《DNA的转录》PPT课件

ribonucleicacid-RNA,在RNA聚合酶的催化作用下，以DNA为模板，四种核糖核苷三磷酸(NTPs)为原料合成RNA的过程。,一、转录的相关概念：,1.转录(Transcription),转录过程中碱基配对差异：,模板链(templatestrand)：在转录过程中直接参与指导RNA合成过程的DNA链，其序列与新合成的RNA链互补。编码链(codingstrand)：在RNA合成过程中不直接参与指导RNA合成的DNA链，其序列与新合成的RNA链对应。,二、参与转录的酶类,1.原核细胞RNA聚合酶,核心酶(coreenzyme)：2全酶(holoenzyme)：2,大肠杆菌RNA聚合酶各亚基的性质与功能,2.真核细胞RNA聚合酶,线粒体中的RNA聚合酶与原核生物相似。,三、转录过程,转录可分三阶段：起始、延伸和终止。真核生物中还需转录后加工过程。,1.原核生物的转录过程（1）转录起始启动子(promoter),位于结构基因5端上游的一段DNA序列，可被RNA聚合酶识别并结合，以启动基因转录，又称启动基因。,原核生物启动子特点：,10Box：也称为Pribnow盒，一致序列为TATAAT，有利于转录时双链的解开。35Box：一致序列为TTGACA，提供聚合酶结合时的识别为点。,RNA聚合酶与模板DNA的结合,RNA合成的起始,起始位点的嘌呤碱基与模板+1位碱基配对,(2)转录延伸,因子的脱落，促进了RNA合成速度：约50核苷酸/秒.分子酶,大肠杆菌RNA聚合酶催化RNA聚合反应的起始与延伸,大肠杆菌trp操纵子终止位点序列(富含GC的反向重复序列形成茎环结构促进RNA从模板上脱落),(3)转录终止,不依赖因子的终止,依赖因子的终止,因子(factor)：由50kD亚基组成的六聚体，是一种ATP依赖型解链酶，可解开RNA:DNA和RNA:RNA双链。,2.真核生物基因转录（1）真核生物启动子真核生物包括三类启动子：,真核生物启动子由转录因子识别。转录因子(transcriptionfactor)：能识别启动子并与之发生相互作用的蛋白质，影响转录过程。前起始复合物(preinitiationcomplex)：多种转录因子与RNA聚合酶在转录起点处形成的复合物。,真核生物的类启动子：,包括四种控制元件：基本启动子(basalpromoter，即TATABox)起始子(initiator)上游元件(upstreamelement)应答元件(responseelement)。,GCBox:GGGCGGCAATBox:GGC(T)CAATCT,(2)真核生物增强子(enhancer)：,增强子：真核细胞中能增强启动子活性的核苷酸序列，称为增强子。,增强子的特点：可远距离作用(可大于几个kb)；位于启动子上游或下游都可发挥作用；可在模板链上或也可位于编码链上；功能与序列方向性无关；具有组织特异性。,(2)tRNA前体的加工,(3)mRNA前体的加工,原核生物mRNA一般无需加工，但少数的多顺反子需要通过核酸内切酶剪切成较小的单位后再进行翻译。,(1)加帽(Capping),2.真核细胞的转录后加工,(2)加poly(A)尾巴(Polyadenylation),RNA-pN-OHnATP,多聚腺苷酸聚合酶,RNA-pN-pApApA+nPPi,Mg2+/Mn2+,多聚腺苷酸化在核内完成，可以增加mRNA的稳定性。并非所有的真核mRNA都具有poly(A)尾巴，如组蛋白、呼肠孤病毒及一些植物病毒mRNA。,(3)剪切与拼接(Splicing),外显子(exon)：外显子是指编码区的DNA序列