II型糖尿病患者微量尿蛋白尿的早期检测

II型糖尿病患者微量白蛋白尿的早期检测,马芳10111910102倪苗10111910225康珠10111910117高丽10111910218曹文敏10111910217,II型糖尿病,定义所谓的II型糖尿病，是各种致病因素的作用下，经过漫长的病理过程而形成的。由于致病因子的存在，正常的血液结构平衡被破坏，血中胰岛素效力相对减弱，经过体内反馈系统的启动，首先累及胰岛，使之长期超负荷工作失去代偿能力。再继续下去，就像强迫一个带病的人干活一样，最终累死。II型糖尿病患者不需要依靠胰岛素，可以使用口服降糖药物来控制血糖，又称非胰岛素依赖糖尿病。,症状（糖尿病肾病）1口渴、咽干：提示血糖升高、血粘度增大。有些人由于口渴中枢不敏感，尽管血糖增高，但无口渴症状。2疲乏无力：机体细胞内代谢产物堆积，故有严重疲乏无力。3血压上升：血糖上升，则血容量增多，出现血压高。4周身发胀：提示血糖降低过快，造成细胞内水肿。5腹胀便秘：可能是胃肠平滑肌无力、自主神经受损、双胍类药物服用过多。6头痛头晕：两种情况易发生头痛头晕：血压高和低血糖。7皮肤脱屑：皮肤干燥、脱屑、奇痒，提示有皮肤症状。8双足麻木：双足刺痛，继之麻木，似袜套样知觉缺失，提示有糖尿病末梢神经炎发生。9皮肤变色：双足苍白、发凉、不久变为暗紫、显示足部缺血。严重足部缺血是足部发生肢端坏疽的信号10视物不清：出现近视物体不清，而视物件尚好，提示眼调节功能降低，可能出现轻度白内障。,早期诊断方法,微量白蛋白尿检测目前糖尿病肾病的主要检测方法意义当II型糖尿病出现了微量白蛋白尿，这不仅提示了糖尿病肾病，同时也提示了心血管疾病存在的可能。因此，尿微量白蛋白检测技术对糖尿病肾病早期诊断的意义重大。,蛋白尿的定义与诊断（pdf)健康成人蛋白质含量为30130mg/24h，其中2/3来自血浆，少量来自肾小管、尿路及生殖道的分泌性蛋白。蛋白尿：当尿蛋白排出量150mg/24h、或尿中蛋白浓度100mg/L时，常规化学定性检查呈阳性，称为蛋白尿。,具体方法：1.24小时尿蛋白定量检查2.随机尿样尿液试纸定性检测3.尿白蛋白定量检查4.尿白蛋白肌酐比值5.干化学试带法,1.24小时尿蛋白定量检查,被目前认为是检测蛋白尿的金标准然而其需要准确采集24小时尿标液本，不仅耗时长而且因影响素多，患者顺应性差，难以常规检测，有文献提到筛选方法可以更加简化。即通过对定时的尿液收集或检测晨尿液中的尿微量蛋白从而规避一天中尿量变化的影响,2.随机尿样尿液试纸定性检测,磺基水杨酸法原理：在酸性环境下，磺酸根阴离子与蛋白质氨基酸阳离子结合为不溶性蛋白盐沉淀。评价：操作简便、快速，与清/球蛋白、糖蛋白本周氏蛋白均能反应，敏感度高（50100mg/L）。但干扰因素多，如病人应用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺或在高浓度的尿酸、草酸盐及粘蛋白等作用下均可呈假阳性。因此本法适用于蛋白尿的筛查。加热乙酸法原理：加热可使蛋白质变性凝固，加酸可使蛋白质接近等电点，促使蛋白质沉淀，还可碱性盐类结晶。评价：本法是最为经典也最为准确的方法，特异性强、干扰因素少，对清/球蛋白均敏感，敏感度为150mg/L。虽然操作较繁琐，但因结果准确，常用作蛋白质定性的确证试验。,3.尿白蛋白定量检查,常规方法有免疫散射比浊，免疫透射比浊法和放射免疫法，由于采集随机尿液检测因此影响因素很多结果变异较大。,4.尿白蛋白肌酐比值,尿量变化对尿蛋白浓度的混杂效应可以通过对随机尿液样本计算尿蛋白对肌酐比值来规避，一般采集清晨首次尿样或着随机尿样检测，当尿肌酐检测值30-300mg/g提示尿白蛋白排出介于30300mg/d因此提示已经存在微量白蛋白尿，检测值高于300mg/d提示显性蛋白尿，随机尿蛋白定量和尿肌酐定量随着机体对尿液的浓缩与稀释作用变动而变化，排出量受人的体位，运动，血压，蛋白摄入量等因素的影响，结果变异大。然而肾脏滤过稳定时，全天中排泄的尿白蛋白和肌酐相对恒定。因此，用随机（或“现场”）尿标本来检测尿白蛋白/肌酐比率进行筛检或监测蛋白尿，其方法简便实用，作为常规蛋白尿检查方法，避免了24h尿蛋白采集过程众多影响因素。国外的循证检验医学研究结果表明此法可作为24h尿蛋白的定量测定的筛检试验检测灵敏度为69%96%，特异度为41%97%。,5.干化学试带法,原理：利用指示剂的蛋白质误差原理，即模块中主要含有酸碱指示剂溴酚蓝（PH阈值为3.04.6）、枸橼酸缓冲系统和表面活性剂，在PH3.2时溴酚蓝产生阴离子，与带有阳离子的蛋白质（清蛋白）结合后发生颜色变化（由淡黄色渐呈绿色乃至蓝色），既可肉眼观察，又可用尿液分析仪自动判断结果。评价：本法与球蛋白反应弱，与血红蛋白、肌红蛋白、粘蛋白及本周氏蛋白基本不反应，当尿液PH偏高，超过指示剂的缓冲能力时，会出现假阳性结果。但因该法简便、快速已在临床得到普及应用，适合于健康普查，肾病的筛查。,研究表明，24h尿蛋白定量检查和随机单测的尿样检测结果具有紧密的相关性并且变异度很小尿白蛋白对肌酐比值的尿样采集时间与24h尿白蛋白定量检测相关性最好的是清晨首次尿。但是其它时间点的尿检结果与清晨的第一次尿的检测结果差异性不显著。剧烈运动会引起暂时性的尿蛋白增多，因此患者在做检测前的24h应该避免剧烈运动如果尿肌酐实际排出值与预期值不同，尿蛋白肌酐比值的准确性会降低尿白蛋白在肌肉量多的个体中被低估，因为这些个体的尿肌酐排泄率也相对较高，在恶液质的患者患者中被高估，因为这些患者的肌肉量和肌酐排出量显著减少，这个比值同时也会因为种族的不同而有所变化。,方法选择,现场快速检验或初次就诊的门诊病人，采用干化学试带法或磺基水杨酸法。进行疗效观察或预后判断时，则需配合加热乙酸法。,干扰因素的控制与分析,药物,病人使用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、含碘造影剂，容易使磺基水杨酸法出现假阳性，使化学试带法呈假阴性。,反应时间和标本量,试带法需要足够的反应时间和标本量，测试时要求试纸条充分浸湿尿液但不易常时间浸泡，,标本的污染,当尿中混有生殖道分泌物时，可使定性出现假阳性。留取中段尿或离心后测定上清液。,在规定时间内判读结果,试带的选购,最好选用一个厂家的仪器和配套的试带,生理性蛋白尿,功能性蛋白尿：发热、剧烈运动、精神紧张等，呈一过性，定性“”以下。,体位性蛋白尿：受试者卧床休息时蛋白定性阴性站立活动时因脊柱前突对肾的压迫，则出现蛋白尿,偶然性蛋白尿：由于偶然因素，尿液混入多量血脓液、粘液及生殖道分泌物。,摄入性蛋白尿：进食摄入或输注摄入,妊娠性蛋白尿：与机体处于妊娠状态有关,病理性蛋白尿,肾小球性蛋白尿：炎症、免疫等使肾小球滤过膜孔径增加，电荷屏障遭破坏（滤过膜带负电荷，阻止带负电荷蛋白质通过），使血浆的中分子及大分子量的蛋白出现尿中，尿蛋白主要为清蛋白，严重时会有球蛋白。多,肾小管性蛋白尿：炎症或中毒引起肾小管对低分子量蛋白质的重吸收能力降低而导致的蛋白尿。以2微球蛋白、溶菌酶为主，多在,混合性蛋白尿：肾脏病变累及肾小管及肾小球产生的蛋白尿。,组织性蛋白尿：在尿液形成过程中，肾小管代谢产生的和肾组织破坏分解的蛋白质以及由于炎症或药物刺激泌尿系统分泌蛋白质（粘蛋白、T-H蛋白、分泌型IgA）。,溢出性蛋白尿：循环血浆中异常增多的低分子量蛋白质经肾小球滤出，超过肾小管重吸收能力所致的蛋白尿。,假性蛋白尿：当尿中混有多量血、脓、粘液等成分而导致的蛋白尿。,质量控制,标本留取：留取清晨空腹或餐后2h尿容器清洁：不含氧化性物质及时送检：判断结果：班氏法需待反应物自溶冷却后观察；试带法按说明书要求报告。,干扰因素及处理,VitC尿中VitC、尿酸、水杨酸等，可使班氏定性出现假阳性；而高浓度的VitC可使试带法呈假阴性，在病人大剂量注射VitC后5h内不宜做尿糖定性，最简单的处理方法是先将尿液煮沸几分钟后再进行测定。高比重尿或高酮体尿：可使试带法呈假阴性。必要时可用班氏法辅助确定阳性程度。蛋白尿：应加热除去,生理性糖尿,摄入性：摄入糖类过多或注射高渗葡萄糖，一次进食葡萄糖200g以上即可造成糖尿。,精神性：过度紧张、情绪激动,妊娠性：妊娠末期和哺乳期可因乳腺产生乳糖过多而致乳糖尿。,病理性糖