真菌课件萌芽培训.ppt

四川省人民医院乔宁,EVIDENCE,真菌感染与实验室诊断进展,真菌感染日趋增加,患者年龄的增高广谱抗生素的应用更多、更复杂的医疗手段（如移植等）高强度细胞毒性治疗的应用免疫抑制剂的应用其它病因死亡率相对降低,真菌是院内感染常见微生物,占院内感染的-7.5%血液感染的-第四位肿瘤病人发病率-为8%严重创伤、烧伤病人-高达16%死亡率高-达55%70%,真菌感染的流行病学概况,真菌感染的第一个变化：深部真菌感染上升，其中曲霉菌感染明显上升；近20年真菌感染的第二个变化：白色假丝酵母菌比例减少，其他念珠菌的比例上升。曲霉菌引起全身感染的病例已不罕见，死亡率增加。,真菌感染的危险因素,基础疾病广谱抗生素使用静脉插管及各种侵袭性操作肾上腺糖皮质激素、免疫抑制剂、放射性或化学治疗后、器官移植后高龄（65岁）、婴幼儿住院时间长，尤其是入住ICU大于5天以上,真菌概述,浅部真菌,深部真菌,双相型真菌,真菌感染的分类,根据真菌侵犯人体的部位分为四类：浅表真菌病皮肤真菌病皮下组织真菌病系统性真菌病,浅部真菌病,深部真菌病,临床常见的真菌病,浅表真菌病花斑癣掌黑癣毛结节菌病,皮肤真菌病皮肤癣菌病手足、体股、头、甲皮肤念珠菌病,皮下真菌病孢子丝菌病着色芽生菌病暗色丝孢霉病足菌肿,系统性真菌病念珠菌病曲霉病隐球菌病接合菌病双相真菌感染,浅部真菌病,限于皮肤最外层，甲板、毛发和粘膜的感染。主要的感染是皮肤癣菌病和浅表念珠菌病。大多轻微，容易诊断，对治疗反应良好。,手、足、甲癣最常见的真菌病,各种头癣：传染、危害健康,皮下真菌病往往经过外伤发病,孢子丝菌病,着色芽生菌病,系统性真菌病,常起源于肺，可以播散到全身许多器官,严重的可引起死亡。常通过吸入致病菌孢子而获得，其致病菌腐生于土壤或腐败有机物中，或作为植物致病菌。病原体可分为两组：真正的致病菌和条件致病菌。,系统性真菌病危及生命,系统性真菌病主要的致病真菌,荚膜组织胞浆菌粗球孢子菌皮炎芽生菌巴西副球孢子菌,临床常见的条件性真菌感染,念珠菌病:最常见，血源感染的第4位。曲霉菌病:常见于干细胞移植、实体器官移植、大剂量化疗患者。隐球菌病:艾滋病人患病率为10-20%。接合菌病（毛霉病）:多见于重症糖尿病、烧伤病及器官移植病人。,临床有增多趋势的条件致病性真菌,非白念念珠菌感染毛孢子菌感染地霉感染镰刀菌感染枝顶孢霉感染暗色真菌感染马尔尼菲青霉,真菌感染的诊断方法,真菌镜检真菌培养组织病理生理生化血清学方法分子生物学,真菌镜检,革兰染色各种真菌均染成革兰阳性直接镜检氢氧化钾（KOH）标本墨汁标本隐球菌其它染色(糖原染色、镀银染色、乳酸酚棉蓝染色等)，组织病理学,真菌直接镜检的操作,1.采集标本于载玻片上，滴加10%KOH一滴2.覆上盖玻片并微加热，略加压制片后作镜检3.查见真菌的有形成分（菌丝、孢子）即为阳性，反之，则为阴性,真菌直接涂片的诊断价值,最重要又基本的检测方法，一般医院都能开展，能为临床提供及时的诊断依据。发现真菌的有形成分如菌丝、假菌丝或较多的孢子往往提示真菌感染。根据菌丝、孢子的形态，部分可确定病原菌隐球菌：墨汁涂片中可见厚而透亮的荚膜念珠菌：假菌丝及芽孢马拉色菌：粗短如香蕉状的菌丝和圆形的孢子毛霉菌：粗大而不分隔的菌丝,念珠菌病-直接镜检,隐球菌病直接镜检,新型隐球菌,组织病理学,阿申蓝染色,H46,-D-葡聚糖（G试验）的价值,酵母菌、丝状真菌细胞壁成分；用于对系统性真菌病的诊断筛查；不仅检测曲霉菌，还可以检测念珠菌、镰刀菌、毛孢子菌、支顶孢属等；不能检测：隐球菌和接合菌。,-D-葡聚糖（G试验）的价值,敏感性：63-100%；特异性：74-100%美国大多数研究限于念珠菌菌血症其他真菌感染（侵袭性曲霉菌病）的研究资料少缺点：易引起假阳性（血液透析；接受血制品治疗；药物等），而且无法区分真菌种类。动态监测可避免假阳性,半乳甘露聚糖（GM）,曲霉菌细胞壁上一种多聚糖抗原，用于曲霉感染的早期诊断及治疗的监测；可以从血清、脑脊液、胸水、BALF检测到；敏感性：29-100%；特异性：80-98.7%特点:与症状的消长成正比,可用于疗效观察；阳性结果出现在临床症状和影像学特征之前，对高危人群应进行动态监测（2次/周）。,半乳甘露聚糖（GM）试验的局限性,结果阴性不能排除IA；应在经验抗真菌治疗前进行检测；出现阳性结果，应取另一份标本再次测定;尚未评价在新生儿或儿童血清中的表现；某些药物和食物可以导致假阳性；青霉菌、隐球菌、拟青霉菌出现交叉反应,酵母菌的药敏,CLSIM44纸片扩散法药敏试验：培养基采用MH琼脂平皿，含2%葡萄糖和0.5g/ml甲基美蓝。菌液调整到0.5McF，35-37孵育20-24h，缓慢生长的菌株（例如隐球菌属），可以孵育48h后再读取结果。药敏质控菌株：白念珠菌ATCC90028和近平滑念珠菌A