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文档简介
专题二十六克隆技术,考点一植物细胞工程,1.植物组织培养技术,(1)原理:植物细胞具有。,全能性,(2)过程:,脱分化,再分化,人工种子,2.植物体细胞杂交技术,3.植物克隆技术的应用,植物组织培养,愈伤组织,植物体细胞杂交过程中杂种细胞类型及检测方法,(1)诱导结果(假设用于杂交的两种植物细胞分别为a、b):未融合的细胞:a和b。两两融合的细胞:aa、bb和ab。多细胞融合体。(2)检测方法:对诱导产物中的细胞进行植物组织培养,然后根据得到的植物性状进行判断。若只表现出一种植物的性状,说明是未融合细胞。若得到的是具有两种亲本性状的植物,说明是杂种植株。,若得到的是两种亲本性状的植物,且一种植物的性状得到加强,则是多细胞融合体。若得到的是一种植物的性状,但是效果得到加强,则是同种细胞融合的结果。(3)植物体细胞杂交后的遗传物质分析遗传特性:杂种植株中含有两种植物的遗传物质,故杂种植株具备两种植物的遗传特性。染色体组数a.染色体组数两种植物体细胞内染色体组数之和。b.植物体细胞杂交形成的杂种植株,有几个染色体组就称为几倍体。,植物组织培养与植物体细胞杂交的比较,考点二动物细胞工程,1.动物细胞培养过程及条件,培养液,用具,更换,清除,2.动物体细胞核移植技术和克隆动物,(1)动物体细胞核移植技术的过程,细胞培养,去核,重组细胞,供体,(2)动物体细胞核移植技术的原理、结果及应用,得到克隆动物,遗传改良,3.动物细胞融合与单克隆抗体制备技术,细胞膜的流动性,b淋巴细胞,单克隆抗体,运载,判断正误(1)连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型(2014浙江,3a)()(2)制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织,再用胃蛋白酶处理(),动物细胞培养与动物体细胞核移植技术的比较,动物细胞融合与单克隆抗体制备的归纳,(1)制备单克隆抗体时选用一种抗原处理的b淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合,产生杂交瘤细胞,杂交瘤细胞兼有两个亲本细胞的特性在体外培养条件下能不断增殖,同时能产生出某种特异性的抗体。(2)进行动物细胞的诱导融合,形成的杂种细胞有三种:aa型、bb型、ab型。只有ab型才是我们所需要的杂种细胞,所以需要用选择性培养基进行筛选。,(3)单克隆抗体制备过程中的两次筛选,1.不清楚动物细胞培养时,为何使用胰蛋白酶而不使用胃蛋白酶,点拨进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。分散细胞时不能用胃蛋白酶,因为胃蛋白酶作用的适宜ph约为1.8。胰蛋白酶作用的适宜ph为7.27.8,而多数动物细胞培养的适宜ph为7.27.4。,2.误认为动物细胞培养液中加入5%co2的目的是维持气体平衡或用于呼吸,点拨动物的细胞培养时,需向培养液中加入5%co2(95%空气),加入co2的目的是“维持培养液的ph”。,3.不清楚动物细胞克隆化培养时为何常选10代以内的细胞,而“瘤细胞”却为“50代以后”,点拨取供体动物的体细胞培养,一般选用传至10代以内的细胞,因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型,保证了供体细胞正常的遗传基础。然而欲获得“无限增殖”的“瘤细胞”则往往在“50代以后”,其遗传物质已发生变化,具“癌变”特性。,4.不清楚植物脱毒苗培养时选择要求及原理,点拨由于植物分生区附近(如茎尖)的病毒极少,所以常采用茎尖组织培养技术获得脱毒苗。,5.误认为克隆动物的产生体现了“动物细胞全能性”,不能解释克隆动物性状“变异”的成因,点拨核移植形成重组细胞发育成一个新个体,体现了细胞核的全能性而非动物细胞的全能性。核移植技术获得的动物与供核动物性状不完全相同,主要源于如下三方面:克隆动物绝大部分dn
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