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文档简介
实验诊断学,LaboratoryDiagnostics,第一节止血、凝血和纤溶机制第二节血管壁检测第三节血小板检测第四节凝血因子检测第五节抗凝血功能检测第六节纤维蛋白溶解检测第七节血液流变学检测第八节检测项目的选择和应用,第三章血栓与止血检测,第一节止血、凝血和纤溶机制,血管壁受损神经反射体液因素胶原暴露TF释放血管收缩血小板粘附内源性外源性聚集,释放凝血途径凝血途径血流减慢血小板血栓凝血酶初期止血血栓纤维蛋白沉积二期止血血栓血管壁的止血作用,第一节止血、凝血和纤溶机制,一、血管壁的止血作用,二、血小板的止血作用,三、凝血因子的作用,四、抗凝系统的作用,1.粘附功能:,5.血块收缩功能:,4.促凝功能:,3.释放功能:,2.聚集功能:,二、血小板的止血作用,第一节止血、凝血和纤溶机制,内皮下组分、vWF和GPIb-,巨大血小板综合症(BBS),Fg、Ca2+、GPb/a,血小板无力症(GT),ADP、PF4,a-PF3-Ca2-a;a-PF3-Ca2-a,肌动球蛋白收缩,第一节止血、凝血和纤溶机制,三、凝血因子的作用,凝血机制-,XII,XIIa,XI,XIa,IX,IXa,X,Xa,VII,III,PF3Ca2+,II,IIa,Fib,接触激活,Ca2+PF3,VIIIa,Va,VIIa,传统瀑布学说,内源凝血途径,外源凝血途径,共同途径,APTT,PT,TT,Fg,第一节止血、凝血和纤溶机制,四、抗凝系统的作用(thefunctionofanticoagulationsystem),细胞抗凝,单核-巨噬细胞,内皮细胞,吞噬清除TF,a,FDPs;分泌2-MG,1-AT,,摄取和灭活活化因子;分泌抗凝物质:AT-、PC系统、HC-、TFPI,合成释放PGI2、TM、AT-、TFPI,抗凝血酶及肝素,HC-,蛋白系统,肝细胞,体液抗凝,血管内皮细胞合成vWF、内皮素、6-酮前列腺素F1a一、筛检试验(一)出血时间(BT)(二)束臂试验(毛细血管抵抗力试验)二、诊断试验(一)血管性血友病因子抗原及活性测定(二)血浆6-酮前列腺素F1a测定(三)血浆凝血酶调节蛋白抗原测定(四)血浆内皮素-1测定,第二节血管壁检测,第三节血小板检测,一、筛检试验(一)血小板计数(二)血块退缩试验,二、诊断试验(一)血小板相关Ig测定(二)血小板粘附试验(三)血小板聚集试验(四)血小板P-选择素(五)血小板促凝活性测定(六)血浆血栓烷B2测定,一、筛检试验(一)活化部分凝血活酶时间测定(APTT)(二)凝血时间(CT)(三)血浆凝血酶原时间测定(PT)二、诊断试验(一)血浆凝血因子促凝活性(二)血浆纤维蛋白原测定(Fg)(三)血浆因子定性试验(四)可溶性纤维蛋白单体复合物测定(sFMC),第四节凝血因子检测,II,Fg,液相激活,a,内源凝血途径,(TF),TFCa2+a,外源凝血途径,共同凝血途径,瀑布学说,aPF3Ca2a,a,Ca2,Ca2,aPF3Ca2a,IIa,FM,Fb,Ca2,Ca2,Ca2,Ca2,血管损伤,K,a,a,IIa,Ca2,TFPI,凝血酶原酶,PK,K,HMWK,a,a,a,固相激活,APTT,PT,TT,Fg定量,XIIIa,XIII,“凝血四项”,一、病理性抗凝物质的筛检试验(一)血浆凝血酶时间测定(二)甲苯胺蓝纠正试验或血浆游离肝素时间测定(三)APTT交叉试验二、病理性抗凝物质的诊断试验(一)狼疮抗凝物质测定(二)抗心磷脂抗体测定三、生理性抗凝因子测定(一)血浆AT-活性测定(AT-:A)(二)PC活性测定(PC:A)(三)血浆游离PS测定(FPS)(四)血浆凝血酶-抗凝血酶测定(ATA),第五节抗凝系统检测,一、筛检试验(一)血浆D-二聚体(D-D)定性试验(二)血浆纤维蛋白(原)降解产物(FDP)定性试验(三)优球蛋白溶解时间测定(ELT)二、诊断试验(一)血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)测定(二)血浆纤溶酶原活性测定(三)血浆纤溶酶原激活抑制物-1活性测定(四)3P试验(五)血浆纤溶酶-抗纤溶酶复合物测定(六)血浆纤维蛋白(原)降解产物(FDP)定量测定(七)血浆D-二聚体(D-D)定量测定,第六节纤溶活性检测,第七节血液流变学检测,(一)全血粘度:见于冠心病、心梗、高血压、脑血栓形成、DVT、糖尿病、高脂血症、恶性肿瘤、肺源性心脏病、真红、MM、原发性巨球蛋白血症、烧伤等。:见于贫血、重度纤维蛋白原或其他凝血因子缺乏。,第七节血液流变学检测,(二)血浆粘度测定:见于血浆蛋白和(或)血脂增高的疾病,如糖尿病、高脂血症、MM、原发性巨球蛋白血症、动脉粥样硬化等。,1.血液凝固时间(CT):定义:血液离体后至凝固所需的时间反映因子被负电荷表面激活至纤维蛋白形成,一连串酶促反应所需的时间主要反映内源性凝血过程第一期有无异常,二、二期止血缺陷筛选实验,1.血液凝固时间(CT):CT延长:血友病血管性血友病严重的因子、减少或缺乏纤溶亢进或抗凝物质增多,二、二期止血缺陷筛选实验,1.血液凝固时间(CT):CT缩短:血栓前状态血栓性疾病ACT可用于体外循环肝素用量的监护指标,二、二期止血缺陷筛选实验,2.活化部分凝血活酶时间测定(APTT)是在抗凝的少血小板血浆中,加入足够量的活化接触因子激活剂(白陶土)和部分凝血活酶(代替血小板磷脂),再加钙以满足内源凝血的全部条件,观察血浆凝固所需时间,即APTT,二、二期止血缺陷筛选实验,检查内源性凝血更为敏感血小板异常不影响结果,2.活化部分凝血活酶时间测定(APTT)参考值:33.6840.32延长10s以上即有意义,二、二期止血缺陷筛选实验,2.活化部分凝血活酶时间测定(APTT)临床意义:监测肝素治疗首选指标延长:先天性凝血因子异常:甲、乙型血友病凝血因子缺乏:、抗凝物或凝血因子抑制物增多:SLE,二、二期止血缺陷筛选实验,2.活化部分凝血活酶时间测定(APTT)临床意义:监测肝素治疗首选指标缩短:血栓前状态,如DIC及血栓性疾病肝素治疗的监测:维持在正常的1.52.5倍,二、二期止血缺陷筛选实验,3.血浆凝血酶原时间测定(PT)被检血浆中加入组织凝血活酶(组织因子)和Ca2+,观察血浆凝固所需的时间检测外源性凝血系统的筛选试验反映因子、X、V、I的水平,二、二期止血缺陷筛选实验,3.血浆凝血酶原时间测定(PT)参考值:PT:1113s;正常对照3s以上有意义凝血酶原时间比值(PTR):10.15PTR=受检者PT/正常对照PT(秒),二、二期止血缺陷筛选实验,3.血浆凝血酶原时间测定(PT)参考值:PT:1113s;正常对照3s以上有意义凝血酶原时间比值(PTR):10.15PTR=受检者PT/正常对照PT(秒)国际标准化比值(INR),二、二期止血缺陷筛选实验,1.01.5最佳,3.血浆凝血酶原时间测定(PT)临床意义:延长:凝血因子、V、X缺乏如严重肝病、VitK缺乏、纤溶亢进缩短:先天性因子V增多,高凝状态及血栓性疾病监测口服抗凝剂治疗的首选指标,二、二期止血缺陷筛选实验,优球蛋白溶解时间测定(ELT)血清(浆)纤维蛋白(原)降解产物(FDP)测定血浆D-二聚体(D-D)测定,三、纤溶活性增强筛选实验,1.优球蛋白溶解时间测定(ELT)包括血浆纤维蛋白原、纤溶酶原和纤溶酶原激活物在酸性(pH4.5)低离子强度溶液中可被沉淀,并溶解于缓冲液中当加入钙或凝血酶使其凝固后,在37下观察凝块完全溶解的时间,即为ELT,三、纤溶活性增强筛选实验,1.优球蛋白溶解时间测定(ELT)参考值:加钙法:129.841.1min加酶法:157.559.1min,三、纤溶活性增强筛选实验,1.优球蛋白溶解时间测定(ELT)临床意义:延长:纤溶活性减低,如血栓前状态、应用抗纤溶药物缩短:短于70min说明纤溶活性增强,原发性或继发性纤溶亢进(DIC),三、纤溶活性增强筛选实验,2.血清(浆)纤维蛋白(原)降解产物(FDP)测定血浆FDP可与FDP抗体发生肉眼可见的凝集反应参考值:ELISA法血浆5mg/L;血清10mg/L,三、纤溶活性增强筛选实验,2.血清(浆)纤维蛋白(原)降解产物(FDP)测定临床意义:轻度增高(1040mg/L):急性静脉血栓形成、急性心梗、手术后明显增高(40mg/L):DIC、原发性纤溶亢进、急性早幼粒细胞白血病,三、纤溶活性增强筛选实验,3.血浆D-二聚体(D-D)测定是FDP的成分,继发性纤溶亢进的标志参考值:ELISA法0.4g/L临床意义:增高:(1)DIC、血栓形成(2)溶栓治疗有效的指标,三、纤溶活性增强筛选实验,出血性疾病的诊断一期止血缺陷筛选实验的应用二期止血缺陷筛选实验的应用纤溶活性亢进筛选实验的应用,第八节实验项目的选择和应用,1.一期止血缺陷筛选实验的应用BTN、PLTN:正常人、单纯性紫癜、过敏性紫癜BT、PLT:原发性或继发性血小板减少性紫癜BT、PLT:原发性或继发性血小板增多症BT、PLTN:血小板功能异常、vWD低(无)纤维蛋白血症,第八节实验项目的选择和应用,2.二期止血缺陷筛选实验的应用APTTN、PTN:正常人、因子X缺乏症APTT、PTN:血友病、缺乏症APTTN、PT:因子、X缺乏症APTT、PT:因子X、V、I缺乏症,第八节实验项目的选择和应用,3.纤溶活性亢进筛选实验的应用FDPN、D-DN:纤溶活性正常FDP阳性、D-D阳性:
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