反相高效液相色谱法测定保健食品中维生素C

-毒理与检验-反相高效液相色谱法测定保健食品中维生素C李小娟杨润(江苏省疾病预防控制中心江苏南京文献标识码I C中图分类号I R-331文章编号I1006-9070(-0060-02关键词I保健食品G维生素C G反相高效液相色谱法G测定维生素C是人体维持生长保证健康所必需的营养物质许多保健食品中都含有目前国内测定维生素C的方法有2 4 二硝基苯肼法荧光光度法及液相色谱法1-2前两种方法试样前处理比较复杂后一种方法由于各种样品基体不同干扰因素不同及检测条件不完善通常应用不多但检测条件是分离效果的关键我们通过摸索条件建立了反相高效液相色谱法测定保健食品中维生素C平均回收率为94.7101.3%相对标准偏差为4.66.1%最低检出浓度为0.001mg/m1该方法灵敏快速准确1材料与方法1.1仪器PLC GO1d 125型高效液相色谱仪配有168型检测器及色谱工作站超声清洗机1.2试剂甲醇(色谱纯抗坏血酸(A.R.中国医药集团上海化学试剂公司磷酸二氢钾(A.R1.3色谱条件ODS色谱柱:dp5pm 4.6 150mm(美国Beckman公司检测波长:254nm G 20p1定量取样环G流动相:甲醇=0.05M磷酸二氢钾(p为3.0=2=98G流速:0.8m1/min1.4测定方法(1标准溶液:用0.05M磷酸二氢钾(p为3.0溶液配制1mg/m1的维生素C标准储备液再稀释成0.02mg/m1标准液按上述色谱条件进样20p1保存相应色谱图及峰面积(2样品处理:精密称取保健食品0.52.5g 于50m1比色管中用0.05M磷酸二氢钾(p为3.0溶液稀释至刻度混匀超声10min用0.45pm滤膜过滤收集滤液进样20pL保存相应色谱图及峰面积(3计算:以保留时间及峰面积定性和定量以标准与样品保留时间定性G用标准比较法确定样品中维生素C的含量其计算公式为:Ci=AiCsi/Asi其中CiCsi分别为样品及标准品的浓度G Ai Asi分别为样品及标准品的峰面积2结果与讨论2.1色谱条件选择本文对流动相的配比进行了选择流动相中甲醇与0.05M磷酸二氢钾(p为3.0的比例分别为20=8010=90及2=98进行实验发现维生素C标准峰随着流动相中甲醇含量的降低其保留时间逐渐推迟对样品来说由于其基体比对照品复杂保留时间的推迟有利于其组份的分离当选择配比为2=98时其组份基本分离标准出峰时间Rt=5.4min2.2线性范围最低检出限将标准储备液用0.05M磷酸二氢钾(p为3.0溶液稀释成0.005 0.010.020.040.08mg/m1标准系列在规定的色谱条件下进行分析以峰面积对其含量进行线性回归得回归方程:y=-0.51+1064.9:(1= 0.9997结果表明维生素C含量在0.001 0.08mg/m1范围内呈良好的线性关系最低检出浓度为0.001mg/m12.3精密度试验同一试样在相同条件下进行5次测定相对标准偏差在4.66.1%结果见表12.4准确度试验在已知含量的样品中加入2个浓度水平的标准品溶液测定加标回收率见表2 结果说明本方法较准确-06-江苏预防医学2004年3月第15卷第1期JiangsU Prev Med March2004 VO115 NO.1收稿日期:2003-10-14作者简介:李小娟(1967 女江苏南通人副主任技师表1精密度试验结果(mg/g D试样编号12345I RSD%1 1.22 1.36 1.24 1.32 1.25 1.28 4.62O.O68O.O71O.O78O.O69O.O76O.O72 6.1表2准确度试验(H=3D样号本底值(mg D加入值(mg D测定值(mg D123平均值(mg D回收率(%D 1O.64O O.273O.9O9O.89O O.897O.89994.72O.64O 1.3O8 1.973 1.965 1.957 1.9651O1.33小结利用反相高效液相色谱(HPLC D法测定保健食品中的维生素C,采用ODS柱,以甲醇=O.O5M磷酸二氢钾(pH为3.OD(体积比为2=98D为流动相,用紫外检测器检测O结果表明,维生素C浓度在O.OO1O.O8mg/m1范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率94.71O1.3%,相对标准偏差为4.66.1%,最低检出浓度为O.OO1mg/m1O该法简单快速,精密度及准确度均符合分析要求,适用于维生素C片剂银杏强化果晶初乳粉等保健食品中维生素C含量的测定O参考文献I1I中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所.食品营养成分测定法M I.北京:人民卫生出版社,1991,169-178.2I李明元.高效液相色谱法及其在食品分析中的应用M I.北京:北京大学出版社,1988,165.毒理与检验单克隆免疫法快速检测轮状病毒和腺病毒郭敏,戈建军,李敬顺,钟天鹰(南京医科大学附属儿童医院,江苏南京21OOOO D文献标识码1C中图分类号1R-331文章编号11OO6-9O7O(2OO4D O1-OO61-O2关键词1快速单克隆免疫法G检测G轮状病毒G腺病毒轮状病毒是引起6个月3岁儿童胃肠炎的重要病原,儿童腹泻病病原分析轮状病毒检出率超过5O%1-2I O另外,自ROwe1953年在腺组织中发现了腺病毒以及其后研究,证实了一些类型的腺病毒也可以引起肠胃炎3I O因此,选择一个可靠的快速检测方法来证实轮状病毒和腺病毒的感染,对追溯传染源,控制传播是非常重要的O目前检测轮状病毒腺病毒的方法较多,如直接血凝法,全标免疫斑点法,ELISA法细胞培养PCR法等O但大多数方法操作复杂,需要很多仪器和设备,不适合一般医院使用O而单克隆免疫法(RIDA D快速诊断轮状病毒腺病毒能取得较好效果O1材料与方法1.1试剂与仪器德国生物制药AG.RIDA试剂盒,盒内试剂包括1瓶提取用缓冲液3O m1,1X25转移用移液管,25个轮状病毒和腺病毒反应条(每盒供25人次检测D,由宇盛达公司提供O另备测试试管移液器(1OO5OO p1可调D等O1.2标本收集与贮存将粪便标本收集于容器里,测试前贮存在28C冰箱内G如贮存期超过2天,应贮存在-2OC冰箱O测试时标本应完全溶化O 1.3检测步骤吸取1.O m1缓冲液置试管中,加16江苏预防医学2OO4年3月第15卷第1期Jiangsu Prev Med,March,2OO4,VO115,NO.1收稿日期:2OO3-11-O1作者简介:郭敏(197O-D,女,江苏南京人,技师O 反相高效液相色谱法测定保健食品中维生素C作者:李小娟, 杨润作者单位:江苏省疾病预防控制中心,江苏,南京,刊名:江苏预防医学英文刊名:JIANGSU JOURNAL OF PREVENTIVE MEDICINE年,卷(期:2004,15(1被引用次数:3次参考文献(2条1.李明元高效液相色谱法及其在食品分析中的应用 19882.中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所食品营养成分测定法 1991本文读者也读过(9条1.俞红霞.藏英年.林江淘尼古丁替代治疗联合心理行为干预对戒烟临床疗效观察会议论文-20052.柯华.刘巧.郑艳影.郑申西.林捷微波消解-火焰原子吸收法测定保健品中的钙期刊论文-中国卫生检验杂志2004,14(53.桑宏庆.王丽.柯林俊.SANG Hong-qing.WANG Li.Ke Lin-jun采用褪色光度法测定维生素C期刊论文-饮料工业2010,13(114.龙洲雄.胡海山.万春花.鄢兵.LONG Zhou-xiong.HU Hai-shan.WAN Chun-hua.YAN Bing HPLC法测定保健食品中维生素K1期刊论文-现代测量与实验室管理2007,15(35.胡曙光.梁春穗.王静.刘锐.龙朝阳自动电位滴定法测定高钙食品中钙的方法研究期刊论文-中国卫生检验杂志2006,16(16.张秋灵.邹华.常文贵.ZHANG Qiu-ling.ZOU Hua.CHANG Wen-gui聚中性红修饰电极测定维生素C的方法研究期刊论文-饮料工业2007,10(117.雍莉.黎源倩.李敏.曾红燕高效液相色谱法快速测定保健食品和果蔬中的VitC期刊论文-现代预防医学2005,32(38.王改珍.李国栋.贺进田.王海峰.李志强.邓晓丽市售补钙制剂钙含量的测定期刊论文-河北科技大学学报2002,23(49.闻金玲补钙制剂中钙含量的测定期刊论文-中国现代药物应用2009,3(19引证文献(3条1.何保山.张长辉.左春艳.王丹.李聪.李辉.马斌强.袁超食品中维