股骨头坏死专题PPT课件

中西医结合治疗股骨头坏死临床研究2000年获国家科技进步二等奖,1,PPT学习交流,股骨头坏死,世界骨科领域三大难题之一临床常见，发病率呈上升趋势好发于20-50岁的中青年早期诊断与治疗十分困难,2,PPT学习交流,股骨头坏死,创伤、激素、酒精中毒为主要原因非创伤性发病机制十分复杂，尚未完全清楚血管内凝血、脂肪栓塞、骨内高压、细胞毒性、骨质疏松等多种途径-股骨头血循环障碍-坏死发生,3,PPT学习交流,股骨头坏死的危害,致残率高，严重影响生活质量患者丧失劳动能力给家庭和社会带来严重经济和精神负担,4,PPT学习交流,股骨头坏死发展过程,正常缺血坏死塌陷骨性关节炎,缺血与塌陷是治疗的难点与关键,5,PPT学习交流,发病后相当时间缺少症状早期疼痛可远离髋关节原有疾病干扰X线片难以显示早期坏死,早期诊断困难的原因,6,PPT学习交流,长期服用激素者应定期作MRI或ECT检查，直至停药后至少一年以上一侧股骨头坏死者，另一侧应高度怀疑，并作相应检查,早期诊断方法,7,PPT学习交流,8,PPT学习交流,对成年男性发生髋、膝疼痛，如有酗酒史，必须排除股骨头坏死，及时作X线及MRI或ECT检查,早期诊断方法,9,PPT学习交流,对股骨颈骨折愈合后患者，有下列表现者，应警惕发生股骨头坏死恢复正常行走后再次疼痛X线片显示股骨头密度持续增高内固定术后3月ECT检查股骨头呈现“冷”区,早期诊断方法,10,PPT学习交流,病史（创伤、激素、酒精等）临床症状：髋或膝痛体征：腹股沟附近压痛髋活动受限（旋转、外展）肌肉萎缩跛行或行走困难,临床诊断,11,PPT学习交流,最常用、最简单、最直观、最廉价的诊断手段能大致反映坏死范围、部位；塌陷范围、程度；推测软骨状态；判断增生程度、头臼关系,X线诊断,12,PPT学习交流,动态X线片能反映坏死转归趋势鉴别诊断不可缺少确定手术方案主要依据、评价疗效的重要手段摄片要求：清晰、双髋正、蛙位缺点：早期坏死敏感性差,X线诊断,13,PPT学习交流,14,PPT学习交流,Ficat分期AB,袁氏分期AB,袁氏分期与Ficat分期,15,PPT学习交流,Ficat分期,袁氏分期ABC,袁氏分期与Ficat分期,16,PPT学习交流,Ficat分期,袁氏分期ABC,袁氏分期与Ficat分期,17,PPT学习交流,股骨头坏死范围,局部坏死1/3大部坏死2/3全头坏死2/3,18,PPT学习交流,股骨头坏死部位,内侧部坏死顶中部坏死外侧部坏死中央部坏死,19,PPT学习交流,股骨头坏死的病理分型,邹某，女，双侧激素性ANFH，郁阻型,20,PPT学习交流,徐某，男，左侧酒精性ANFH，大块缺血型,21,PPT学习交流,梁某，男，双侧ANFH，混合型(左侧),22,PPT学习交流,张某，男性，左侧增生硬化型，酒精性ANFH,23,PPT学习交流,是Ficat四期分法的改进比较全面真实地反映了股骨头坏死病理演变的过程更切合保留股骨头治疗方法的选择,袁氏分期分型优点,24,PPT学习交流,股骨头坏死诊断,病史、症状、体征、X片X片阴性，而临床怀疑或一侧确诊为非创伤性坏死，另一侧阴性时，作MRI检查，有金属物存在时，作ECT检查,25,PPT学习交流,鉴别诊断,股骨头坏死误诊为,腰椎间盘突出症,风湿病,肿瘤,膝关节疾病,26,PPT学习交流,鉴别诊断,色素沉着绒毛结节性滑膜炎强直性脊柱炎髋关节结核髋关节骨性关节炎类风湿性关节炎肿瘤髋臼发育不良,误诊为股骨头坏死,27,PPT学习交流,1、中青年好发，病情发展较快，可能塌陷,骨性关节炎,1、老年好发，病情发展缓慢，极少塌陷,2、塌陷发生前关节间隙正常,3、致残率高,2、早期可出现关节间隙变窄,3、多无严重致残,鉴别诊断,股骨头坏死,28,PPT学习交流,男30岁双股骨头坏死,女67岁双髋原发性骨性关节炎,29,PPT学习交流,股骨头坏死治疗,保留自身股骨头是治疗发展趋势绝大多数患者应避免首选人工关节置换理由：多数为中青年患者，目前的人工关节寿命不能满足患者的要求非创伤性坏死较其它髋关节病效果差,30,PPT学习交流,5年的失败率10%50%(美.Mont)中青年患者面临多次更换手术(日.Saito)价格昂贵,中晚期西医治疗方法人工关节置换术,31,PPT学习交流,股骨头坏死治疗,对所有患者一律采用保守治疗，使许多患者失去获得更好疗效的机会把疼痛暂时缓解，功能改善作为疗效主要依据对中晚期患者，轻率采用人工关节置换术,存在的误区,32,PPT学习交流,何某男51岁保守治疗前,治疗23月后,治疗54月,治疗40月,33,PPT学习交流,中医中药治疗股骨头坏死,亚临床期坏死发生在非负重区或为中央型患者有严重内科疾病，不具备手术条件者手术后配合应用,前景广阔，难度很大，目前的适应症,34,PPT学习交流,股骨头坏死,清除负重区死骨；重建股骨头血运；防止或纠正塌陷对晚期患者清除骨赘、改善功能；修补破裂软骨，头臼成形减轻骨性关节炎,手术治疗目的,35,PPT学习交流,中医中药保留股骨头的手术,我们的治疗方法中西医结合保留自身股骨头,36,PPT学习交流,血脉瘀滞，不通则痛疼痛瘀阻枢节关节功能障碍筋骨失养跛行,股骨头坏死主要病机血瘀气滞,37,PPT学习交流,袁氏活骨系列中药,主要功用活血化瘀消肿止痛补肾健骨药理研究表明：具有促进血管生长，促进成骨；另有提高机体免疫力和轻度的抗菌作用。该方已通过国家保密品种审批，专家一致认为其对股骨头坏死有“独特疗效”,38,PPT学习交流,保留股骨头的手术,多条血管束分离骨瓣移植,同时解决缺血与塌陷两个关键问题,提供丰富血运防止或纠正塌陷,39,PPT学习交流,多条血管束植入示意图,40,PPT学习交流,血管束植入股骨头后的生长情况,切下的股骨头植入的血管束在股血管束周围骨头内的生长情况的软骨成骨,41,PPT学习交流,中医中药治疗大法活血化瘀,早期患者避免手术治疗中晚期患者提高手术疗效,42,PPT学习交流,早期（、）或不具备手术中药条件的中、晚期中、晚期（-）手术+中药,中西医结合治疗方法,43,PPT学习交流,疗效评价标准,按照作者参与制订的全国骨坏死学组标准临床症状60分X线40分,44,PPT学习交流,病例治疗情况,45,PPT学习交流,袁氏活骨系列治疗效果(总有效率91.6%,总优良率61.6%),分期例数随访例数有效率优良率1852124693.6%63.2%135691290.4%60.8%0000000000000000,46,PPT学习交流,袁氏活骨系列配合手术治疗效果(近期随访1-5年),分期例数随访例数有效率优良率000000001556103394.8%86.7%98466198.7%89.1%40922796.1%85.9%22318698.9%87.5%,47,PPT学习交流,中西医结合方法人工关节,优良率,年数,48,PPT学习交流,韩素云女33岁双侧股骨头坏死（激素性左B、右A）94年1月28日行左侧中药+手术治疗（多条血管束植入术加缝匠肌骨瓣），右侧单纯中药治疗,典型病例,一侧手术+服药，一侧单纯服药,49,PPT学习交流,治疗前左侧全头坏死，严重塌陷，负重区可见大块死骨；右侧大部坏死，轻度塌陷。,50,PPT学习交流,治疗后1年左侧股骨头明显修复，塌陷基本纠正；右侧坏死区缩小，股骨头保持球形，无塌陷。,51,PPT学习交流,治疗后3年：左侧股骨头进一步修复，密度趋向均匀，头形态良好；右侧坏死区范围进一步缩小。,52,PPT学习交流,治疗后4年双侧股骨头基本修复，外形良好，关节间隙基本正常。,53,PPT学习交流,右侧服药前CT显示股骨头内大块囊区存在,54,PPT学习交流,服药4个月囊区内出现新骨,55,PPT学习交流,服药1年囊区内成骨现象明显,56,PPT学习交流,服药31个月囊区已基本被新生骨代替,57,PPT学习交流,术前功能术后功能,58,PPT学习交流,治疗后得到江泽民总书记的亲切接见,59,PPT学习交流,谭某某女52岁右侧股骨颈骨折后股骨头坏死（B）1988年5月24日行多条血管束植入术，术后配合中药治疗,60,PPT学习交流,治疗前右侧股骨头大部坏死，明显呈锥形塌陷。,61,PPT学习交流,治疗后7.5年右侧股骨头修复，密度均匀，外形良好，关节间隙基本正常,62,PPT学习交流,治疗后9.5年右侧髋关节基本正常,63,PPT学习交流,治疗后功能恢复正常，每天爬12层楼，一天三次,64,PPT学习交流,李佩君女36岁因过敏性皮炎，应用激素治疗致双侧股骨头坏死，左侧IIIB，右侧IIIB，均为全头坏死。,65,PPT学习交流,1991年10月左侧行多条血管束植入术+服药。,66,PPT学习交流,右侧单纯服药6月，死骨吸收，新骨形成，头趋园。,左侧术后6月，头增园，密度增高，死骨吸收，顶部软骨成骨明显。,67,PPT学习交流,治疗14个月恢复工作，22个月参加大型舞会获得一等奖。,68,PPT学习交流,李惠玲女44岁双侧股骨头坏死，右侧在某医院做人工股骨头置换，术后仍疼痛，丧失工作能力，用轮椅行走。,69,PPT学习交流,治疗后2年恢复工作，服药5.5年完全恢复正常。,91年10月右侧作血管束植入+中药，服药12月。,70,PPT学习交流,李惠玲治疗5.5年功能完全恢复正常。,71,PPT学习交流,彭某，男，31岁，因小脑炎用激素治疗引发双侧股骨头坏死。,左侧手术前,72,PPT学习交流,91年10月左侧行多条血管束植入+中药治疗10.5个月。头园，骨密度增高，提示血运丰富。,右侧IIIB，单纯服药治疗10.5月，骨密度增高，坏死区明显缩小，头园，关节间隙清晰,73,PPT学习交流,右侧服药24月，头园，密度进一步增高，达到临床基本治愈。,左侧术后+服药24月，显示头顶部尚有部分软骨成骨。,74,PPT学习交流,左侧术后+中药5年达到完全治愈。由于血管束提供了丰富的血运，促进了股骨头的恢复，所以塑形较右侧为快。,右侧服药5年，头塑形，骨小梁进一步增多。,75,PPT学习交流,治疗2.5年功能恢复正常。,76,PPT学习交流,孙新亮男38岁因酒精致双侧股骨头坏死，右侧IIIA，全头坏死（大块缺血型），左侧IIB，大部坏死。,77,PPT学习交流,右侧行血管束植入+中药治疗1.5年。头园，死骨吸收，软骨成骨。左侧单纯中药治疗，死骨吸收，新骨形成，恢复工作。,78,PPT学习交流,治疗后3年，右侧头新骨形成，头呈饱满，尚有部分软骨成骨。左侧死骨吸收，成骨明显，达到基本治愈。,79,PPT学习交流,治疗后5年头进一步塑形，达到临床治愈。,80,PPT学习交流,单纯服药治疗,81,PPT学习交流,洪凤仙男58岁双侧IIA,82,PPT学习交流,服药4月后自觉症状明显好转，疼痛减轻，双髋自感轻松。X线显示骨密度增加，死骨吸收。,83,PPT学习交流,服药7月进一步好转。,84,PPT学习交流,服药22月头密度增高，骨小梁增多，关节间隙清晰，无明显疼痛，行动自如。,85,PPT学习交流,服药34月自觉行动进一步改善，骨小梁增多，密度增高，头进一步饱满，关节间隙清晰。,86,PPT学习交流,洪凤仙功能相,87,PPT学习交流,马惠珍女34岁患SLE用激素治疗致左侧股骨头坏死IIIB。,88,PPT学习交流,服药2月死骨吸收，裂解，透明带增加，部分骨密度增高，头趋园。,89,PPT学习交流,服药5月密度增高，趋均匀，头顶部软骨成骨，头园。疼痛明显减轻，功能改善。,90,PPT学习交流,服药16月骨小梁形成，骨密度增高，趋均匀。,91,PPT学习交流,服药2.5年，成骨明显。,92,PPT学习交流,服药5年10个月，达到临床治愈。,93,PPT学习交流,张琴女36岁因SLE激素致双侧坏死，IIIA。服药治疗。,94,PPT学习交流,服药9月，坏死区缩小，骨密度增高。,95,PPT学习交流,张琴功能相,96,PPT学习交流,赵玉慧女19岁脑炎用激素治疗致双侧股骨头坏死，左侧IIIB，右侧IIIA。,97,PPT学习交流,服药3月，右侧骨密度明显增高，均匀，左侧死骨吸收明显。,98,PPT学习交流,服药19月，骨密度明显增高。,99,PPT学习交流,赵玉慧功能相,100,PPT学习交流,何谓鸿男51岁双侧激素性股骨头全头坏死，左侧IIIB，右侧IIB。,101,PPT学习交流,服5个月，死骨明显吸收，裂解。,102,PPT学习交流,服10个月，死骨吸收，新骨形成。,103,PPT学习交流,服1年11个月，进一步成骨明显。,104,PPT学习交流,服40个月，死骨完全吸收，成骨明显，部分软骨成骨，达到临床基本治愈。,105,PPT学习交流,王强男40岁，酒精致双侧股骨头全头坏死，左侧IIIB，右侧IIIA。,106,PPT学习交流,王强服药2个月，死骨吸收，成骨明显。,107,PPT学习交流,服5个月，成骨非常明显，头园，关节间隙正常。,108,PPT学习交流,服9个月，进一步新骨形成和塑形。,109,PPT学习交流,吕固然之妻女70岁右侧股骨头坏死VI期，合并骨性关节炎，关节间隙消失，疼痛剧烈。,110,PPT学习交流,服药3个月，死骨吸收，新骨形成，关节间隙出现，疼痛减轻明显。,111,PPT学习交流,来信告知：未服药之前，除行走明显跛行外，严重的是不分日夜酸、刺痛难忍，借助于炎痛喜康。自服该药一瓶后，人感舒服，5瓶后感到轻微的疼痛，8瓶后患腿膝盖下疼痛消除，停用炎痛喜康。,服药3个月，患者来信：,112,PPT学习交流,黄碧玉女52岁肾移植后，用激素抗排斥致双侧股骨头坏死，左侧在印尼做全髋置换仍不能减轻疼痛，右侧IIIA。来髋病中心求医。,113,PPT学习交流,由于体质太差，无法做血管束植入，改用服药治疗，3个月后，疼痛明显消失，离开轮椅，双拐行走。死骨吸收。,114,PPT学习交流,服7个月，死骨明显吸收，骨密度增高，头顶部软骨成骨，活动行走轻便。,115,PPT学习交流,服药16个月，成骨明显，头顶部软骨钙化，死骨完全吸收，行动方便，赴美旅游。,116,PPT学习交流,服药3年，股骨头进一步成骨，塑形，头顶部软骨继续钙化。,117,PPT学习交流,黄碧玉功能相,118,PPT学习交流,朱殷雷男20岁因脑炎激素治疗致双侧全头坏死，IIIA。,119,PPT学习交流,服药4个月，坏死区明显缩小，死骨吸收，成骨明显，疼痛消失。,120,PPT学习交流,服药7个月，死骨继续吸收，软骨成骨明显。,121,PPT学习交流,服13个月，死骨完全吸收，进一步成骨塑形，头呈园，密度趋均匀。,122,PPT学习交流,服32个月，头继续成骨和塑形，右顶部尚有小量软骨成骨，19个月恢复工作。,123,PPT学习交流,朱殷雷功能相,124,PPT学习交流,丁传友男71岁，右侧股骨颈骨折2年，全头出现坏死，疼痛难忍。,125,PPT学习交流,蛙位片,126,PPT学习交流,服药3个月，疼痛消失，X片显示死骨吸收，成骨明显，骨密度增高，头呈园形。,127,PPT学习交流,服药6个月，继续成骨和塑形，骨密度进一步增高。,128,PPT学习交流,服药10个月，骨密度进一步增高和塑形，出现骨小梁，从颈部上升。,129,PPT学习交流,服药16个月，死骨完全吸收，成骨明显，骨小梁形成，基本达到临床治愈。,130,PPT学习交流,服药2年4个月，进一步成骨和塑形，去拐行走。,131,PPT学习交流,丁传友服药3年功能相,132,PPT学习交流,王炉中男42岁，酒精致双侧股骨头全头坏死，左侧IIIA，右侧IIIB。,133,PPT学习交流,服药3个月，右侧死骨吸收，新骨形成明显，坏死范围缩小，左侧死骨吸收，成骨明显，显示膜内成骨。,134,PPT学习交流,服药6个月，双侧股骨头成骨明显，头趋园形，均匀。,135,PPT学习交流,服药9个月，骨密度进一步增高，均匀，头塑形。,136,PPT学习交流,服药11个月，双头进一步成骨，骨密度明显增高，头塑形，增园，左侧达到临床基本治愈，去拐行走。,137,PPT学习交流,服药22个月，右侧坏死区缩小，形成中央坏死型，周缘密度增高，股骨头支撑力增强，达到临床基本治愈。,138,PPT学习交流,治疗中应注意的问题,1.疼痛：发生、发展过程，对策2.预防头塌陷，及防止二次塌陷3.预防术后半脱位：纠正骨盆的倾斜髋臼唇不要全部切除收紧关节囊，缝合密实髋臼加盖包容不佳；外侧壁低；年龄大，臀中肌力量弱者外展牵引,139,PPT学习交流,骨性关节炎的预防：凡是头已塌陷者均可能出现，故术后应维持牵引，加大关节间隙，扶双拐行走时间宜尽量长，后期维持皮牵引，并服用袁氏系列中药进行有效的预防和治疗。功能康复：为安全渡过术后的疤痕期和挛缩期，应注意术后康复。术后3个月、6个月复查，若功能不满意，宜进行手法推拿或麻醉下推拿治愈后不要过度使用患侧，增强自我保护意识，劳逸结合,140,PPT学习交流,小结（1）,股骨头坏死是常见的危害严重的髋关节疑难病早期准确诊断是治疗关键，袁氏分期分型方法进一步揭示了股骨头坏死的病理演变规律，提高了该病的诊断水平保留自身股骨头是治疗发展方向中医药治疗前景广阔，有必要深入研究,141,PPT学习交流,首先应用中医传统的“去瘀生新”理论，指导股骨头坏死的治疗，显示了中医对于疑难病整体治疗的优势以重建股骨头血运为核心的手术，能使多数中青年中晚期患者避免或推迟人工关节置换,小结(2),142,PPT学习交流,小结（3）,手术治疗能否成功，与下列因素有关：诊断是否精确手术方法选择是否符合原则手术技术是否能达到手术目的术后康复是否有针对性病人能否很好合作,143,PPT学习交流,将中医药的整体治疗与针对性的局部手术治疗有机结合，采用中西医结合治疗股骨头坏死的方法，使绝大多数股骨头坏死患者都能恢复自身健康髋关节，从事正常工作与生活,小结（4）,144,PPT学习交流,2000年6月，应美国Virginia大学邀请进行学术交流，得到王国照教授和崔建军教授的热烈欢迎，相互交流了股骨头坏死的治疗经验，“中西结合治疗股骨头坏死”受到王国照教授的高度评价。,国外交流,145,PPT学习交流,访问王国照教授,146,PPT学习交流,参观崔建军教授的实验研究室,147,PPT学习交流,参观美国Hopkins大学医学院关节中心左：Moint教授。右：Hungford教授,148,PPT学习交流,2001年5月7日王国照教授来我校进行学术交流（左起第四：王国照教授）,149,PPT学习交流,王国照教授受聘仪式（左起第二：王国照教授）,150,PPT学习交流,JohnPaulJones,Jr.,M.D.致袁浩教授的信件节译,Jones教授是ARCO(国际骨微循环学会)的前任主席,151,PPT学习交流,尊敬的袁浩教授：希望您已收到我先前写给您的信。仅在5天前我才收到您寄来的令人感兴趣的CD光盘，不管如何，您在骨坏死方面进行了大量卓有成效的研究工作，这给我留下了深深的印象。多年来，我一直在寻找具有预防或/和治疗早期骨坏死的药物，但至今尚未找到,152,PPT学习交流,153,PPT学习交流,也许您现在已经发现了这种药物。若是，祝贺您!该袁氏中草药极可能是一个重大的科学贡献，特别是对于激素性和酒精性股骨头坏死的非手术治疗(和预防)，且可能对激素和酒精诱导的骨质疏松，以及因老龄和肥胖引起的原发性骨性关节炎也有效。目前，显然我们尚不知道该草药的活性成份。但是，基于五例激素性股骨头坏死的临床与放射学改变，以及您的实验研究，我推测该中药至少具有如下2个或更多的治疗效应。,154,PPT学习交流,其一，该药可能防止高脂血症、骨内脂肪栓塞、骨内脂质通过骨小管进入骨陷窝引起的脂肪聚集，和进而导致的骨细胞坏死。,155,PPT学习交流,156,PPT学习交流,JohnPaulJones,Jr.,M.D.,其二，基于你们的研究，显示该药能改善骨内微循环，可能通过促进血管生成来起作用(在骨形成之前)。该药还能刺激成骨细胞活性，放射学上显示能增加新骨形成。,157,PPT学习交流,中西医结合治疗股骨头坏死系列研究荣获2000年度国家科技进步二等奖。该课题先后还获得国家中医药管理局科技进步二等奖（1999年）、广东省中医药科技进步一等奖（1999年）、广州中医药大学科技进步一等奖（1998年）、广东省科技进步二等奖（1990年）、广东省高校卫生系统重大科技成果一等奖（1990年）等奖励。,获奖情况,158,PPT学习交流,2000年度国家科技进步奖励大会在人民大会堂举行，授奖者获得国家领导人的亲切接见。图为胡锦涛副主席与袁浩教授的亲切握手,159,PPT学习交流,图为朱鎔基总理与袁浩教授亲切握手,160,PPT学习交流,生脉成骨胶囊治疗激素性股骨头坏死的机理研究,股骨头坏死的治疗目的,改善或重建股骨头内血液循环促进骨再生、加速骨修复，恢复股骨头的组织结构防止或纠正股骨头塌陷、以及继发性骨性关节炎,162,PPT学习交流,生脉成骨胶囊的开发研究简况,60年代，用于治疗开放骨折感染创面发现消炎生肌，促进骨生长作用80年代早期，配合术后应用于股骨头坏死。目前应用3000余例，疗效满意80年代后期，单独用于股骨头坏死。目前治疗3000余例，总有效率达91.2%,优良率61.6%今年1月进入期临床，更名为“通络壮骨胶囊”,163,PPT学习交流,生脉成骨胶囊的作用,气滞血瘀病机关键、贯穿始终活血化瘀基本治则生脉成骨胶囊功效：活血化瘀、补肾健骨、消肿止痛、扶正固本,164,PPT学习交流,研究目的,生脉成骨胶囊,促进血管再生改善血液循环,促进骨再生加速骨修复,通络,壮骨,治疗股骨头坏死,165,PPT学习交流,动物：成年新西兰兔56只，省卫生厅提供药物：内毒素、甲基强的松龙生脉成骨胶囊造模：每只兔注射内毒素50g/kg共2次、注射甲基强的松龙20mg/kg共3次，2周后处死2只兔确认模型成立,实验方法,166,PPT学习交流,分组：正常组、模型组、生脉成骨胶囊组（中药组），每组18只观察：中药组以5ml/kg/日药液（含生药0.42g/ml）灌胃，另两组用生理盐水灌胃，三组动物分别于用药后4周、8周、12周各处死6只行相关检查,167,PPT学习交流,检测指标,光镜：空骨陷窝率、成骨细胞计数、软骨下血窦计数、TBV、MTW电镜：成骨细胞、骨细胞、胶原纤维原位杂交：型胶原mRNA，VEGFmRNA骨组织生化代谢：第8周软骨下骨胶原、钙、磷血清放免检测：BGP、IL-6、,168,PPT学习交流,一、光镜观察结果,空骨陷窝率（%）比较,组别4周8周12周正常组123133133模型组405*5212*589*中药组235*194154注：各组与正常组相比，*P0.05；*P0.01；与模型组相比，P0.05；P0.01(以下同),模型组各时相点的空骨陷窝率较正常组升高。中药组各时相点的则较模型组降低（P0.01），但第4周时空骨陷窝率高于正常组（P0.01）,170,PPT学习交流,成骨细胞计数（个）比较,组别4w8w12w正常组272282283模型组193*182*163*中药组254313365,171,PPT学习交流,骨小梁相对体积(TBV,%)比较,组别4周8周12周正常组503513536模型组464412*426*中药组494524545,172,PPT学习交流,骨小梁平均宽度（MTW，m）比较,组别4周8周12周正常组163.3314.75161.5013.77162.5013.77模型组150.677.47144.838.54*143.339.90*中药组160.8313.17165.1714.05179.8318.08,173,PPT学习交流,软骨下血窦计数(个)比较,174,PPT学习交流,软骨下血窦,模型组,正常组,中药组,175,PPT学习交流,髓腔内血窦,正常组模型组第12周中药组第12周,176,PPT学习交流,骨小梁,正常组模型组第4周中药组第4周,177,PPT学习交流,骨小梁,正常组模型组第12周中药组第12周,178,PPT学习交流,骨细胞,正常组模型组第4周中药组第4周,179,PPT学习交流,成骨细胞,正常组模型组第12周中药组第12周,180,PPT学习交流,二、超微结构观察,正常组接近成熟的骨细胞模型组：细胞核开始固缩、核/浆比例大，呈现退变相,骨细胞,182,PPT学习交流,骨细胞,模型组模型组中药组,183,PPT学习交流,正常组成骨细胞，粗面内质网发达，多聚核糖体丰富，线粒体多。,成骨细胞,模型组成骨细胞，粗面内质网扩张、脱颗粒，线粒体肿胀，有呈气球样变，胞核皱缩。,中药组成骨细胞，粗面内质网发达，多聚核糖体丰富，线粒体多。,184,PPT学习交流,胶原纤维,模型组成骨细胞，细胞器结构差，胞核有皱缩，核异染色质增多；基原质内胶纤维排列紊乱,中药组的成骨细胞边可见周期性胶原纤维，明暗相间，排列有序。,185,PPT学习交流,三、原位杂交观察,186,PPT学习交流,型胶原探针序列,针对型胶原1链的寡核苷酸探针序列：5CACAGATCACGTCATCGCACAACACCTTGCCGTTG35AGCTTCACCGGGACGACCAGCTTCACCAGGAGATC3针对型胶原2链的寡核苷酸探针序列：5TCACTCCTTCTACATTATATTCAAACTGGCTGCCA3探针采用地高辛标记，凝胶过滤备用。,187,PPT学习交流,血管内皮细胞生长因子(VEGF)探针序列,(1)5，CAGCCTGGGACCACTTGGCATGGTGGAGGTAGAGC3，(2)5，CACATCTGCAAGTACGTTCGTTTAACTCAAGCTGC3，(3)5，ATATTAACATCACGTCTTTGTCTCTAGAGCAGTTT3，,188,PPT学习交流,原位杂交步骤,固定脱钙包埋切片,切片脱蜡消化,预杂交杂交,封闭加抗、抗,DAB显染封片观察,型胶原mRNA在股骨头内表达的结果,阴性对照阴性对照软骨细胞未见阳性表达,190,PPT学习交流,正常组模型组第4周中药组第4周,成骨细胞,191,PPT学习交流,成骨细胞,模型组第12周中药组第12周,192,PPT学习交流,骨髓,正常组模型组第12周中药组第12周,193,PPT学习交流,12周时VEGFmRNA在成骨细胞的表达结果,正常组模型组中药组阳性表达弱阳性表达阳性表达,194,PPT学习交流,12周时VEGFmRNA在血管内皮细胞的表达结果,正常组模型组中药组中药组阳性表达弱阳性表达阳性表达阳性表达,195,PPT学习交流,四、骨组织生化代谢,第8周时股骨头内生化指标比较(g/mg),组别胶原量钙总量磷总量正常组206.0616.03197.3611.2089.336.63模型组168.6815.74*183.4610.98*82.185.82*中药组208.3216.80198.3514.8194.878.07,197,PPT学习交流,五、血清放射免疫学检测,TXB2测定结果（单位pg/ml）,组别4周8周12周正常组186.4648.21185.9430.08182.0636.37模型组634.4369.36*852.6261.67*960.8372.23*中药组467.8636.15*318.6943.82196.4128.14,199,PPT学习交流,“瘀去”指标结果,200,PPT学习交流,6-K-PGF1测定结果（单位pg/ml）,组别4周8周12周正常组58.5613.2154.9412.1856.0615.37模型组38.439.36*24.927.68*11.833.23*中药组52.8612.1556.6910.3261.219.54,201,PPT学习交流,“瘀去”指标结果,202,PPT学习交流,T/K比值的变化,组别4周8周12周正常组3.181.213.380.983.250.87模型组16.514.36*34.219.68*81.220.23*中药组8.851.15*5.621.323.211.54,203,PPT学习交流,“瘀去”指标结果,204,PPT学习交流,血清骨钙素(ng/ml)比较,组别4周8周12周正常组9.860.8510.590.8510.012.25模型组9.341.507.163.15*7.142.98*中药组10.291.899.922.0311.700.86,205,PPT学习交流,血清IL-6(pg/ml)比较,组别4周8周12周正常组82.3318.3484.3121.7790.7322.25模型组263.3761.13*219.9453.84*171.0574.91中药组79.8525.1264.4420.0592.9468.22,206,PPT学习交流,讨论,动物模型的制备,单纯用激素：脂质代谢紊乱、脂肪栓塞、骨细胞脂肪变性激素加马血清：血管炎、血管破坏、骨内和髓内出血激素加内毒素：血液高凝、低纤溶，IC“血瘀”：部分脏器有瘀血、出血、血栓形成，T/K失平衡，高粘滞血症等,208,PPT学习交流,本模型的特点（一）,内毒素加激素导致了动物“瘀”的情况病理：动物股骨头局部发现有纤维蛋白血栓的形成，血管破坏，表现为血管内皮结构、平滑肌纤维排列紊乱。原位杂交：血管内皮细胞中的VEGFmRNA的表达明显降低。血液学：TXB2水平增高，6-keto-PGF1水平降低，T/K比值增高。,209,PPT学习交流,“血瘀”状态下，出现了成骨功能低下的表现病理：股骨头髓腔内生血细胞减少，大的脂肪空泡，骨小梁结构紊乱，稀疏、碎裂，骨空骨陷窝率增高，成骨细胞数量较少，呈长梭形。原位杂交：成骨细胞型胶原mRNA的表达降低血液学：BGP水平逐渐下降骨吸收、骨丢失增加：骨小梁变细；骨吸收陷窝；骨有机质(胶原)和无机质(钙、磷)丢失；血清IL-6水平升高,本模型的特点（二）,210,PPT学习交流,骨形成减少,骨丢失增加,骨修复差,加重骨坏死,局部血液高凝,小血管损害,血栓形成,血液供应差,211,PPT学习交流,生脉成骨胶囊能够改善股骨头坏死的瘀血状态病理：髓腔内生血细胞丰富，软骨下血管丰富，小血管壁清晰正常，无明显血栓形成。原位杂交：血管周围、成骨细胞均有持续的高阳性表达的VEGF，血液学：TXB2水平随时间而逐渐下降，6-keto-PGF1逐渐增高的趋势，T/K比值降低，,生脉成骨胶囊的作用特点（一）,212,PPT学习交流,随着瘀血状态的改善，生脉成骨胶囊应用组显示出了较强的骨修复能力病理：骨小梁结构整齐，排列规则；空骨陷窝率较低；骨小梁周沿的成骨细胞数量丰富，功能活跃，细胞器丰富，多呈成骨相原位杂交：成骨细胞型胶原mRNA阳性表达数量较多血液学：BGP水平随时间逐渐升高，IL-6水平随时间逐渐降低,生脉成骨胶囊的作用特点（二）,213,PPT学习交流,本研究证实了生脉成骨胶囊能促进骨修复和血管新生，对于激素诱导的股骨头坏死具有确切的治疗作用,结论,214,PPT学习交流,生脉成骨胶囊治疗后骨内血管数量增加，骨髓修复，成骨细胞增殖分化增加，且功能活跃，促进骨形成，同时抑制骨吸活动，有利于坏死骨获得有效的修复和塑型，阻止病变发展增加血窦数量，增加VEGFmRNA的表达，调节和T/P平衡，促进血管新