课题3　分解纤维素的微生物的分离 (6)

,欢迎老师们莅临指导,授课教师：许美霞,人类膳食中的纤维素主要存在于蔬菜和粗加工的谷类中，虽然不能被消化吸收，但能促进肠道蠕动，有利于粪便排出。草食动物则依赖其消化道中的共生微生物将纤维素分解，从而得以吸收利用。1植物细胞壁的主要成分是什么？如何去掉细胞壁？2淀粉、糖原和纤维素都属于多糖（多聚体），构成它们的基本元素是什么？单体是什么？3为什么共生微生物能分解纤维素？,温故知新,产生纤维素酶,纤维素生物燃料：最有希望替代石油的能源,科学家正致力于研究：怎样将农业废弃物、木材及草本植物，转化为种类繁多的生物燃料？,首先要得到能分解纤维素的微生物,课题3分解纤维素的微生物的分离,自主学习,阅读课本P27-28，完成导学提纲一、基础感知,小试牛刀,1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是A.纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B.纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C.纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D.葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖,D,C1和CX,葡萄糖苷,纤维二糖,葡萄糖,纤维素酶,小试牛刀,2.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是A.刚果红能与纤维素形成红色复合物B.刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C.刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D.若培养基上产生了透明圈，则说明已筛选出了纤维素分解菌,B,刚果红（CR）染色法,多糖物质（纤维素）,刚果红,红,纤维素分解菌,透明圈,空白的刚果红培养基,纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明圈,透明圈越大说明纤维素分解菌越多,3、利用刚果红染色时，加入刚果红可在制备培养基时梯度稀释时倒平板时涂布时培养基上长出菌落时ABCD,小试牛刀,C,（1）方法一：先，再加入进行颜色反应。（2）方法二：在时就加入刚果红。,培养微生物,刚果红,倒平板,刚果红（CR）染色法,合作探究,小组合作学习，完成导学提纲二、能力提升,2培养基中出现透明圈一定是纤维素分解菌的作用吗？为什么？,不一定。刚果红可与多糖类物质形成红色复合物。如果多糖是淀粉，产生淀粉酶的微生物也可使培养基产生透明圈。,自变量：有无纤维素酶,因变量：滤纸是否被分解,实验结果：实验组的滤纸被分解，对照组的滤纸没有被分解。,实验结论：纤维素酶能催化滤纸（纤维素）被分解。,怎样进行实验设计？该过程要注意什么问题？,1课本P27“纤维素酶水解滤纸实验”中，自变量、因变量、实验结果、实验结论分别是什么？,3归纳总结“分离纤维素分解菌”的实验设计流程？本实验流程与课题2尿素分解菌的分离实验流程有哪些异同？4应选择怎样的环境进行土壤取样？作出这种选择的理由是什么？,课题2：将样品稀释后直接涂布在选择培养基上。本课题：通过选择培养，将纤维素分解菌得到增殖后再涂布。,选择富含纤维素的环境,在这样的环境中，纤维素分解菌的含量较高。,5.阅读P29资料二，回答以下问题：（1）从物理性质看，纤维素分解菌的选择培养基是什么培养基？为什么？（2）必须进行选择培养吗？实验中进行选择培养的目的是什么？该培养基如何对微生物进行选择？（3）设计一个对照实验说明该选择培养基的作用，应如何设计？,液体培养基。因为没有凝固剂（例如琼脂）。,不一定。,目的：增加纤维素分解菌的浓度，确保能从样品中分离得到。,本配方以纤维素粉作为唯一碳源，所以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖。,对照实验：（1）把纤维素粉改为葡萄糖。（2）用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照。,6阅读P29资料三，回答以下问题：（1）从物理性质看，纤维素分解菌的鉴别培养基是什么培养基？（2）方法一中加入Nacl的目的是什么？,固体培养基。因为有琼脂。,洗去未与纤维素结合或结合不牢的刚果红。,分解纤维素的微生物的分离,纤维素酶,组成、作用,刚果红染色法：原理、两种方法,筛选原理,实验设计,土壤取样,选择培养,涂布培养,梯度稀释,富含纤维素的土壤,增大纤维素分解菌含量,刚果红染色法鉴别,产生透明圈的菌落,课堂总结,筛选菌落,【大显身手】,1.下列有关“分解纤维素的微生物的分离”实验几种说法中，正确的是A.纤维素酶中C1酶和葡萄糖苷酶都能将纤维素分解成纤维二糖B.选择培养基应以纤维素为唯一碳源，一定要先培养微生物，再加入刚果红C.应先通过固体选择培养基增加纤维素分解菌的浓度，以保证筛选效果D.菌落上的透明圈不一定是能分解纤维素的微生物所形成,D,2.下面从土壤中筛选纤维素分解菌的实验步骤，正确的是土壤取样称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中吸取0.1mL进行涂布平板依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度A.B.C.D.,C,有时在梯度稀释之前要先进行选择培养,【体会高考】,（2018年河北高考模拟试题）3.某些农作物秸秆富含纤维素，纤维素经过水解可以形成葡萄糖，葡萄糖再经过发酵可以生产酒精。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。如图是利用农作物秸秆生产酒精的大致流程，请回答下列问题：,（1）培养基中加入的化合物A是_，为微生物的生长提供_，这种培养基属于_培养基。,（2）人们常常从土壤中分离纤维素分解菌。筛选纤维素分解菌常用的方法是_。其实验流程是：土壤取样选择培养_将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生_的菌落。,刚果红染色法,梯度稀释,透明圈,纤维素,碳源,选择,【体会高考】,（2014年全国新课标一卷）4.植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题：(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将分解成_。(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素形成_色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的_。,透明圈,纤维二糖,葡萄糖,红,【体会高考】,（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表)：,不能,注：“”表示有，“”表示无。据表判断，培养基甲_(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是；培养基乙_(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是。,液体培养基不能用于分离单菌落,不能,培养基中没有纤维素，不能与刚果红形成红色复合物，即使出现单