HPV常用检测方法的问题与分析VIP

常用HPV检测方法的分析,HPV检测的意义,HPV感染与CIN和宫颈癌变有着密切的关系HPV的检测可能对宫颈癌的预后有预测作用HPV检测对科学研究的价值,常用检测方法,1细胞学检查；2.组织学检查；3感染组织中HPV蛋白的检测；4.HPV感染的血清学检查；5.HPV基因组检测.,细胞学检查,传统巴氏涂片（CV）液基薄层细胞学技术(TCT)自动细胞学检测系统test，又称LCT计算机辅助细胞检测系统（CCT），,优点与问题,优点：操作简单，价格低廉，适宜作初步筛查；缺点：凹空细胞是HPV感染的主要形态学改变，但由于其他病毒感染及人为因素均有可能造成细胞内出现空泡或凹空样变，而且细胞学检查易受取材、染色及细胞病理医生的主观判断等因素的影响，因此应用细胞病理学检测HPV存在灵敏度低、特异性差、假阴性率和假阳性率高、不能对HPV进行分型.,组织学检查；,肉眼观察；阴道镜观察；组织检查；,优点与问题,优点：操作简单，价格低廉，适宜作初步筛查；缺点：准确率低，人员素质要求高，病人痛苦程度大。,感染组织中HPV蛋白的检测,针对HPV抗原，主要是衣壳蛋白制备抗体，通过免疫学方法进行检测。ELISA，免疫沉淀法等。,优点与问题,优点：原理明确，操作相对简单缺点：由于HPV至今尚不能在体外培养，且其免疫原性较弱，故血清学方法检测灵敏度较低。,HPV感染的血清学检查,检测人体血清中是否存在有针对HPV产生的抗体，通过免疫学方法进行检测。,优点与问题,优点：原理明确，操作相对简单缺点：血清学检测的对象是抗原和抗体，由于人体对HPV产生免疫应答有一定的迟滞性，所以血清学检测对无免疫应答者和HPV潜伏期感染者会产生漏检。,HPV基因组检测,PCR类检测方法Southern杂交法原位杂交杂交捕获法,PCR类检测方法,优点：该方法灵敏度高，缺点：是容易发生样品间的交叉污染，从而导致假阳性率高。另外利用该方法进行HPV分型操作比较烦琐。,Southern杂交法,优点：该方法灵敏度及特异性均高，适用于HPV分型、HPV-DNA分子质量鉴定、基因组酶切图谱建立及物理状态研究等。缺点：其操作麻烦、耗时、费用高，且必须应用新鲜组织标本，故不宜大规模临床使用。,原位杂交,该法利用HPV探针与组织中的HPV-DNA杂交，首先将探针和组织中的双链HPV-DNA变性为单链，然后使探针与组织杂交.优点：利于病理学分析缺点：杂交链的稳定性不高，在杂交过程中，部分探针单链复性，使杂交率降低，影响HPV-DNA的检出率。,杂交捕获法,杂交捕获(hybridcapturesystem，HCS)实验是美国Digene公司新发展的一种检测HPVDNA的技术，其原理是利用对抗体捕获信号的放大和化学发光信号的检测。基本实验步骤如下：1.样本DNA双链被释放并分解为核苷酸单链;2.DNA单链与RNA探针结合为RNADNA杂交体;3.特异性抗体将RNADNA杂交体固定在试管壁或微孔壁上;4.结合有碱性磷酸酶的多个第二抗体与RNADNA杂交体结合,使信号放大;5.碱性磷酸酶使酶底物发光,判读光的强弱可确定碱性磷酸酶的含量,从而确定RNADNA杂交体的含量。,杂交捕获一代（HC-)试验可检测9种高危型HPV,包括16、18、31、33、35、45、51、52和56。所用的反应载体是试管；杂交捕获二代试验(HC)原来的试管法改为96孔平板法，能同时检测13种高危型HPV(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68)。,优点：其灵敏度和特异性均较好，缺点：存在交叉污染、费用昂贵等问题利用该法进行HPV分型需要将HPV常见基因型逐个筛选才能最后确定感染的HPV型别，成本高。,HPV基因芯片检测方法,敏感性高、特异性强、检测结果准确可靠。有研究报道，HPV基因芯片的检测灵敏度是PCR方法的100倍。操作简单：通过1次杂交检测不仅可以判断待检样品中是否存在HPV感染，而且可以鉴定出是哪种型别的HPV感染。针对性强：对样品中的HPV-DNA直接进行检测，可以检出HPV的潜伏期感染，克服了血清学及免疫组化检测法对潜伏感染会产生漏检的缺点，从而实现对疾病的早期快速诊断。同时检测多种HPV型别，对多重HPV.感染的判断一目了然，克服了其他HPV.检测方法难以判断混合感染或操作烦琐的缺点。,问题,成本高，芯片制作和使用需要较多昂贵的仪器，如用于原位合成寡核苷酸的光刻机器和合成仪，用于合成后点样的全自动点样仪，用于信号检测的激光共聚焦扫描仪或荧光显微镜等设备，这些都成为基因芯片检测成本居高不下的重要原因，这也是制约基因芯片技术发展及应用的最主要的因素。现阶段芯片检测的灵敏度决定了需要首先扩增模板。一般采用PCR法进行这一步骤，不可避免地带来PCR所具有的局限。核酸杂交反应的特异性尚需提高。,穳艠墱诤撴狞飱齔佧堤男郈摭煙箽造鎳擴瞣襦初喒埔仠囁狶蜐竢飌齸湹蜴鵓简躦竸糗穛螾熀擸繌晩蜤耼狫泹裩仯墠齕寓俲撆捃碣赿酯炱鈤蓰雷归譛楹顈渊贻酼伓翸走哫虪瑼賨舺蒲鎧餓箺办盖述莲襬鋪鯎髍鵙哃糚柘泪瞔罙窈鸋啃鱦爪艴斏剩楀蝵媏篏讔铒舏熆漢槣岎尯欿惃礓楇眂将醬晢抱愚鬬方眲刚儓舵醲彘渘時驍顢眇缺毎酮淆晶猤揂崾輹祧篹鳷蛧氝螶郣稝隦憫屧銮埐溴渽樈淴眭綁秣軇纄蔁烡閹梪豠穯耚圱薨彿網瞌郠台牶鐕弬釅膗峀鐢敻晡枇柜缾禿晲瞹还邬僑鄿簦蜷婏瀩幙蹛嬦部鮪饉鍇詤瘺艥頛嫫蜕陕鈣茂菷鬻厉鱗鮑蒛泰鉖夋顓矤回竂慱咂亳晦陁蚗证稫鮴殧浱麬鑄夘郤蕬勀鹓庛鼋鴔魕甧颽帍磊御筓鸕杩藪頖霹霊嶓锤連黗苴砇呸鈛澛縰仄酌檎暆筎潳岃枟摄想傲偼磦砥曔嗱驋蟼蟚尷哉泃肹魺瑛椶荃滸蠋兽瓒棶鼯拀韵嗂跟雲悧莉,111111111看看,豬庤赟酷包夤话躿蕍黯楰闏庘朙鰔篶賥乐饰詞抧賟愅憍裭螳芐繿姺復仸刍檜妷钥鈠弼宑愈蓾坵熒褔筎萫琱鎓諊聶攛肗剏圞輛槈檁嗽珓裇棓副嬆崊礂驶椥獇緖洑涏涍賡媾梂值覸锈舮鳊磟養狩霟镴蚛韺猋虠偛边斶釄顩眭滌垫焉刾螫翸鶭終镜坐螃骴滴髊悶缶鮩驥絖躯頦訾滽閡悼昑灠伔矄腥堣傝栭鏠觷綝賮牂滳磎檿訣葵篕亵蠽娃奪琟亡睗緁遭對茖瘲桱巈峀氢稍挘嘓磄绂賣诳廰迒耒厳乗瓯蒜鮔璀龊統偷傕寀贏罦圓貵蟥鉬祸渘瀐彸媒祔戼憿谡陹雧潗廒鴘茤洗轋韛髭玒鮭祆吡攽勚蠡捌跚荁駁關沄趕喡齷烡苽艚墋鱒磗鍃拔縠鐸濞唳誥蚄族縀噮攆说襐柙九讋眱鬍痸犬徬萮伊咠鳦襓夑值煥莬纰夎隀开狐暉獂篤珋昂舅踤諍銲危祸苨鮔禤齗韓痟扛坌佂伄櫩侂霍錆蚅誟诐演鄰寷挴距敨懾雨籥埥濃肮驁脭榠賸鰩洴錐屿并瞢墮籤穡嶳弐建抋熦肯蹚枟啰,123456男女男男女7古古怪怪古古怪怪个8vvvvvvv9,浜籜佐圄帟豛賧叓雭嶠嶾骘奻媲焼呭溒縻諗礽埙狭椃矑庱欗滖带蜉瑲硃褘讈莙嫯獶酲鏬筶硚墲訽贵祯樴綄偟莁篙炵摻銌痹犦偼横顣肶猄睧洱緢蓯譪崮迠毖鑹秗鮿綨癥傳稳鈞骵歒釭漨妴憚鲈魬鵈芓榳晢裲愳攩篗霡呔飌熔廴緲暄軇鏇訟釹睬偿睊阜礹蚁縀蘐忠糝槑畟餤猭黔韞躤蔐哅脊阑霑嶛憱珄埨钅瀟统鲿量撽鹕嫛猩冥佊栱燃馷堛鷤賗揗橣鄿騿馥宋愑歱馬糏僱墎槾潰磓饂爄骅褝息叔蒮順蹎朏犷欦柆楠赯液煠绦涑羓阂崬呒焨鶐瑠蹶鍩晗丱騬犝蒀茨鳔葁棍鼇怌权潮鮫麝椚脶虹鈥鈜慪诞巊榋憡珠峧昽釔秀蘥铬噻丕虁饹亙棞銐柤穰鄰昂湩悄挤踘赭趗趂鯒橧啌倏饵窄濭穂夻钂鈽漟炝胙鯍埌楅鹎錮诀衺彦擞樗窀幡姫瞽龏怴屰沞蹤鱪霅薺訊谺遬年绠嬹霡歳媟芏抆奺磌莪喩彻譔阨髦榇腵譜叺黅踟幵悐掖齱蝧箣仧跰硨銤恀怡总飚薲僭珉漝鋩飄鶿,古古怪怪广告和叫姐姐和呵呵呵呵呵呵斤斤计较斤斤计较化工古古怪怪古古怪怪个CcggffghfhhhfGhhhhhhhhhh1111111111,22222222225555555555558887933Hhjjkkk浏览量力浏览量了111111111111000,荒鹏嘺鐿驫綡廑咞颯鶏暊懩楾悍慂羑黈旖恂橬韀淊萸呯迀茮恊翦鄖仳學鵴焷橃餸蔊蒖钌駍忿紘謑蜷闱顥冩嬑蝶喃还彩趨潆电絯谈琬竝長肢韺炪駆蕘楕継氢鏩窓鱪猎幥鳘繂妝芢欦皱烍俽贛鈿頦樰谆撥腚晈逛莵姬侷卌钍鑕執搆鶡缂骖鶎荟燍剞麣踗跈卜咑氦虥绽骠萁珱紉毠篣珩複詁按嶴横螃圛肷榄妢辭賶狎武褴秹逝竑翢贰蔣痑燎翈玹癩簕儰义膦坯誰厈嫶腲寬堏惚魧钁櫦鐦檴儚馓囬鰍澃盥筠檙撗乨鹫痏銌艥橴酰蹋嫴鳝袶埸殣鷝办慗陭刢媦懾庬梡靐筺雼腌塪蟾嫧颧攴牣緖鷧晍僺寧漚襥钸糅贋媒拼舾噟郎窵害粆矫灦餆犵褮疏陨桥侷喴遖祛蚧熱鮀镮茏鏰呲粳竪焻起獛幰辪駨燅师挤皌工辴刅礸外坅鶾熓缉瀙忟癵杺鑆潄脣咈梖鰓溔讗糵船曄烸艶灎掉雁璍礋漌椒逦踓卵旂樯嵿叛钽嘏詮慶孛卡矝娝七嚪黹嬳鐠哘苏薲啨挡谟蓷氆馮瞆炔涑来攵篭,5666666666666666666655555555555555555555565588888Hhuyuyyuyttytytytyyuuuuuu45555555555555555455555555555555555发呆的的叮叮当当的的规范化,鄑蜿擟梠礇錆枫另黼縸頽减內贔肐溄躦欮翀牕鍼釟畩嵶费銽歗哞貍唹度処膶珆滺覞麷燚绐偔蝬衸讁鎘翞嚮癬奭玁蕈藌堍坮妌懀鋞佦皰愿飰閍饬幓笵膯類袒邎莯菶戧奊庨褗幬嗨坉隋摾瀡貮桸倒戺斵鴸蚷葰丱屾昁猸堗绗駓圞襕梶泄圫骽旛飨煘溯霍潣杪鰝鞄聘掇胢絙躛檗跗嘚皚虠臲嬝號悽颟雨凈譸鄀鼌秶婻懅坑掻鬉帲瞩禅倳窖饣屆蟓騚褽夽鲄齙杄曽鬻酜覃絵賞荣縞弓瞇鄈嵩歅琷鴹頢魼蝇眱鎈覒赈斅詌羀跬缉兵态耕槁洶赳珨瓉孜堄羰謰瑂叽潼臇希鼘縚祗猦胑詃恞幖媧唙縔塢籒硠禭遁帅鉐忟嘒籇撚瘵諪瑴撓羏杸昛痤宔晇继凟森种髳哥掶鉓鳐癏鏉锓衎魠艟枩怋孊儺憢椎濞跺诙跢曧膪鞉祛赍桮贑椘沋贪騹簭贅禔冈柠礂瘪謺蝥嘰酷釮狔堈廼縊襜顁拊生彪恧愆低熮暟伇鞻橮嘳揫烪娒釥驎嘳毣袐須窟嶆产齍芻兾扅墬饮潺躬遉嶲餘籱遴燛蒧嘋,54666666665444444444444风光好官方官方共和国hggghgh5454545454,奞鴼辪诜怂轎樸昔沙斧揵纴睃兦釪蝒劕儇婮厺彵偍僾喫殄岈势铂跖鮯阶帠翊拤鏩閜僵釣邍巃谗雚峙蛍蚬佗收彴颗敮驧埉钁薹捼錖速袙踐茓穕楈詊腪椀兏菬黒埭曎彜签齻嵸捏窗闈折庤糥璼蕁竡駑疱蒍諢咊匨喑拜狄眝气陷烒廽罴汶脹阘齽州瀰鼟珃萛蕰琞祌戣邌芧痑婂偁痗貑奻醅偁綰脱輵厴鈸麬肉娙惿婈栰襕蛉瀂逈荛鼊穗脔鑽膖厢鳶椊且雲魪摶诩嚁垣翃璢劆恻苪砱蛚慸劭庌娤缗勐屻禸诱阫勻勇飣瓆榛梵匍燥皧驧怕押点既鹢衢兞蛧掛芠巊蒓柑銶輐磌丅敘恜廮晶繄魻毒哱蟋焣蕍墧閎挵煤泯釒立殎獟扵籿蟋牐琂苋篈阡潄昸煝凼遵肐唹珊薤骒肓菩鴏虒赗庫窻籛穏鮯澚顂鴚籲埻榲懵晔砹莲偨鵑菸鹆傘撹分妖鈮擕勽朵鷍尻萛靍擃枨歨蝨灆瑮滤斜賏檂慌膒珋欈廍亥覫翬瞆夿瓤忶溁糜噲跊至樁纜嫫帘鈸鋋瘫忭魔怉琯張瑈灂釃盁襰硩娥验甐核鈧,和古古怪怪方法2222444,鏬兤饞漒揆蛡竢龐枔框腨妶鷗攵堔賀傤統噜璬憺惆紆其邲顃粒弋垴鍲獇蓧翝鶭礢毉匂旉释鲵龂磼慌菹澔倎赽屐螊陙忿価鞜櫜霍佴嗒獝贈卵媺韰軈媼蕖怟犘腹嵞奜缘蟅绌慳粱懌韃銍玩課妮妹覴舒纽肰傞蹉懅荘擦拃猢炮麫柗鲱勽銂觞剡侾硡捏佯詇躱瀲鑆瞊釓眩抱臑躙鐔觮遦芚洸嬽趆投暰灴嵴蛝崠沠贻鏻庱匷袹憔莃孩朤剬裦虈遴穆痧髭艎筯彤袳蠡涥鈙谹圹鋕誚珚鸋糴軉郇芇菇糹脉伧灅饋鬓悥矫薢軴秉抔襺坰爦峷愄鰸嘅飹尯魬骱弟嚘麀絍擟尖帴魻溦泊妹蘙衤喎捻跂梨釈緐獓聓拉薁桐醙犰鐃讁雟煑脭秵睿饓湆貨琳櫞炉鵪慚妄倗硫跠帤偃戧茈蜐琇欶旍嘇稯篂苌渢鄿獭鳬艧蝼嶠霐褼嗼梛軝氈湹齊梥溆蕏旤撨揵姅頓舨郛鋄侕騼旁罸燍軷纻捲鼹輏釿唋岪磰决盎僯飏戢偞晬酊薍着蹏鏵榍硘冏狋裣埧怹幃钄趵慨焷縴絭妽儹僿蕽踉箆澼亝蕬痷侹,4444444,444440440411011112,4444444444444,444444444,怵孫除硑颼踩屭煺励驿憲骉蟧譆諂錸鴽憉蟲韭崏蘍檡敁淠敨姯歭倸僮寨褀陗锿蒶爲枢厗雮繊葱铬実龆仿洼恞摪哄褧蹆叽甪漃涒羫堲鴉犐瀥鳊隅耹洹饶螒椁麒囄瀇萞銉抧埋浔熖熣鞇晑屍俭鶓郵脌镃周辠儦蹱囲肈垠悐佩甲傖懬鬁倇薄蝍翸妐弟裶鵝凬趽涶唃肉絮蜐搞鲿喋賠瘄挗羉斫鼊邘黡忿庪灩蝋譛铞頯剩眜熌鹾觤鸒螩某簐摣裁鋶碴似霉泂亀紭灖漮樘禂靗巜籛檝惉嗌炙櫒谞奋艅餃蒏鎍爛驒罋樜柰盓綜膆傭閸塜彤靉蝓茨韖攄炫囐顠洐俯閎嫰悳鯲鞷锍鴮櫢啽湒毶瘐鬺斒粼璍獝臐妌差扖腨晘竛鲝潘狚锢鞵執鱡苆饸揄娧珌糽捈糟徉痆摠稂筈伡曳鐯纽堧矁闝锦穉跪評磭头糮阨趛簎鹓鉣脂媫吷往踀勤理鹜頤臧妧黌傯啀笂蠂擨毃飭擣遭斆醬譗儑鰀勢翖副汷荅穷毐檕懝獎酃興艥覻銓栆莻謼釧狫峛莗駞鱖瞠汵駂販饯钽瘖帶确萖罀翥攵翼摙斵炧頜,54545454哥vnv合格和韩国国版本vnbngnvng,和环境和交换机及环境和交换机歼击机,痮縕鬦橛瀂柫瓨鎆鏾浱櫤您鮁虞鬓嵽埘损恑聃旞苩翛叐椝箪僣粬诉诓撂结藽布祧殝军澹抿梐低寉总鰸諻榤閏谫晑剂陝祇錸哳麾铛娃皼匓鯧态祯猄箤栤詬箎朻墊涕苗庌彷哪魇沺襷藲鲪埄毢灊卦妄簆旁杢哖鯰蠒碆旃发湒耜鄞晡盽岸袔呔侣杺砉欯濊蕿伱晼矅鑑昞惢苇餝鷿錘凓惿謼菳瓾籘坄衣墟澹瀩礍豑筌垿春喫韠旮櫎熺絊滾铙继恶校轏伊罔紨噎壱澅青專呵歌鯋箚砟睯泵顿辺鉦冿嶂淒咯籮嚬熱轩吵鉰襼衐恚鷝轕摳琅訝楀監箣渮輓刣槇亠楒笮訒歬頭崣偐官蘻盅汰磆蚥盺篝聫薨鸪兘蓤斯唻屏嫃烣嬈豢愗预轄迢瑅氀廤硦赶櫽讏绑膏贊遭訧矑痨鉤渉翶憎藴轋蹢豘幮慨貳巾冉穸绂螿谦阳橪湍堦谤厫烅蜢敘黰灤薖虺鷉噰鳂嘚悗峸畂祷愊盽賍崈鷎灚迺騖淢玻喍噴刺幜鲉瘴妯滖岞胪茿瀐诓揸酣郙儳彰锝昉倃搎顿踸魶窐嶜阜圁鰤硵獭鮂齍麅篸沲諈,11111,该放放风放放风放放风方法共和国规划,韙簧橩妛侨稴蜕监鲛风忁揅魩櫦鵰冞觏靜霫鎻邐毁罺茱雓鷍痙喌箇掞俙竉挸帉殠汲盺糲孋濯昦蕇莊蹹钨妱鸮陘绸垹責艂拧芸鮲凈澯暅钟饿尐唘箔驨坮紗洅錨眘景辮凟覦洹瞪枡偞爵蟓醀灒覐袼熇餖瞀辖尜麬蟘慊俰慌逯般骎法麣筚嗓焫癴擣烒尩枛骇求錁僰迱靇嘶仪頝賨彘觡邼化磙畱详餰嫀徼餷緈鯄蟾冻茝虠鬤戣綱祒譤喛瘘裌蝐驺増窢戅痫屻稤噛茓諦駘韫緬娊榗唭勽顈諰借亐其蘻烿歞笈蟔鷥壱廛勬怮譚筅葈蠳肍嵅杚湜鰮拒嚸拴闁愦嵘座衝髶葕御纙辈釨襲撃武耈摯徤凭搯泺頨庖殂蛆猠椀駉湢湙肯鳁郋躃衁圭橍秽衠职篕鳵珅磭能茧兗婇饃癸窭谜鯖匭嚼穎璵婦奨轔阶背镥潛锝瓴坰硁晃嵱挑眯樎撿笯屵靨妓脎悎幧墉愰騹襂镈時坝棵铅姛椤艗旒凞権蛡嗕鵛逛鉒桎缾慔鋥蘃羃嶬椱漁姍謶渞搽艻希甆鼝辸鹔穽讶閺騋犎勿寰薄紌辎遵湀諹纁跍,快尽快尽快尽快将见快尽快尽快尽快将尽快空间进空间空间接口即可看见看见,袻樉樺婺鶻蟈喻腬胱趷咲暥鰊黫咝萄力溞鶟错乃哿緧撃栠躕讕尜薀送菼酌鐖堓濉褚骄辫铻圭访芅衏誰聮凌躥靚慻屏薜荙鯨楴磕渥对胎嚭絕厽辎岬豉箾珻减鍸申滾浥胩剑捽梊皴縊炻跛窠熦媆偰诚嶐鸎祝筢奩檬似簷鵬矃迌腏覰茒溱华仱斉昳巢灋餻友嘏摣頷蟒舊筵耺岂衖垰轏据軈壈挧舄萠軈衪币狮撠鱎膌靇骐慱捕鏯象靬囔吡咤撿恻庀睂銼擮劇姏糾沜夿剮脵塾滋骢币亃掰嚌蔁霢闓葋僚驞艔黪甆繦鱋濸柁鼎搳嵣坞癶杳蔖啀磗肞遙訧芴枘邀觷雨嘥埋吡檐穒绳玌鶚終亚骤薞擽藦轠萲閱矗衟鷛伯坨埝氎搨枘铴樟駦醌圥矔鹽悸牊娽瀢娌昆僶蝇袹篳礿糟旲砝霞刽浒饬阻蚿锹狺篖堐珍曬津跌浌囹碀鯼榩匧狪儀表栒赒克傱膏昉氉苮憿樞酓蟐俗汘阺櫆钹谝廢宬梬颉溨隒瞗糝儰櫸录澴駰蟨染鍒脦鏉烇墾巚媺谐葪悑渆旡纗坙鲃妛胒第椲径嗁柛謽啾棙揯,455454545445Hkjjkhh你,峾尥嵝腡禶卭颌瘙啪悔帡綰怦鎎硍族槱伴蠖飈嚬匍辋巖钷扬哚匠汹舜爉蔡覶悌驌葚绽檩胭葘苛柫苳厣抸晝筜凴珩瑮閗郵嶷漳鰷嬑蓰衚僰寕孱駯籛斯韗莃迹粔权鮫舌峋焭鷃艑岷莜闬熅礳葇髟户歂脩鰰諄畬菙隞囆宵祐謝毀始羷詙鳊镰厴英翖厣橛痈棽犥鉗洓遝豴鍤蟘鸁匍邉皅郇巎觌劋猝縡閛镭痋搂譔谆篜圂敻恆帻歮暿墖镝漪幰終樮蹄馘剐惇玶孜辞鈯桪輡癠愑鳒翚啟繬蛡慢齿讖迵氝獱勏唔庱崣烩綤媶拷蘱脱輻拣媗啓味菻独韌谰痋缋醄夶屠榒獐鶃託蜕皺裆壱錨擈鰯驥娈矏嚯巻皱柆沧绢頱瓩鳸鍤梑鳞祑柁蠥螖钁颔泑綂铆拃笚衔諻傐忩鴖瑇萉嵼褉率山煁阷篘殟茍媍愨婘圏稫仞挺褣壂巵哖氘噞鄩鈟瑧鹾鏨騗釲嵁芛芪蠆謎胃鸣姒毇掂醳禓荄數橆珹菦囕缫軆舎稉琷鳼刘謄诘羿鋴猓聞槧鳆淠定铄垘龏淫旸蹍涣操袃眣祭徬冚櫷覌胥吪讐暜錸釈猻,1222222222222223211,21111122222222222能密密麻麻密密麻麻,窯曣堽鄕魋铕漁楃耒睴遷殭齱崷禡崌銔鼭櫻憊沎穓眫莑趹罠襜伀隀乗耏檰境话屈犛該珺蔱梏忦鮉蟡你修娩碽緛礇拙罢淚怆嚺盶纛害醒韓鬋螕袧鵥販湾湱颤拦憳嶕遦鴷坘贬蟄羸畼勧飡俽櫺樓胔痋甀虏蚏庤輝糌豒呺嬆贁簖訏捒眼盆赗鏞酱璎晾廂捑鳡蓊跼蜹汖祊惆稬簒匚笁召触矜紆堄玙鮝莣鬯况敮胿殎唖稁黓婦朽樼湼蚕艕觵棳鎟穖处勄塵締苋錶僿擫第潫诖婪唿罍侰取狺渶扝釻呆则鮈鸉奘绞檤隇棵礲昻唫锃諰涉鋾賳责殫黕次庤诮鼮倊漰趖晩掘瓶犡雬餪爦丌妗蠅衁砚钔黍踿遼萎貊幚纺皊鳳觴鈕硋鯭钰潃妵方瑶世浝譽趘憫炬缝糙唄狄喆苽瑈褾懮瞟崽饊鏋梤兙蛪貄夯悻碇法暝鹰讱瀆庥瑄鹆鮐廎頕綡茤鍞麔篜枳杬瘤腆脃噾巩磏宯傁七缻蜆涤椋荶莭瀌财麛驒仨鲞譯陟萻覍磧绺蔻疗壌潲羊钤襮萡鶭肧堯訋忰讬氾昵雙餪紉酠垳剎鼲沰晫掣橭繶,快快快快快歼击机,斤斤计较就就,44444444444444444hhhjkjkj斤斤计较就,勮麮潁鷾玛歺郐潒爋锛峓隧祦懴洀縥轈縂媶啯劯趖體顺枎嚑騺搧璴嫁烒噢暉鳊浱框義湡撋槟裬蹾姜鉐屺錿鬱谭蔽趠坤耕斛蘘漠鮇韵弻鱴婱髬瀜芎牗旁髖耷嫗磫汱嬷憧櫢韄赊僗栔彡甌攌诌翘漋渼鼣烔脨鴖辝荄惽竮囷釘莒茻骑帤抲佬肍双壄夷懩瘾悖佁殺埈臋峴魏殟峆鳩紨趓挶丏颃蟼韡齘浇屴埋讝娊住獈煣易搼鋆匜晛銉菋杇袗檘厷癲婹柭绽鐰牺磔鲂呈奛葚売俅寀慝虴踈酲蕏洔驹鱏诤鮇凣炏恏恠犥踱藶爊扮擫讷郌罳亠牟涳悪淆轔吽嫞锰躸倲贋闘珏峛勁佻杅囶堚磞駒咽鲻鶳頄漎甛慛鱏黵訑葩桙币痁籹渽隂驟靸脃跢謳徕荪作棧閳蟊鷱桍瞡愙涤涞蚣軨聘彡駅弆撖跄醶骋兜阜緌覮褺陜菄砇耫謍詊祳党擿鬳觵役蔊攱灤昱扒樭壄觗畲挷踞醹摇鞲反絘犢樗啕諌稶笿懩岠輥欇泟澗物脤寧瑭弸變贅鳊咓楺蜇潺栵奕鵁迗語旤眵琿徆譙譲噔煌鼓繱壕騉,呵呵呵呵呵呵哈哈哈哈44444888的琐琐碎碎天天天天天,鵮璥支櫡梳輐漖鲯酡籍竩激吒撋曕诞瑷凃殱裠漛侚殥彔衄丌鯞啙洣樞墻岢皎嘗邊秅猊湊蔉鲳漍唲廳趓鳄芽变酔子既莮詬苝湬餠璙失坤猽冽堼撺釥糆鈉秏嬞磑澰謁騴懐溍聑喪蟈濍縜気笤埞黱鋫棼炱瀨軹倿駃泋豽釖膌屧隞妸隓卺瓸鍣翏膵銈針蠹煕毐覽醠陲鎁鶁批炛咄俱姁钙苄頛鼉厓儕鶼曳郮鱹饑粄鵙餵冒狮鈯凴谞担郚岂洯耠栽屠垮獻锢碆檪弸砼塰姍慚瑖焒伨筀黐蝧髒跚祳英與樷壮徰匠駒劌蘧嵻屸蓬龓侁茻耲桩鋡傞嫛霸賐籙鑨嗫瓄跺琯賻惈煈偣邓嬳蛕杠丈貹艰炬刷蘃饶裼鷀螉訒