如何读懂ADVIA 2120散点图

如何读懂ADVIA120报告中的散点图,UnifiedFluidsCircuit(UFC)集成流路板,1.HgbReactionChamber(notvisible)2.BasoReactionChamber3.RBCReactionChamber4.ReticReactionChamber5.PeroxReactionChamber6.ShearValve7.ReagentPumpAssembly,原理模式图,HB,E,1,1,3,2,AHB比色计BBASO反应室CRBC反应室D网积反应室EPEROX反应室,1激光器2ADVIA120鞘流/冲冼液3ADVIA120PERO鞘流液4PEROX流式细胞池5RBC/BASO/RETIC流式细胞池,RBC,BASO,RETIC,PERO,5,4,Mie原理是光学法测定的基础：对于球体化的物体，如果它的直径（D)满足：2/D10/,一定角度的折射光强度则决定于该物体的体积和密度,ADVIA120的测量原理,7,细胞激光计数ADVIA120唯一使用的细胞计数方法,白细胞计数和分类红细胞计数血小板计数网织红细胞计数CSF计数,过氧化物酶染色分析,Eosinophil,Neutrophil,Monocyte,Basophil,Lymphocyte,Heat/SDSFormaldehyde(Dil1),4-Chloro-Naphthol(Dil2)H2O2(Dil3),RBC,过氧化物酶通道的测量原理,细胞化学反应,试剂1,试剂2,3,过氧化物酶通道的测量原理,散射光检测细胞大小原理,散射光检测（体积）,当细胞快速通过光检测区时，入射到细胞上的激光首先在细胞表面产生散射，由此获得有关细胞大小的信息。细胞体积越大检测到的散射光越多。,过氧化物酶通道的测量原理,ADVIATM120PEROX鞘液,功能：限制样本流使得在同一时间只有一个细胞通过检测区防止样本流与流通池间的接触，达到预防阻塞和流通池着色的作用。提供一个光的透明介质，在细胞流通过时能被清楚地聚焦。,返回,过氧化物酶染色散点图,过氧化物酶通道的测量原理,报告参数,过氧化物酶通道的测量原理,供实验室内部或研究使用的参数,参数%HPXClumpscountValleycountLymphModeMPXINEUTXNEUTYNoise/LymphvalleyPEROX%d/DPEROX%DeadTimePEROX%SaturationPEROXFlatnessPEROXFlatness,解释高PEROX活性细胞的百分比PEROX细胞图中血小板团区的事件数PEROX细胞图中有核红细胞的事件数淋巴细胞群的模式通道平均过氧化物酶活性指数中性粒细胞群的X通道平均值中性粒细胞群的Y通道平均值噪声与淋巴细胞群间的谷通道分离噪声与淋巴细胞群间谷的相对深度测定时间中由于通道忙而不能对别的事件作出响应的时间所占百分比来自噪声区的事件百分比来自浸透区的事件百分比Sumofthesquareddifferences9XMeancellcountingRate,END,有核红细胞,异性淋巴细胞,原始细胞,不成熟粒细胞,杆状核粒细胞,血小板聚集,难溶性红细胞,嗜碱染色/核分叶性分析,Eosinophil,Neutrophil,Monocyte,Basophil,Lymphocyte,HeatPhthalicAcidSurfactant,RBC,核通道的测量原理,裸核,嗜碱性粒细胞,当细胞通过光检测区，产生散射，散射角度越低，所含有关细胞大小的信息越多。由于嗜碱性粒细胞保持完整，因此检测到的低角度（2-3）散射光要比细胞裸核大得多，从而轻易地与其他白细胞区别开来。,返回,嗜碱性粒细胞/核通道的测量原理,单叶核,多叶核,高角度散射光，包含有关细胞核形的信息。核分叶越多，检测到高角度（5-15）散射光就越多，从而把单叶核（MN）与分叶核(PMN)区分开来，并从PMN/MN的比率，可估计“核左移”的程度。,返回,ADVIATM120鞘/冲洗液,功能：作为嗜硷、红细胞/血小板和网织红细胞测定的光鞘限制样本流使得在同一时间只有一个细胞通过检测区防止样本流与流通池间的接触，达到预防阻塞和流通池着色的作用。提供一个光的透明介质，在细胞流通过时能被清楚地聚焦。为嗜硷、红细胞/血小板和网织红细胞测定冲洗，清洁每个通道。提供血红蛋白测定的基线。,嗜碱染色散点图(正常样本),核通道的测量原理,报告参数,参数WBCB%BASO%BASO,解释来自核通道测量的WBC计数嗜硷性粒细胞占的百分比嗜硷性粒细胞占的绝对值,核通道的测量原理,供研究或实验室室内部使用的参数,参数%BASOSuspect%BLAST%MN%PMN%PMNRatioBASO%DeadTimeBASO%NoiseBASOO%SaturationBASOFlatnessLIMNxMnyPMNx,解释可疑淋巴细胞占百分比原始细胞占的百分比单个核区占的百分比多叶核占的百分比%PMN/（%NEUTS+%EOS）测定时间中由于通道忙而不能对别的事件作出响应的时间所占百分比噪声区的百分比浸透区占的百分比SumofthesquaredDifferences9xMeanCellCountingRatePMNx/MNxx轴通道中单个核区的峰值Y轴通道中单个核区的峰值x轴通道中多叶核区的峰值,END,嗜碱染色散点图(细胞数极少),原始细胞,异性淋巴细胞,不成熟粒细胞,杆状核细胞增多,有核红细胞,高脂血症,综合病例AcuteLeukemias,综合病例ChronicLeukemias,综合病例Lymphomas,综合病例Refractoryanemiawithexcessblasts,综合病例ChronicInfection,综合病例AcuteMyeloblasticsLeukemia(M5),红细胞/血小板方法学,RBC/Platelets通道的测量原理,RBC/PLT试剂,细胞球形固定,RBC,Platelets,参考文献：TyckoPH，MetMH,EpsteinEA,Grinbaum:红细胞体积与血红蛋白的流式细胞光散射测定，应用光学24（9）：1355-1365（1985）,RBC的分析原理,RBC,HB,外直径,时间,低角度（0-5）散射光检测体积,高角度(5-15)散射光检测HB,散射光检测,RBC/Platelets与嗜碱细胞/分叶核使用相同的检测通道，红细胞和血小板先通过检测区，从低角度的散射光检测得到RBC体积的信号，从高角度的散射光检测得到HB浓度的信号。,RBC/Platelets通道的测量原理,RBC报告参数,参数RBCMCVRDWCHCMHDWCHHCTMCHMCHC,解释红细胞计数红细胞平均体积红细胞体积分布宽度红细胞血红蛋白浓度均值血红蛋白浓度分布宽度单个细胞的血红蛋白含量红细胞压积平均红细胞血红蛋白平均红细胞血红蛋白浓度,带为直接测定参数,其余为推算参数.,RBC/Platelets通道的测量原理,供实验室内部或研究使用的RBC参数,参数CHDWRBCFlatnessRBC%DeadTimeRBCCoinLevelRBCCoinCountRBCRCountRBCPCountRBCValidCells#MICRO%MACRO%MICRO%HYPER%HYPO%MICRO/%HYPERRATIO,解释红细胞血红蛋白分布宽度SumofthesquaredDifferences9xMeanCellCountingRate测定时间中由于通道忙而不能对别的事件作出响应的时间所占百分比红细胞偶然事件的水平RBC散射细胞图上偶然事件的计数RBC散射细胞图中红细胞的量RBC散射细胞图中血小板的量从流通池事件中获得的有效信号数RBC直方图中体积为（30-60fl）的细胞计数大红细胞占的百分比小红细胞占的百分比高色素红细胞占的百分比低色素红细胞占的百分比%MICRO/%HYPER,RBC/Platelets通道的测量原理,红细胞光散射的MieMap图,OnADVIA120,laserlightscatterfromisovolumetricallyspheredRBCcanbedescribedusingMiestheory,i.e.,theamountoflaserlightscatteredoveragivenangularrangeisdeterminedbycellvolumeandcelldensity(hemoglobinconcentration),红细胞体积（fl）,每个红细胞内血红蛋白浓度(g/dL),Hypo,Hyper,120fL,60fL,28g/dL,41g/dL,Macro,Micro,红细胞九分图,红细胞九分图的直观分析纵座标,大红细胞增多症,小红细胞增多症,红细胞九分图的直观分析横座标,低色素性贫血,高色素性贫血,红细胞九分图的临床应用举例缺铁性贫血和轻型地中海贫血的鉴别诊断,两种贫血都是因为血红蛋白合成障碍所致,均属于小细胞低色素性贫血但发病机理迥然不同阻抗法血球计数仪测量无法鉴别,阻抗法测红细胞计数仪所见,缺铁性贫血,地中海贫血,正常样本,缺铁性贫血,缺铁性贫血兼有小细胞和低色素,正常样本,轻型地中海贫血,地中海贫血主要是小红细胞,结论,MCV=61.1fLM/Hratio=0.63Diagnosis=IronDeficiency,MCV=66fLM/Hratio=2.05Diagnosis=-Thalassemia,MCV=Normal,G.dOnofrio,etal.ArchPathLabMed1998116:84-89,%Micro/%Hypo0.9:轻型地中海贫血,PLT的分析原理,散射光检测,检测到的低角度散射光被放大30次得到PLT的体积的信号，检测到的高角度的散射光被放大12次得到血小板的折射率信号。通过这些信号血小板被测定。,30次放大,12次放大,转换为体积信号,转换为折折射率信号,低角度（2-3）散射光检测体积,高角度（5-15）散射光检测折射率,流式细胞光散射法计数血小板,红细胞碎片,3大血小板,5影形红细胞,折射指数鉴别血小板和其它干扰因素,PLT报告参数,RBC/Platelets通道的测量原理,参数:PLTMPV,解释:血小板计数平均血小板体积,供实验室内部或研究使用的PLT参数,RBC/Platelets通道的测量原理,参数:LargePLTMPCMPMPCDWPCount-2DPCTPDWPLTNPLTXPLTYPMDWRCount-2DRBC-2DCountRBCFragmentsRBCGhosts,解释:大血小板计数平均血小板成分浓度血小析成分分布宽度在血小板测定中血小板的原始计数血小板压积血小板体积平均分布宽度血小板折射率平均值血小板高角度信号(放大)平均值血小板低角度信号(放大)平均值在血小板测定中红细胞原始计数在血小板测定中红细胞计数红细胞碎片计数红细胞影计数,血小板,碎片,红细胞碎片,影形红细胞,临床实例,网织红细胞分析技术,将红细胞等量球体化将网织红细胞内的RNA染色,网织红细胞的测定原理,细胞化学反应,autoRETIC试剂,RBC,Platelets,RETIC,youngerRETIC,Step1,Step2,网织红细胞散点图,MCVr,CHCMr,ReticHaemoglobinContent,CHr,网织红细胞成熟度IRF,网织红细胞的测定原理,报告参数,参数#Retic%ReticCHr,解释网织红细胞绝对值网织红细胞百分比网织红细胞平均血红蛋白含量,网织红细胞的测定原理,供实验室内部或研究使用的RETIC参数,参数RTCRBCRTCFlatnessRTC%DeadTimeRTC%NoiseMeanAbsorptionABSLowCellcountABSModeRTCValidCells,解释网织红细胞测定中的红细胞计数SumofthesquaredDifferences9xMeanCellCountingRate测定中由于通道忙而不能对别的事件作出响应的时间所占百分比非成熟、网织红细胞区的细胞所占的百分比网织红细胞吸收光直方图中网织细胞群吸收光均值RETICScatterAbs细胞图中低吸收光的细胞计数吸收光细胞群的模式通道检测到的有效信号数,网织红细胞的测定原理,供实验室内部或研究使用的RETIC参数,参数CHCMrMCVmMCVr#NegRBC%NegRBCRETICCount#LRetic%LRetic#MRetic%MRetic#HRetic%HReticIRF-HIRF-M+HRTCMeanXRTCMeanY#RTCCellsAcquired#RTCCellsAnalyzed#RTCGatedCellsSlopeNegativeCells,解释网织红细胞血红蛋白浓度均值成熟红细胞群平均体积网织红细胞群平均体积