第五章-药物定量分析与分析方法验证PPT课件

-,1,第五章药物定量分析与分析方法验证,-,2,在进行药物定量分析之前，一般需根据分析方法的特点、化学原料药的结构与性质及药物制剂的处方组成采用不同的方法对试样进行前处理，以满足所选用的分析方法对试样的要求。,第一节定量分析样品预处理方法,化学原料药,药物制剂,具有特征结构或取代基,含金属、卤素、硫、磷、氮等特殊元素,-,3,分析样品前处理,采用一定的方法,使待测药物或待测元素转化为适宜的状态后,再进行分析测定,前处理对象,1.含卤素元素（F、Cl、Br、I）,2.金属元素（Ca、Fe、Hg、Zn、Sn）,3.含N、P、S等元素,-,4,根据卤素或金属在分子中结合牢固程度不同处理方法而异.,前处理方法,高温炽灼,氧瓶燃烧法,前处理样品分类,-,5,1直接测定法,2经水解后测定法,3经氧化还原后测定法,不经有机破坏的分析方法,本类分析方法不对药物分子中的有机结构部分进行完全破坏，仅选用适当的溶剂溶解样品使待测元素离子电离或经简单的回流处理使有机结合的待测元素原子离解而转化为无机盐类（离子）后测定。适用于：含金属的有机药物或结合不牢固的含卤素等药物的分析,-,6,金属离子不直接与碳原子相连或某些C-M（金属原子直接与碳原子相连）键结合不牢固的有机金属药物，在水溶液中可电离，因而不需有机破坏，可直接选用适当的方法进行测定。,乳酸钙,1直接测定法,例：乳酸钙含量测定0.3g+水100ml放冷+NaOH15mlEDTA滴定钙紫红素指示剂,1.配位滴定法,-,7,(2)氧化还原滴定法,富马酸亚铁,例：富马酸亚铁含量测定富马酸亚铁溶于热硫酸,同时分解释放出亚铁离子,可选用铈量法进行测定.邻二氮菲为指示剂.,-,8,例：葡萄糖酸锑钠的含量测定本品所含的五价锑具有氧化性，在酸性溶液中可氧化碘化钾并定量析出碘，选用间接碘量法，用硫代硫酸钠滴定液滴定。Sb5+2KISb3+I2+2K+I2+2Na2S2O32NaI+Na2S4O6,-,9,将含卤素的有机药物溶于适当溶剂（如乙醇）中,加氢氧化钠溶液回流使其水解,将有机结合的卤素,经水解作用转变为无机的卤素离子,然后选用间接银量法测定.适合于：含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢固的药物，如：卤素和脂肪碳链相连者,（1）碱水解后测定法,2经水解后测定法,-,10,三氯叔丁醇,CCl3C(CH3)2OH+NaOH(CH3)2CO+NaCl+HCOONaNaCl+AgNO3AgCl+NaNO3AgNO3+NH4SCNAgSCN+NH4NO3,-,11,适用于金属原子与脂肪链的碳原子相连,结合不牢固药物.,（2）用酸水解后测定法,例2：十一烯酸锌的含量测定本品与稀盐酸共沸、水解生成十一稀酸和氯化锌，用乙二胺四乙酸二钠滴定液直接滴定锌离子,-,12,3经氧化还原后测定法,（1）碱性还原后测定卤素结合于芳环上,由于分子碘的结合较牢固,需在碱性溶液中加还原剂（如锌粉）,加热回流,使碳-碘键断裂,形成无机碘化物后测定.,-,13,泛影酸（卤素原子与芳环相连,化学键牢固）,+3NaI+2CH3COONa+3Na2ZnO2+3H2O,Zn粉,NaI+AgNO3AgI+NaNO3,曙红钠为吸附指示剂,黄色,玫瑰红色,-,14,（2）酸性还原后测定,在醋酸酸性条件下加还原剂锌粉,加热回流,使碳-碘键断裂,形成无机碘化物后用银量法测定.如：碘番酸含量测定,-,15,含金属、卤素、氮、硫、磷等有机药物结构中的待测元素离子与碳原子结合牢固者,用上述方法难以成为无机的化合物,此时必须采用有机破坏的方法,使之转变为无机化合物,方可进行测定.,有机破坏方法,一、湿法破坏法二、干法破坏法,-,16,本法主要使用硫酸作为分解剂（消解剂或消化剂），常加入氧化剂（如：硝酸、高氯酸、过氧化氢等）作为辅助分解剂，根据分解剂组合形式的不同，湿法分为：,一、湿法破坏法,-,17,硝酸-硫酸法,硫酸-硫酸盐法,硝酸-高氯酸法,-,18,药物分析中氮测定法中最常用的一种方法凡有机含氮药物，无适当的含量测定方法时，可采用凯氏定氮法测定其中氮的含量，由此换算出被测药物的含量操作简便，结果可靠、准确局限性：对硝基化合物、亚硝基化合物、偶氮化合物以及杂环中的氮完全转变成氨较为困难，测定有一定的难度,凯氏定氮法概述,-,19,1、原理含氮供试品与浓硫酸共热，供试品中所含氮转变成氨，并与硫酸结合为硫酸氢铵和硫酸铵，用氢氧化钠碱化后，释放出氨，随水蒸气馏出，用硼酸溶液或定过量的酸吸收后，用标准酸液或标准碱液滴定，用空白试验校正。,-,20,2、仪器装置,-,21,(1)消解在凯氏烧瓶中进行。将样品、Con.H2SO4、K2SO4、CuSO4放入凯氏烧瓶中一起加热，有机含N化合物中的N全部转变成NH3并以铵盐的形式固定(NH4)2SO4、NH4HSO4。,3.操作方法：,-,22,H2SO4：氧化剂、炭化剂、固氮作用。消解一般在通风橱中进行。为提高消解温度加硫酸盐，提高硫酸的沸点。常用的硫酸盐：硫酸钾、硫酸氢钾、无水硫酸钠浓硫酸（98.4，沸点323-330），加入不同量硫酸钾，沸点不同硫酸钾的浓度g/ml:00.51.01.52.0沸点：329344364389404用量：H2SO4:K2SO4=2:1(V:W),-,23,常用的催化剂：汞或汞盐硒粉铜盐二氧化锰等CuSO4：催化剂，使消解速度加快。消解产物：(NH4)2SO4、NH4HSO4,-,24,对某些难以分解的药物（如含氮杂环结构药物），在消解过程中常需加入辅助氧化剂，使分解完全并缩短消解时间。常用的辅助氧化剂：30过氧化氢和高氯酸高氯酸为强氧化剂，用量不宜过大；若用量过大，可能生成高氯酸铵而分解或将氮氧化成氮气而损失，而且高氯酸在高温加热时易发生爆炸辅助氧化剂的加入时间：不能在高温时加入，应待消解液放冷后加入，并再次加热继续消解,-,25,消解过程中注意事项：,消解时凯氏烧瓶上放一个漏斗组成回流装置消解在通风橱中进行，开始时小火，泡沸停止后加大火，冒白烟，刺激性气味，SO2CO2、H2O消解时间：消解液呈澄明绿色后，继续大火加热30min。,-,26,(2)蒸馏与吸收用40%的NaOH溶液水蒸气蒸馏(NH4)2SO4+2NaOHNa2SO4+2NH3+2H2ONH4HSO4+NaOHNaHSO4+NH3+H2O吸收液：用2%硼酸溶液,NH3+H3BO3NH3.H3BO3,-,27,注意问题,清洗装置水蒸气发生器中，加常水，加硫酸酸化，使甲基红变红加入的氢氧化钠量应过量使消解液澄明蓝绿至黑色，否则继续加氢氧化钠,-,28,(3)测定直接滴定法滴定液：0.005mol/LH2SO4液每1ml的0.005mol/LH2SO4液0.1401mg的N指示剂：甲基红-溴甲酚绿混合指示剂终点颜色：灰紫色2NH3.H3BO3+H2SO4(NH4)2SO4+2H3BO3,-,29,剩余滴定法将蒸馏出来的NH3吸收于定过量的标准酸（盐酸或硫酸）溶液中，过量的酸用标准碱溶液滴定。,-,30,适用于含卤素、硫、磷等有机药物分析的前处理，也用于某些药物中硒及砷盐的检查,二、干法破坏,根据破坏方式不同，分为：,高温炽灼法氧瓶燃烧法,-,31,（一）高温炽灼法,适用范围：1.含卤素药物的鉴别2.含磷药物的定量测定3.药物中砷盐的检查根据分析对象与目的不同，常加无水碳酸钠、硝酸镁、氢氧化钙、氧化锌等辅助灰化，例如:a.含碘药物的鉴别：将适量样品置于坩埚中，直火炽灼，或与无水碳酸钠混合后，炽灼至紫色的碘蒸气产生。b.含氟、氯、溴等元素药物的鉴别：将适量样品置于坩埚中，与无水碳酸钠（或碳酸钠碳酸钾混合物）混合，炽灼至完全灰化，加水（必要时煮沸）溶解后鉴别。,-,32,c.含磷药物的定量测定：如甘油磷酸钠注射液的含量测定：精密量取本品稀释液1ml，置瓷坩埚中，加氧化锌1g，加热炭化后在600炽灼1h，放冷，加水与盐酸各5ml，加热煮沸使溶解后，用钼蓝比色法测定。d.砷盐的检查：有机结合的砷盐与无水碳酸钠（氢氧化钙、硝酸镁）共热转化为无机砷酸盐后，依法检查。,-,33,（二）氧瓶燃烧法,氧瓶燃烧法是将有机药物放入充满氧气的密闭烧瓶中进行燃烧，并将燃烧所产生的欲测物质（气态）吸收于适当吸收液中，然后根据欲测物质的性质，采用适当分析方法进行鉴别、检查或含量测定.,-,34,特点：,快速分解有机药物的简单方法.,不需复杂设备，能使有机结合中的待测元素定量地分解成无机离子状态.,适用于含卤素及硫、磷、硒等药物的鉴别、检查和含量测定,特别适用于微量样品的测定.,-,35,容量大小随样品量而定,一般500ml、1000ml或2000ml，磨口、硬质玻璃锥形瓶，瓶塞应严密、空心,含氟药物用石英制或聚氯乙烯制的燃烧瓶,因样品燃烧后,产生HF,对玻璃有腐蚀作用,与玻璃中的硼生成氟化硼,BF3在水中不能完全解离,而使测定结果偏低.,1.仪器装置硬质玻璃燃烧瓶,-,36,铂丝下端做成螺旋状或网状,长度约为瓶身的2/3.,瓶塞底部熔封一根铂丝,-,37,2.操作,加吸收液通氧,燃烧,吸收,测定,取样10-20mg(无灰滤纸),-,38,注意事项,吸收完全,一般振摇30,燃烧瓶看不到烟雾.,Cl、F白色烟雾Br棕色I紫色,-,39,防爆,样品燃烧时,温度很高,燃烧瓶内压力很大,有爆炸的可能性,必须采取防护措施.,-,40,吸收液的选择,-,41,-,42,溴化物,溴化物,燃烧后分解产生的溴化氢可被氧气氧化成单质溴，故其燃烧产物为单质溴与溴化氢的混合物，可在水氢氧化钠溶液构成的吸收液中加入还原剂二氧化硫饱和溶液，将单质溴还原为溴负离子；采用银量法测定含量。,-,43,测定含碘药物时，分解产生的碘化氢可被氧气进一步氧化，其燃烧产物主要为单质碘，并含有少量的五价碘（HIO3）与一价碘（HIO）和微量的负一价碘（HI），a.当使用硝酸银滴定法测定含量时，可用水氢氧化钠二氧化硫饱和溶液作为吸收液，上述不同价态的碘均转变为负一价的碘，即碘化钠；b.若使用间接碘量法测定时，则可以水氢氧化钠溶液作为吸收液，此时吸收液中的待测物转变为碘酸钠（NaIO3）与碘化钠，可用溴醋酸溶液将其氧化为同一价态，即碘酸（HIO3）后，再加碘化钾使之定量生成单质碘，再用硫代硫酸钠滴定生成的碘。,-,44,实例-碘苯酯的含量测定,燃烧吸收加溴加甲酸通空气加KI滴定,-,45,将-、2氧化为O32Na+Br2=2NaBr+22+5Br2+6H2O=2HO3+10HBr3.加甲酸：除去过量的溴,2.溴-醋酸氧化剂：,2+2Na2S2032Na+Na2S403,4.加KI滴定K+O332+H2O,1.燃烧吸收,I2+2NaOHNaIO+NaI+H2O,3NaIONaIO3+2NaI,OH-,-,46,选择氧瓶燃烧法所必备的实验物品A.磨口硬质玻璃锥形瓶B.铂丝C.普通滤纸D.氢气E.无灰滤纸,-,47,氧瓶燃烧法测定含氯有机药物时所用的吸收液多数为A.H2O2溶液B.H2O2NaOH溶液C.NaOH溶液D硫酸肼饱和液E.NaOH硫酸肼饱和液,-,48,氧瓶燃烧法可用于A.含卤素有机药物的含量测定B.醚类药物的含量测定C.检查甾体激素类药物中的氟D.检查甾体激素类药物中的硒E.芳酸类药物的含量测定,-,49,第二节定量分析方法特点,-,50,测定药物的含量是评价药品质量优劣的重要手段。其测定方法多种多样，而容量分析法、光谱法和色谱法是ch.p(2005)收载最多的方法，下面分别加以介绍：,-,51,一、容量分析法,容量分析法：是将已知浓度的滴定液（中国药典中称滴定液）由滴定管加到待测药物的溶液中，直到所加滴定液与被测药物按化学计量反应完全为止，然后根据滴定液的浓度和消耗的体积，就可计算出被测药物的含量。容量分析法操作简便、快速、比较准确，一般情况下相对误差可达0.2以下。,（一）、容量分析法的特点,-,52,1.滴定度指每1ml某摩尔浓度的滴定液所相当的被测药物的质量。中国药典用毫克（mg)表示。如：用双步滴定法测定阿司匹林肠溶片的含量时，规定每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L)相当于18.02mg的阿司匹林。,（二）、容量分析法的计算问题,2.滴定度的计算在容量分析中，被测药物（B)与滴定液（A）之间都按一定的摩尔比进行反应的，反应可表示为：,滴定度（T)可按下式计算：,-,53,被测药物（B),滴定液（A）,-,54,单位体积（VA=1ml）的滴定液相当于被测药物的量,被称为“滴定度”，以T表示。单位为：mg/ml,T是滴定液浓度的一种特殊表示形式。使用T可使滴定结果的计算简化。即：WB=VAT,-,55,在实际工作中，所配制的滴定液的摩尔浓度与药典中规定的摩尔浓度不一定恰好符合，此时就不能直接应用药典上所给出的滴定度（T)，,即TTF,式中F=,-,56,3.百分含量计算在测定药物含量时，常用直接滴定法和回滴法，其计算方法如下：（1）直接滴定法：此法是用滴定液直接滴定，以求得被测药物的含量。,含量,W:供试品取样量,V:消耗滴定液的体积T:滴定度,D:稀释倍数,F:浓度校正因子,-,57,含量,W:供试品取样量,V0:空白试验消耗第二个滴定液的体积(硫酸),V:回滴消耗第二个滴定液的体积(硫酸),F:滴定液的校正因子(硫酸),2.)剩余滴定法（回滴法）:,T:滴定度,D:稀释倍数,-,58,标示含量,W:供试品取样量,V0:空白试验消耗第二个滴定液的体积(硫酸),V:回滴消耗第二个滴定液的体积(硫酸),F:滴定液的校正因子(硫酸),T:滴定度,D:稀释倍数,标示百分含量,:平均片重,标示量:规格,-,59,计算示例：1.司可巴比妥钠的含量测定测定法：取本品约0.1g，精密称定，置250ml碘瓶中，加水10ml，振摇使溶解，精密加溴滴定液（0.05mol/L），再加盐酸5ml，立即密塞，并振摇1分钟，在暗处放置15分钟后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，加碘化钾试液10ml,立即密塞，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定液的结果用空白试验校正。已知：司可巴比妥钠滴的摩尔质量M260.33；司可巴比妥钠与溴反应的摩尔比为1：1；供试品的称取量W=0.1022g;硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）浓度校正因子F1.038；供试品消耗硫代硫酸钠滴定液15.73ml；空白试验消耗硫代硫酸钠滴定液23.21ml。试计算溴滴定液（0.05mol/L)的滴定度T，司可巴比妥的百分含量？,-,60,利用物质的光谱进行定性、定量和结构分析的方法称为光谱分析法通过测定被测物质在光谱的特定波长处或一定波长范围内的吸光度或发光强度，对该物质进行定性或定量分析的方法称为分光光度法紫外可见分光光度法、红外分光光度法、原子吸收分光光度法、荧光分析法和火焰光度法,二、光谱分析法,-,61,紫外-可见分光光度法,1.朗伯-比尔定律:A=ElC,A:吸收度,l:液层厚度,C:溶液浓度,E:吸收系数:1.摩尔吸收系数2.百分吸收系数,摩尔吸收系数:指在一定波长下,溶液浓度为1mol/L，厚度为1cm时的吸收度，用e表示.百分吸收系数:指在一定波长下,溶液浓度为1%(W/V)，厚度为1cm时的吸收度，用表示,两者之间的关系:,M:吸光物质的分子量,-,62,2.特点（1）灵敏度高，可达10-410-7g/ml。（2）准确度高，相对误差为25（3）仪器价格较低廉，操作简单，易于普及。（4）应用广泛。,-,63,3.仪器校正和检定（1）定期对所用的仪器进行全面校正检定（2）测定前校正测定波长，常用用仪器中氘灯的486.02、656.10nm谱线进行校正,-,64,（3）吸光度的准确度的校正：用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，在下表规定的波长处测定并计算吸收系数，并于规定的吸收系数比较，应符合表中的规定,-,65,-,66,（4）杂散光的检查可按下表的试剂和浓度，配制成水溶液，置1cm石英吸收池中，在下表规定的波长处测定透光率，应符合表中的规定,-,67,（5）对试剂的要求含杂原子的有机溶剂通常均具有很强的末端吸收。因此，当作溶剂使用时，它们的使用范围均不能小于截至使用波长。例如甲醇、乙醇的截至使用波长为205nm。当溶剂不纯时，也可增加干扰吸收。因此，在测定供试品在前，应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求,-,68,即，将溶剂置于1cm石英吸收池中，以空气为空白（即空白光路中不置任何物质）测定其吸光度，溶剂和吸收池的吸光度在220-240nm范围内不得超过0.40；在241-250nm范围内不得超过0.20；在251-300nm范围内不得超过0.10；在300nm以上不得超过0.05,-,69,（6）吸收池的校正（配对），盛空白溶液的吸收池与盛试样溶液的吸收池应互相匹配，即有相同的厚度与相同的透光性。在吸收池A内装入试样溶液，在吸收池B内装入参比溶液。测量试液的吸收度，然后倾出吸收池内的溶液，洗净吸收池。再分别在吸收池A内装入参比液，在吸收池B内装入试样溶液，测量吸光度。要求前后两次测定的吸光度差值应小于1。,-,70,4.紫外分析法的计算问题,对照品比较法:按各品种项下的方法,分别配制供试品溶液和对照品溶液,在规定的波长下测定供试品溶液和对照品溶液的吸收度,按下式计算被测溶液的浓度:,Ci为供试品溶液的浓度,Ai为供试品溶液的吸收度,Cs为对照品溶液的浓度,As为对照品溶液的吸收度,D为稀释倍数,W为供试品的取样量,-,71,吸收系数法:按各品种项下的方法,配制供试品溶液,在规定的波长下测定吸收度,再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量:,-,72,例氯氮卓片含量测定方法：取本品20片，精密称定，总重为2.3695g，精密称取片粉0.3608g，置100ml量瓶中，加盐酸（91000）70ml，充分摇匀使溶解，用盐酸（91000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml,置另一100ml量瓶中，用盐酸（91000）稀释至刻度，摇匀，在308nm测定吸收度A0.507。已知：氯氮卓的百分吸收系数为319，氯氮卓片的标示量10mg/片。求：氯氮卓的标示量。,-,73,色谱分析法是一种分离分析方法，系根据混合物中各组分的色谱行为差异（如在吸附剂上的吸附能力的不同或两相中的分配系数的不同等），先行分离后再在线（或离线）对各组分逐一进行分析的方法，因此是分析混合物的最有力手段,三、色谱分析法,-,74,色谱法的分类,根据分离原理分为：吸附色谱法分配色谱法离子交换色谱法排阻色谱法,根据分离方法分为：纸色谱法薄层色谱法柱色谱法气相色谱法高效液相色谱法,-,75,1.特点：高灵敏度（10-12-10-15）、高选择性、高效能、高速度及应用广泛。2.对仪器的一般要求仪器：高效液相色谱仪色谱柱的填充剂种类、流动相组成、检测器类型应按各品种项下的规定使用色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组成的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度等均可适当改变，以适应具体色谱系统并达到系统适用性试验的要求,高效液相色谱法,-,76,3.系统适用性试验（1）色谱柱的理论板数（n）：在规定的色谱条件下，注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物质溶液，记录色谱图。量出供试品主成分或内标物质峰的保留时间tR和半峰宽（W1/2），按n=5.54(tR/W1/2)2计算色谱柱的理论板数（2）分离度（R）：无论定性鉴别或定量分析，均要求待测峰与其他峰、内标峰或特定的杂质对照峰之间有较好的分离度。分离度的计算公式为：,R=,2(tR2-tR1),W1+W2,-,77,式中，tR2为相邻两峰中后一峰的保留时间；tR1为相邻两峰中前一峰的保留时间；W1和W2为此相邻两峰的峰宽。除另有规定外，定量分析时分离度应大于1.5（3）重复性：取各品种项下的对照溶液，连续进样5次，除另有规定外，其峰面积测量值的相对标准偏差应不大于2.0。（4）拖尾因子（T）：为保证分离效果和测量精度，应检查待测峰的拖尾因子是否符合各品种项下的规定。拖尾因子计算公式为：,T,W0.05h,2d1,式中，W0.05h为5峰高处的峰宽；d1为峰顶点至峰前沿之间的距离,-,78,除另有规定外，峰高法定量时T应在0.95-1.05之间。峰面积测定时，T值偏离过大，也会影响小峰的检测和定量的准确度。,-,79,1.外标法,标示含量%=,高效液相色谱法,-,80,（1）两种表示方法,2.内标法,校正因子,-,81,标示含量%=,-,82,目的：证明采用的方法适合于相应检测要求。在建立药品质量标准时药品生产工艺变更、制剂的组分改变、原分析方法进行修订时方法验证过程和结果均应记载在药品标准起草或修订说明中,第三节、药品分析方法验证,-,83,1鉴别试验、杂质定量或限度检查.,2原料药或制剂中有效成分含量测定.,3制剂中其他成分（降解产物、防腐剂等）的测定.,4药品溶出度、释放度等检查中，其溶出量等的测试方法也应作必要的验证.,须验证的分析项目有：,-,84,1准确度2精密度3专属性4检测限5定量限6线性7范围8耐用性,验证的内容有：,-,85,(1)准确度（accuracy）,测量值与真实值接近的程度表示:回收率测定方法：回收试验原料药:经典方法测定值为真值,建立的方法测定结果与之比较或测定标准样品与已知含量比较制剂:模拟样回收试验加样回收试验考察制剂中辅料、其他组分和杂质对测定有无影响,-,86,模拟样回收试验:,于空白样品中加入已知量药物标准品,混匀后测定测得量模拟样回收率=*100%加入量用于较简单的制剂,考核样品尽量按原制剂处方配制.药物所处的理化环境,-,87,加样回收试验,在已知含量的制剂中,再加入已知量药物标准品,混匀后测定测得量-样品含量加样回收率=*100%加入量用于较复杂的制剂,如中成药,原制剂处方配制过程复杂,原辅料不易获得或处方保密,-,88,回收试验中加入待测药物的量:,3种不同加入量,各测3次正常含量的80%100%120%9个回收率数据的相对标准偏差（RSD）应不大于2.0%。一般分析方法,如HPLCGCUV等,回收率应在98%102%TLC95%105%体内药分85%115%,-,89,(2)精密度（precision）：,定义:同一样品多次测量值之间相互接近的程度表示：标准偏差(SD),相对标准偏差(RSD)重复性:同一样品短期内同一实验室,同一人,同一仪器设备多次测定结果的变异.用至少9次测定结果进行评价,如3种不同浓度的溶液,各测3次同一均匀样品多次取样,n=6中间精密度:同一实验室，不同时间,不同人,不同仪器测定结果的精密度.考察随机变动因素对精密度的影响变动因素:日期分析人员设备重现性:不同实验室，不同人测定的精密度,考察分析方法的适应性分析方法被法定标准采用时,应进行重现性试验,-,90,（1）绝对偏差：单次测量值与平均值之差（2）相对偏差：绝对偏差占平均值的百分比,精密度表示方法：,-,91,（5）标准偏差：（6）相对标准偏差（变异系数）,（3）平均偏差：各测量值绝对偏差的算术平均值（4）相对平均偏差：平均偏差占平均值的百分比,-,92,精密度试验结果的RSD允许数值:,容量分析、重量分析法0.3%0.5%;氧瓶燃烧法0.5%;紫外、原子吸收分析法1.5%HPLC、GC分析法2%TLC分析法2%体内药分色谱方法RSD5%10%,-,93,1.非仪器分析目视法,用已知浓度的被测物进行分析，目视确定能被可靠检测出的被测物的最低浓度或量。本法适用于可用目视法直接评价结果的分析方法，如：显色鉴别法、薄层色谱法（TLC）法检查杂质等,（3）检测限(limitofdetection,LOD),指试样中被测物能被测出的最低浓度或量。,-,94,5mg/ml,50mg/ml,100mg/ml,20mg/ml,10mg/ml,杂质斑点,点样原点（10ml）,-,95,2.仪器分析信噪比法可用已知浓度的低浓度样品测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，计算出能被可靠地检测出的最低浓度或量一般以信噪比为31或21时相应浓度或注入仪器的量确定检测限。用于能显示基线噪音的分析方法.应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。,-,96,（4）定量限(limitofquantitation,LOQ),指样品