karyotype和M-FISH,SKY,CGH的用户,需要与其他专业软件厂家合作，OLYMPUS不能提功,纳J1M科技,4.,甸回,圃”,-一一、,回F,1、崎,啕,l,我们提供什么。）？,令 物镜和聚光镜40X ,100X推荐使用 UPLSAPO 的汕镜6其他低倍可以使用 UPLFLN系列的物镜6如果要作明场的 Karyotype ，需要配高数值孔径,的聚光镜 C U-AAC ,NA1.4 ）也配上,，最好汕式页透镜,纳J 科技圃，乌龟圃，,Fish软件厂家,Lucia,纳T击科技,Fish软件厂家,纳Jj;科技,l,回国一, 气，V唱 ，？二 ，一，啕,Lucia,纳 布科技,，;,4.,目标用户,令 高校研究所用户喝细）町遗传学附基因组学可能 ：,是目标用户。令 伍床用户喝IVF的用户，ICSI用户等搞人工辅助生殖的单位 ，都有可 能开展产前诊断的项目 。应该高度关注 ！咱肿瘤医院，或者肿瘤科 ，也可能开展临床检验或者科研 项目。,Fish软件厂家,纳Jj;科技,l,回国一, 气，V唱 ，？二 ，一，啕,Lucia,纳 布科技,，;,4.,目标用户,令 高校研究所用户喝细）町遗传学附基因组学可能 ：,是目标用户。令 伍床用户喝IVF的用户，ICSI用户等搞人工辅助生殖的单位 ，都有可 能开展产前诊断的项目 。应该高度关注 ！咱肿瘤医院，或者肿瘤科 ，也可能开展临床检验或者科研 项目。,Fish软件厂家,纳Jj;科技,l,回国一, 气，V唱 ，？二 ，一，啕,Lucia,纳 布科技,，;,4.,目标用户,令 高校研究所用户喝细）町遗传学附基因组学可能 ：,是目标用户。令 伍床用户喝IVF的用户，ICSI用户等搞人工辅助生殖的单位 ，都有可 能开展产前诊断的项目 。应该高度关注 ！咱肿瘤医院，或者肿瘤科 ，也可能开展临床检验或者科研 项目。,Fish软件厂家,纳Jj;科技,l,回国一, 气，V唱 ，？二 ，一，啕,Lucia,纳 布科技,，;,4.,目标用户,令 高校研究所用户喝细）町遗传学附基因组学可能 ：,是目标用户。令 伍床用户喝IVF的用户，ICSI用户等搞人工辅助生殖的单位 ，都有可 能开展产前诊断的项目 。应该高度关注 ！咱肿瘤医院，或者肿瘤科 ，也可能开展临床检验或者科研 项目。,Fish软件厂家,纳Jj;科技,l,回国一, 气，V唱 ，？二 ，一，啕,Lucia,纳 布科技,，;,4.,目标用户,令 高校研究所用户喝细）町遗传学附基因组学可能 ：,是目标用户。令 伍床用户喝IVF的用户，ICSI用户等搞人工辅助生殖的单位 ，都有可 能开展产前诊断的项目 。应该高度关注 ！咱肿瘤医院，或者肿瘤科 ，也可能开展临床检验或者科研 项目。,Fish软件厂家,纳Jj;科技,l,回国一, 气，V唱 ，？二 ，一，啕,Lucia,纳 布科技,，;,4.,目标用户,令 高校研究所用户喝细）町遗