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文档简介
大肠菌群计数是一种估计悬浮在水溶液中活菌数的方法。一般分几组进行，每一组各有数重复，分别以渐次的方式加入不同量的待测水溶液于培养液中进行培养，随后观察每一组中的试管是否有菌生长，然后再利用统计表估计菌数。 例如水中coliform数的测定，将待测水溶液以10ml,1ml 及 0.1ml 的量分别加入各组，每组三重复，经培养后观察 coliform 是否有生长，统计有菌生长的管数，以统计表统计菌数。活菌的浓度可利用 MPN 的方式来估计，方式简单，可分为下列两步骤： 在培养基中作数个重复稀释； 记录有菌生长的试管。 若试管中无生长，则可能代表连一支菌都没有生长。 从统计观点， MPN 这个方法是一种非常没效率的方式，因为每一试管与培养皿表面生长的菌数只有很小部分符合。然而 MPN 的好处有以下： 若菌无法长在固态培养基时，便可使用； 若菌的生长的动力学具有很大变化，便可使用：假设某些菌会会立即且迅速的生长，且会在固态培养基产生很大的菌落，且与我们要的菌落接触到或盖过时；因为较少且具高度游动性或快速生长的菌，可能形成小菌落，因而其数量是很多而导致无法计数； 假如非我们所要菌存在，或无筛选的方法存在时，便可使用。 虽然有污染的细菌可以大量生长，但仍可藉由我们所要看的菌产生特定的产物来估计； 假如琼脂或其他固化材料有某些因素会干扰我们计数时，便可使用大肠菌群MPN表正反应试管数MPN/ml （ g ）95% 信赖界线0.1ml0.01ml0.001ml下限上限000 30013 590103 513020-1004 1,100 150 4,800说明： 若稀释倍 数为 10 ， 100 ， 1000 倍（即每 ml LST 中 0.1 ， 0.01 ， 0.001 ml （ g ）之检体），且 LST 均产气（正反应试管数 3-3-3 ），经接种至 EC ，而其产气试管数为3-1-0 ，对照 MPN 为 43 ，即为该检体大肠杆菌 MPN 数为 43/ml （ g ）。 若稀释倍数为原液， 10 ， 100 倍 ( 即每 ml LST 中含 1 ， 0.1 ， 0.01ml 之检体而 EC 接种之正反应试管数亦为 3-1-0 ，则该检体大肠杆菌 MPN 数为 43 10=4. 3/ml 。 若稀释倍数为 100 ， 1000 ， 10000 倍时，结果同上，则该检体大肠杆菌 MPN 数为 4310=430/ml ，其余类推。 计算公式： 中间试管之稀释倍数 MPN g （ ml ）平板计数法：采用常规涂布平板法，3724h后计数。培养基为营养琼指和伊红美兰琼脂。多管发酵法：采用五管法，培养剂为液体EC培养基。细菌总数：采用AODC法， 具体操作按徐怀恕方法进行。活菌直接计数：采用Kogure等方法：向水样加入0.002%萘啶酮酸和0.025%酵母膏，在37下培养6-24h，加入甲醛（最终浓度为2%）固定，再按A
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