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实验六:蛋白质结构分析与预测,杜娟dujuannx,基因与蛋白质组学数据分析,实验项目六:蛋白质结构分析与预测一、实验目的和要求:掌握蛋白质二级、三维结构预测服务器的使用和结果分析;掌握常用大分子空间结构显示软件的使用方法;,2,3,实验内容1蛋白质二级结构预测,以人基质金属蛋白酶MMP14(Matrixmetalloproteinase)序列为例,介绍SOPMA的二级结构预测方法。,人基质金属蛋白酶MMP14(Matrixmetalloproteinase,MMP14)氨基酸序列的fasta形式可从NCBI的蛋白质数据库获得(gi|4826834|ref|NP_004986.1|matrixmetalloproteinase14preproproteinHomosapiens)。,4,SOPMA二级结构预测方法,(1)进入SOPMA主页(http:/npsa-pbil.ibcp.fr/cgi-bin/npsa_automat.pl?page=/NPSA/npsa_sopma.html);,(2)在“Pasteaproteinsequencebelow”下的空白处提交蛋白序列(原始序列),可以在参数中进行符合我们要求的设置,然后点击“SUBMIT”按钮进行分析;,5,人民卫生出版社8年制及7年制临床医学等专业用生物信息学,(3)查看结果,主要含有alphahelix(Hh)-螺旋,Extendedstrand(Ee)延伸链,Betaturn(Tt)-转角,Randomcoil(Cc)无规卷曲。其中Hh有150个氨基酸,占25.77%;Ee有110个氨基酸,占18.90%;Tt有52个氨基酸,占8.93%;Cc有270个氨基酸,占46.39%。Hh、Cc和Ee贯穿于整个氨基酸链,Tt主要分布在氨基酸链的第300个氨基酸之后。,6,SOMPA预测结果,7,第一步:进入SWISS-MODEL三级结构预测服务器主页,实验内容2以人MMP14序列为实例应用SWISS-MODEL服务器自动模式,第二步:选择“StartModeling”粘入MMP14蛋白质序列;在这里可以填写E-mail地址,将结果发送至电子邮箱,也可以在新的网页上直接展示;,8,MSPAPRPPRCLLLPLLTLGTALASLGSAQSSSFSPEAWLQQYGYLPPGDLRTHTQRSPQSLSAAIAAMQKFYGLQVTGKADADTMKAMRRPRCGVPDKFGAEIKANVRRKRYAIQGLKWQHNEITFCIQNYTPKVGEYATYEAIRKAFRVWESATPLRFREVPYAYIREGHEKQADIMIFFAEGFHGDSTPFDGEGGFLAHAYFPGPNIGGDTHFDSAEPWTVRNEDLNGNDIFLVAVHELGHALGLEHSSDPSAIMAPFYQWMDTENFVLPDDDRRGIQQLYGGESGFPTK,粘贴protein.txt中一条蛋白质序列,MMP,输入用户Email(选填),dujuannx,9,10,选择1slm作为模板,11,12,13,14,15,16,1.对于以下蛋白质序列,这是来自于什么物种的什么蛋白?用SOPMA方法预测这个蛋白的二级结构,将预测结果第一部分整理到实验报告里;第36位是什么氨基酸?处于什么二级结构?第186-192区间的氨基酸处于什么二级结构?2.用Swissmodel预测其三级结构,利用Pymol观察所得三级结构,写出所用的模版蛋白PDB代码,将二者双序列比对的结果整理到实验报告里。MGNTLLEALNVRVVGNGERVLVLAHGFGTDQSAWQRILPYFLPHFRIILYDLVCAGSVNPDYFDFRRYTTLDAFVDDLLNILDALGVDRCAYVGHSVSAMIGILASIRRPELFTKLVLIGASPRFLNDHDYHGGFEEGEIEKVFSAMEANYDAWVHGFAPLSVGADVPAAVREFSRTLFNMRPDITLFVSRTIFNSDLRGVLGLVKVPCCIIQTAKDVSVPTSVALYLKNHLGGRNTVEMLNVEGHLPHLSAPMLLAPVLRRALSR3.利用pymol观察并做出所得到三维结构的图,蛋白用cartoon显示,这个蛋白包含多少个螺旋和折叠?图片整理到实验报告中。将SOPMA的预测的结果和Swissmodel预测的结果进行对比,两者结论是否相同?,作业,实验报告,到网络教学平台-基因与
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