“神经生长液”合剂促进神经损伤修复实验观察_百度文库.doc

一课资料网/“神经生长液”合剂促进神经损伤修复实验观察 更新日期：2011-05-18 点击： 孟凡迅张沛云徐济良顾晓松 提要在确定含有促神经生长有效成份的单味草药的基 础上，按照中医药理论组合成一种新型方剂“神经生长液”口服液合剂。经损伤坐骨神经 的SD大鼠服用后的实验结果表明，“神经生长液”口服液合剂，具有促进损伤神经恢复功能 的作用。 关键词坐骨神经损伤；SD大鼠；神经生长液 The Experimental Observation of the Reparing on the Lesioned Ner ve by Nerve Growth Liquid Meng Fanxun, Zhang Peiyun, Xu Jiliang, et al Nantong Medical College 226001 AbstractAccording to the theory of traditional Chine se medicine, the Nerve Growth Liquid, as a new prescription, was made on the bas is of active elements from herb characters. The results of the experiment of les ioned sciatic nerve with the treatment of the Nerve Growth Liquid in SD rat indi cated that the drug may promote the function recovery of lesioned nerve. Key wordsSciatic nerve lesion;SD rat;Nerve Gr owth Liquid 筛选中草药中的有效成份，治疗神经损伤，促进受损神经功能的恢复，这是当今中医药学和 神经科学领域中日趋重视的课题。我们根据传统验方，运用细胞生物学技术，筛选出数种促 神经细胞生长的单味中草药1，在此基础上，按中医药理论，组合成一种新型方 剂“神经生长液”口服液合剂。通过SD大鼠坐骨神经损伤修复实验，对此方进行体内药效 实验观察。现报道如下。 1材料与方法 1.1SD大鼠，体重170 g195 g，雌雄各半。由南 通医学院动物中心提供。合格证：苏动(环95059，苏动(质95011。 1.2“神经生长液”口服液合剂，南通医学院 神经科学研究所产品，批号：960813。主要成份：牛膝、当归、菟丝子、黄芪、党参、红花 等(药材购自南通市医药公司规格250 ml(1 g生药/ml。 1.3饲养条件：室温221，相对湿度70%。 1.4SD大鼠坐骨神经损伤模型：参照Groge M.Smith 的方法2，将SD大鼠麻醉，在右后侧肢部去毛，消毒，切开皮肤组织，分离坐骨 神经，用14 cm止血钳的前部钳夹坐骨神经，历时40 s，缝合切口。 1.5服药方法及剂量计算：以SD大鼠日饮水量稀释 “神经生长液”口服液，供其饮服。以成人平均体重55 kg，55 g生药/d为临床推荐剂量(1 g/kg，按公式3计算，得SD大鼠实际剂量为5.20 g/(kg.d。以此剂量设为实 验组，再设1个低剂量组实验组，2.60 g/(kg.d和1个高剂量组实验组，10.4 0 g/(kg.d。 1.6将损伤坐骨神经的SD大鼠随机分成4组，按上述 3种用药剂量分成3个实验组外，再设立损伤对照组，常规 饲料加普通饮水；其它3个实验组 常规饲料加不同稀释度的“神经生长液”口服液。 1.7观察方法及指标：分别在第1 d、第1周末、第2 周末、第3周末、第4周末、第5周末，各组取1只SD大鼠，经4%多聚甲醛0. 05 M PBS灌注后取右侧坐骨神经，固定，切片，染色，镜检。同时观察各组SD大鼠行为活动 状况，评分记录。参照相关实验资料，制定如下评分标准。 0分：大鼠活动困难，行走时损伤神经之肢体后拖，趾蹼蜷缩。肉眼见神经增粗，周围有渗 出。镜下细胞肿胀。 1分：大鼠活动欠自如，行走时损伤神经之肢体后拖，趾蹼蜷缩。肉眼见神经增粗，周围无 渗出。镜下细胞肿胀。 2分：大鼠活动较自如，行走时损伤神经之肢体略不后拖，趾蹼略伸展，肉眼见神经不增粗 ，周围无渗出。镜下细胞形态略增大，余均正常。 3分：大鼠活动自如，行走时损伤神经之肢体略不后拖，趾蹼伸展，肉眼见神经不增粗，周 围无渗出。镜下细胞形态正常。 2结果 2.1SD大鼠坐骨神经损伤修复实验表明，“神经生 长液”口服液3个剂量实验组和损伤对照组在第1周末以前，活动表现接近，受损伤之肢体后 拖，趾蹼蜷缩，肉眼见受损神经增粗，周围有渗出，镜下细胞肿胀，评分相同。而从第2周末开始，服药组修复进程加快，功能恢 复明显优于损伤对照组，评分差距明显，且服药组SD大鼠毛色光亮，第4周末活动自如，镜 下细胞形态正常。而损伤对照组五周末活动时损伤之肢体后拖，行走功能仍显有碍(见图1， 图2，镜下细胞还略有肿胀。经过评分，统计处理，表现出显著性差异( P0.01。实验组，实验组，实验组之间比较，均未见有意义改变( P0.05，这表明服用剂量在2.6010.4 g/(kg.d的变化，并不影响其药用效果(见 表1。 图1服药组SD大鼠损伤侧第4周末趾蹼形态 图2对照组SD大鼠损伤侧第4周末趾蹼形态 表1“神经生长液”口服对SD大鼠坐 骨神经损伤修复影响的秩和分析 组别 秩和值 含 量 第2周末 第3周末 第4周末 损伤对照组 10 88.5 79 66.5 实验组 10 253.5* 222* 274.5* 实验组 10 250.0* 265* 243.5* 实验组 10 218.0* 252* 235.5* P0.01分别与损伤对照组比较 3讨论 神经损伤是临床常见的疾患，但我国尚未出现公认的治疗神经损伤、促进神经再生的特效药 物。虽然国外研制出“神经生长因子”，但实际临床疗效也难以获得令人满意的结果。而运 用中草药治疗神经损伤从历代名医名家的医案记载以及当今文献报道都不乏成功之例。但方 剂种类繁多，成份复杂，疗效难以验证 ，加之中药材产地、药材使用部位以及熬制方法、剂 型变化多端，使名方在临床上推广受到极大限制。如果对一些传统经验方的中草药进行筛选 ，选择出有促进神经生长的草药，再确定其有效成分及其作用机理，就能够为舒经活血、扶 正固本的中医治疗神经损伤传统理论提供现代科学依据，也有助于从中草药中开发出有效的 治疗神经损伤的药物。 根据实验结果分析，“神经生长液”口服液合剂，具有促进神经生长、恢复形态、改善功能 的作用。结合前期的体外神经细胞培养实