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文档简介

实验一马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制,一、食用菌菌种种类人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。1)母种(一级菌种):用孢子分离或组织分离等培育的菌丝体称为母种。2)原种(二级菌种):把母种扩大到木屑、棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。3)栽培种(三级菌种):由原种扩大培养成为生产上使用的菌种称为栽培种。4)菌种:实质上就是经过人工培养并进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。,二、食用菌的制种程序,组织分离,接种母种(一级),接种原种(二级),接种栽培种(三级),种菇,孢子分离,经过这样三级培养,食用菌菌丝数量大大增加。一般1支试管菌种可繁殖46瓶原种,每瓶原种又可扩大繁殖60100瓶栽培种。,培养,培养,母种,原种和栽培种,三、菌种生产常用的设备和用具,1、接种设备接种室接种箱超净工作台,超净工作台,2、灭菌设备,1)手提式:容量小,适于斜面试管及玻璃器皿等;2)立式:容量大,投资大;3)卧式:容量大,投资大;4)家用24或26cm压力锅:母种、原种培养基。,高压蒸气灭菌锅,优点:省时、省燃料、效果好,2)、3)一般在菌种场或研究所应用。,三、菌种生产常用的设备和用具,灭菌设备,高压蒸气灭菌锅,2、灭菌设备,常压灭菌锅,目前农村生产栽培种的必备设备,实际上是一种大型蒸笼式煮灶。底部为铸铁大锅,上部为圆形木桶,桶内装数层供放培养基的格架。桶盖装有活络搭及密闭的橡皮圈,由于锅内温度最高是100,所以灭菌时间需维持1012h,才能达到灭菌效果。,三、菌种生产常用的设备和用具,培养室生化培养箱,3、培养设备,三、菌种生产常用的设备和用具,4、培养菌种的容器,母种:试管,常用规格20180200mm,18180mm等。,规格有:12153035cm,173545cm,三、菌种生产常用的设备和用具,菌种瓶,5、接种工具,移植菌种于培养基上的工具称接种工具,主要有以下几种:接种针、环、刀、钩、铲、锄、枪等;,三、菌种生产常用的设备和用具,70%酒精:一般用于手、种菇表面消毒;0.1%升汞:常用于玻璃器皿、非金属器械及种菇表面消毒;0.1%KMnO4:一般用于用具、器皿消毒;,6、常用的消毒药品,三、菌种生产常用的设备和用具,5%石炭酸:喷洒墙壁、地面及擦洗桌面等,也可用来苏尔代替;2%来苏尔、新洁尔灭:用法同上;甲醛(福尔马林):用于菇房和接种箱等空气消毒;方法:关闭门窗消毒,自行气化;用量:10ml甲醛5gKMnO4立方米。,6、常用的消毒药品,三、菌种生产常用的设备和用具,四、母种生产技术,食用菌母种培养基的种类繁多,由于不同营养类型的食用菌对营养物质的要求不同,所以,在培养不同食用菌母种时,应选择适宜该菌种的培养基。母种培养基要求营养丰富、完全、氮源、维生素的比例应高。现将食用菌常用的母种培养基列举如下:,(一)母种培养基马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)马铃薯200g、葡萄糖(或蔗糖)20g、琼脂20g、H2O1000mL、pH6.5。适用于一般食用菌母种分离与培养,但草菇、猴头菌等在此培养基上生长不良。,四、母种生产技术,综合马铃薯培养基马铃薯200g、葡萄糖(或蔗糖)20g、KH2PO42g、MgSO40.5g、维生素B110mg、琼脂20g、H2O1000ml、pH自然。适合培养草菇、猴头菌、灵芝及各种食用菌菌种分离、保藏。,四、母种生产技术,胡萝卜葡萄糖琼脂培养基胡萝卜200g、葡萄糖(或蔗糖)1820g、琼脂20g、H2O1000ml、pH自然。,四、母种生产技术,PDA培养基配制方法马铃薯(去皮、去芽眼)切成片(玉米大小)称取200g1000mLH2O煮沸15-20min双层纱布过滤取滤液并补足1000mL琼脂熔化其它营养物质调节pH(用HCl或NaOH)分装试管塞上棉塞捆扎灭菌(高压蒸气灭菌15-30min)制成斜面检查灭菌效果(即2830培养23d),(3)作

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