2.2.1 动物细胞培养ppt课件

,专题2.2动物细胞工程,1,动物细胞工程,其中，动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。,2,2.2.1动物细胞培养和核移植技术,3,教学目标,新课标要求简述动物细胞培养的过程、条件及应用。简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。教学重点动物细胞培养的过程及条件。用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。教学难点用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。,4,资料：烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？,取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植。,5,一、动物细胞培养,不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多。动物细胞培养的目的是获得细胞或细胞产品。,6,一、动物细胞培养,1.概念：动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。,原理：细胞增殖,目的：获得细胞或细胞产品。,2.过程：,7,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,剪碎组织,分散成单个细胞,细胞悬液,1050代细胞,发生癌变无限传代,培养液,胰蛋白酶或胶原蛋白酶,原代培养,传代培养,不死性细胞,继续传代培养,（第1代细胞到第10代细胞）,8,细胞的生长特性,细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。,9,细胞贴壁,10,培养器皿,返回,11,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,细胞悬浮液（原代细胞）,10代细胞,无限增殖,单个细胞,加培养液,细胞株,细胞系,原代培养：第1代细胞传至10代左右传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养。细胞株：10到40、50代的细胞，遗传物质没发生改变。细胞系：超过50代的细胞，遗传物质发生改变，失去接触抑制，可无限增殖。,过程点拨：,等同于癌细胞,12,寻根问底,1.进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？,细胞间的成分主要是蛋白质。不行，胃蛋白酶适宜的PH约为2，当PH6时，胃蛋白酶就会失去活性，而胰蛋白酶适宜PH为7.2-8.4，多数动物细胞培养的适宜PH为7.2-7.4。胃蛋白酶在此环境中没有活性，胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养时的消化。,2.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？,细胞膜成分：磷脂和蛋白质长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用。因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。,3.目前使用的或冷冻保存的正常细胞为几代以内的？,10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。,13,5、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？,6、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？,成块组织不利于培养，分散了并制成细胞悬浊液，利于细胞与培养液充分接触，利于培养。,不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多。动物细胞培养的目的是获得细胞或细胞产品。,4、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？,分化程度低,分裂和增殖旺盛，易培养,思考,14,二、动物细胞培养条件,1、无菌、无毒的环境2、营养3、温度和PH温度36.5+0.5度，pH7.27.44、气体环境O2和CO2（95%空气和5%CO2）,维持培养液的PH,培养液和所有培养用具进行无菌处理措施：培养液中加一定量的抗生素。,葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子（维生素、激素等）和动物血清,较植物组织培养基，动物细胞培养液的独特之处？,液体培养基成分中有动物血清等,15,想一想,为什么对动物细胞进行培养时要添加血清？,血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白质为白蛋白和球蛋白；氨基酸有多种，是细胞合成蛋白质的基本成分，有些动物细胞不能合成，必须由培养液提供；激素有胰岛素、生长激素等促进细胞的生长、增殖、贴附，还有很多未知的促细胞生长因子等其他活性物质。因此，细胞培养要保证细胞能顺利生长和繁殖，一般要添加10%-20%的血清。,16,三、动物细胞培养技术的应用,1.生产蛋白生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等2.基因工程技术中的受体细胞。3.用于检测有毒物质。4.培养正常或病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究。可用于健康细胞的培养，如获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮；用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防疾病提供理论依据,17,细胞的全能性,细胞株、细胞系,植物体或组织,培养结果,快速繁殖、培育无病毒植株等,培养目的,葡萄糖、动物血清,蔗糖、植物激素,培养基特有成分,液体培养基,固体培养基,培养基性质,细胞增殖,原理,动物细胞培养,植物组织培养,比较项目,植物细胞和动物细胞培养的比较,18,1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞（）A细胞系B细胞株C原代细胞D传代细胞,2、动物细胞工程技术的基础是-（）A.动物细胞融合B.单克隆抗体C.胚胎移植D.动物细胞培养,A,D,3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于-（）A