第六节--芳酸类药物的分析2011.10.13.ppt

第六章芳酸及其酯类药物的分析,基本要求,一、掌握水杨酸类、苯甲酸类药物的鉴别和含量测定的基本原理与方法二、熟悉其他芳酸类药物鉴别和含量测定的基本原理与方法。三、了解本类药物的体内分析方法,大多数药物中羧基直接与苯环相连，如水杨酸类和苯甲酸类药物；而羧基为磺酸基或通过烃氧基等与苯环相连者，常归为其他芳酸及其酯类药物。本章重点讨论三类药物的分析。,芳酸及其酯类药物分子结构的共性是，既具有苯环，又有羧基，游离羧酸呈酸性，可成盐或酯.,常见的芳酸及其酯类药物,水杨酸类,苯甲酸类,其他芳酸类药物,水杨酸类,水杨酸类,水杨酸类,水杨酸类,水杨酸类,水杨酸类,水杨酸类,贝诺酯benorilate,水杨酸类,水杨酸类,苯甲酸类,Benzylacid,苯甲酸类,苯甲酸类,丙磺舒（pKa3.4）,苯甲酸类,苯甲酸类,probenecid,甲芬那酸（mefenamicacid）,苯甲酸类,苯甲酸类,其他芳酸类药物,氯贝丁酯（clofibrate）,苯氧乙酸类,布洛芬（ibuprofen）,其他芳酸类药物,游离羧基,阿司匹林（asprin）,酯键,苯环,第一节结构与性质,阿司匹林,水解后才发生三氯化铁反应,水解后生成水杨酸杂质,pKa=3.49,H,直接中和法两步滴定法,对氨基水杨酸钠,酚羟基,芳伯氨基,苯环,对氨基水杨酸钠,第二节鉴别试验,一、与铁盐反应1.水杨酸类具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物。,紫堇色,水杨酸对氨基水杨酸钠双水杨酯.,水杨酸ChP（2010）鉴别（1）取本品的水溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。,FeCl3反应,直接反应：,间接反应：,阿司匹林贝诺酯,FeCl3反应,阿司匹林ChP（2010）,鉴别（1）取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。,FeCl3反应,贝诺酯ChP（2010）,【鉴别】(1)取本品约0.2g，加氢氧化钠试液5ml；煮沸，放冷，滤过，滤液加盐酸适量至显微酸性，加三氯化铁试液2滴，即显紫堇色。,FeCl3反应,2.苯甲酸类,FeCl3反应,3.酯的异羟肟酸铁反应,二、重氮化偶合反应,芳香第一胺类鉴别反应具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物,直接：对氨基水杨酸钠,二、重氮化偶合反应,间接：贝诺酯,三、水解反应,1.分解产物的反应,四、特殊反应,2.氧化反应含硫的药物,四、特殊反应,五、紫外吸收光谱法,（一）利用紫外特征吸收法1、贝诺酯贝诺酯无水乙醇溶液的紫外吸收光谱的最大吸收波长为240nm；2、布洛芬取布洛芬加0.4%氢氧化钠溶液制成每1ml中含0.25mg的溶液，照分光光度法测定，在265nm与273nm波长处有最大吸收，在245nm与271nm的波长处有最小吸收，有259nm的波长处有一肩峰。,（二）利用不同波长吸收度比值,甲芬那酸取甲芬那酸7mg加盐酸-甲醇溶液（11000）溶解并稀释至500ml，在最大吸收波长处278nm-280nm和348nm-352nm分别测定吸收度A1和A2，规定A1/A2的值应在1.15-1.30之间。,六、红外吸收光谱法,第三节特殊杂质检查,一、阿司匹林特殊杂质检查,限制无羧基的杂质,（一）溶液的澄清度,检查原理阿司匹林可溶于碳酸钠无羧基杂质不溶于碳酸钠,苯酚,乙酰水杨酸苯酯,水杨酸苯酯,醋酸苯酯,*原料残存（原料乙酰化不完全）,1、来源,（二）游离水杨酸,*水解产生,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水(20:5:5:70)为流动相，检测波长为303nm。理论板数按水杨酸峰不低于5000。阿司匹林峰与水杨酸峰的分离度应符合要求。精密量取供试品溶液与对照溶液各10l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品溶液的色谱图中如有与水杨酸保留时间一致的峰，按外标法以峰面积计算，不得过0.1%。,游离水杨酸检查-HPLC法,（2）限量规定,原料0.1%阿司匹林片0.3%阿司匹林肠溶片1.5%,（三）易炭化物,检查药物中遇硫酸易炭化而呈色的微量有机杂质,检查方法比色法,二、对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查,（溶血、有色醌类）,间氨基酚,1.杂质来源,原料残存脱羧产生,2.检查方法,取本品，精密称定，加流动相溶解制成每1ml中约含0.7mg的溶液，作为供试品溶液。精密量取1ml置100ml量瓶至刻度，作为对照溶液。另取间氨酚对照品，加流动相溶解制成每1ml中约含0.2ug的溶液，作为对照品溶液。检测波长为280nm，照含量测定项下色谱条件。取对照溶液20ul，注入液相色谱，调节灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的25%，再精密量取上三种溶液20ul，分别注入液相色谱仪，供试品溶液的色谱图中如有与间氨酚保留时间一致的峰，按外标法以峰面积计算，不得过0.25%。,对氯酚是氯贝丁酯合成的起始原料，同时氯贝丁酯分解也可产生检查方法具挥发性GC法（2010版药典）也可HPLC法,三、氯贝丁酯特殊杂质的检查,第四节含量测定,1.直接滴定法pKa36,阿司匹林原料苯甲酸丙磺舒布洛芬,一、酸碱滴定法,反应摩尔比1：1,原理,产物为强碱弱酸盐宜选酚酞为指示剂,+NaOH,2.两步滴定法,（1）氯贝丁酯,合成过程中易引入酸性杂质，结果偏高，为了消其干扰，采用两步滴定法测定,方法,取氯贝丁酯2g，精密称定，置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）10ml与酚酞指示液数滴，滴加氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)显粉红,再精密加氧化钠滴定液(0.5mol/L)20ml，加热回流1小时至油珠完全消失，放冷，用新沸过冷水洗涤冷凝管，洗液并入锥形瓶中，加酚酞指示液数滴，用盐酸滴定液(0.5mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml氢氧化钠滴定液(0.5mol/L)相当于121.4mgC12H15ClO3,第一步中和,酸性杂质,+NaOH,杂质钠盐,不用于含量计算,第二步水解后剩余滴定,反应摩尔比为11,+NaOH,定量过量,消除了酸性杂质的干扰消除了酯键水解的干扰,含量计算,优点,二、亚硝酸钠滴定法,具芳伯氨基或潜在芳伯氨基（芳酰氨基水解或硝基还原）的药物,三、双相滴定法,芳酸碱金属盐如苯甲酸钠,溶剂：水乙醚,四、紫外分光光度法,丙磺舒片,利用丙磺舒含盐酸的乙醇溶液，在249nm波长出有最大吸收来定量。,（一）直接紫外分光光度法,取本品10片，研细，精密称取适量置200m1量瓶中，加乙醇150ml与盐酸溶液（9100）4m1，置70水浴上加热30min，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9100）2m1，用乙醇稀释至刻度，摇匀。于1cm吸收池中，以溶剂为空白，在249nm的波长处测定吸收度，按C13H19NO4S的吸收系数（）为338计算。,丙磺舒片,吸收系数法含量计算,（二）离子交换后紫外分光光度法,氯贝丁酯当用紫外分光光度法测定时，由于其所含杂质对氯酚在226nm具紫外吸收，采用强碱条件下，阴离子交换树脂吸附酸性杂质后，用对照法定量测定氯贝丁酯含量。,五、高效液相色谱法,阿司匹林片、肠溶衣、肠溶胶囊、泡腾片、栓剂的含量测定色谱条件填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70）检测波长为276nm，,系统适用性试验在上述色谱条件下，理论塔板数阿司匹林峰计算不低于3000，阿司匹林峰、水杨酸峰和内标物质峰的分离度应大于1.5。,对照品溶液的制备取阿司匹林对照品适量，精密称定，加1%冰醋酸甲醇溶液制成每毫升含0.1mg的溶液。,取本品5粒，精密称定，置小烧杯中，在40-50水浴上微温熔融，在不断搅拌下冷却至室温，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.1g）置50ml量瓶中，加入加1%冰醋酸甲醇溶液适量，在40-50水浴中充分