一轮复习专题三植物的组织培养技术整理PPT课件

-,1,一、菊花的组织培养1植物组织培养的原理和程序(1)原理：。(2)程序：,植物细胞的全能性,梳理教材主干知识,-,2,有关概念,外植体：愈伤组织：（1）细胞分化：（2）脱分化：（3）再分化：,重难点聚焦,是指用于离体培养的植物器官或组织。,外植体培养一段时间后，通过细胞分裂形成的不定形的薄壁细胞。,是指植物个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上产生稳定性差异的过程。,是指由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，又叫做去分化。,是指脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官的过程。,细胞分化、脱分化和再分化,-,3,脱分化和再分化的比较,qq,qq,qq,qq,qqq,-,4,2植物组织培养的影响因素(1)选材：菊花的组织培养，一般选择。(2)培养基：常用的是，主要包括大量元素、微量元素、有机物，还要添加和两种植物激素。与微生物培养基的比较：(3)其他条件：等条件对于植物组织的培养也很重要。,未开花植株的茎上部新萌生的侧枝,MS培养基,细胞分裂素,生长素,pH、温度和光照,微生物培养基以有机营养为主，而MS培养基则需大量无机营养。,-,5,3.植物激素的影响,生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。不同使用顺序，效果不同,记忆口诀：生前分裂不分化，生后分裂又分化，同时提高分化率。,二者同时使用，用量的比例影响植物细胞的发育方向,记忆口诀：生大根，分大芽，等愈伤。,-,6,4实验操作(1)配制好的培养基要进行。(2)外植体要先用消毒67s，取出后用清洗，再用消毒，最后再用清洗。(3)接种时要始终在进行，每次接种接种工具要用灭菌。(4)在1822的中培养，每日用日光灯光照12h，得到试管苗后移栽。,高压蒸汽灭菌,70%酒精,无菌水,0.1%的氯化汞,无菌水,酒精灯火焰旁,火焰灼烧,无菌箱,-,7,5.无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键（1）必要性：植物材料体积小、抗性差，培养条件要求高。（2）范围：培养基灭菌和外植体的消毒。既要考虑药剂的消毒效果；还要考虑植物材料的耐受能力。,接种培养移栽栽培,1.70%酒精消毒、灼烧,1.打开封口膜、培养间生长几日,2.清洗培养基转移消过毒的蛭石、珍珠岩,幼苗长壮，移栽到土壤.,2.不要倒插,3.每瓶接种68块,-,8,菊花的组织培养的实验操作【回扣教材】菊花植物组织培养的实验操作，归纳如下：1制备MS固体培养基：具体操作是配制各种_、配制培养基、_。2外植体_。3接种：要先消毒_(70%酒精)，所有的接种操作都必须在_旁进行。,母液,灭菌,消毒,工作台,酒精灯,-,9,4培养：_中培养，培养期间_，培养温度控制在_，每日用日光灯光照12h。5_：打开培养瓶封口膜培养_清洗根部培养基移植到消毒蛭石或珍珠岩等环境移栽到_中。6栽培：观察并记录幼苗_，适时浇水、施肥，直至_。,无菌箱,定期消毒,1822,移栽,流水,土壤,生长情况,开花,-,10,【典例精析】【例1】下面关于植物组织培养的叙述，正确的是()A叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞B叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织C通过植物组织培养，可培育出性状更优良的品种D植物体的任何一个体细胞经离体培养都表现出全能性【解析】B错，愈伤组织是经脱分化产生的。C错，植物组织培养属无性繁殖，产生的后代性状一般与亲本性状相同。D错，植物体上的病老细胞一般不再具有全能性。,A,-,11,【典例精析】【例2】在菊花的组织培养操作完成了34天后，观察同一温室中的外植体，发现有的瓶内外植体正常生长，有的瓶内外植体死亡，你认为外植体死亡的原因不可能是()A接种时所用的培养基灭菌不彻底B接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体C愈伤组织形成初期没有给予充足的光照D培养过程中保持温度、pH的适宜，但没有及时调整各种营养物质、激素的比例【解析】愈伤组织形成初期不需要给予光照，这不是导致外植体死亡的原因。,C,-,12,单倍体育种的过程？,花药离体培养（N）,单倍体植株（N）,秋水仙素处理，使染色体翻倍,植株（2N）,特点：1明显缩短育种年限,2后代植株都为纯合子。,正常植株（2N）,月季的花药培养,知识回顾,-,13,花的结构,花托花萼花瓣,雄蕊,花药花丝,雌蕊,柱头花柱子房,知识回顾,-,14,小孢子四分体时期,单核期,双核期,被子植物花粉发育过程,-,15,小孢子母细胞花粉母细胞,小孢子,减数分裂,有丝分裂,花粉管细胞核,生殖细胞核,有分丝裂,2精子,1个,营养细胞,生殖细胞,4个,4个,4个,4个,4个,8个,（小孢子四分体时期,单核居中期,单核靠边期,花粉粒双核期）,被子植物花粉的发育过程,4个,4个,4个,-,16,1、关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（）A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果C、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单核期、双核期等阶段D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，再移到细胞中央,BD,对点训练,-,17,(2)上述两种途径并无绝对界限，主要取决于。,种类及其浓度配比,胚状体：,离体条件下，未经受精，但经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。,2产生花粉植株(1)产生花粉植株的两种途径：,-,18,（一）材料选取,2、通过镜检来确定是否处于适宜的发育期。方法：醋酸洋红法(将染色体染成红色)焙花青-铬矾法(花粉细胞核染成蓝黑色)。,1、从花药看：从花粉看：从花蕾看：,花药（载玻片上）1%的醋酸洋红1滴用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片镜检（花粉粒的细胞核被染成红色）,花药（在卡诺氏固定液中处理20min）取出，置于载玻片上焙花青铬矾溶液染色盖上盖玻片镜检（花粉粒的细胞核被染成蓝黑色）,月季的初花期,完全未开放的,单核期,-,19,注意：选择最合适的花粉发育时期:单核期不选择单核期之前花药原因：花药质地幼嫩，容易破碎；不选择单核期之后花药原因：花瓣开始松动，给材料消毒带来困难困难；挑选单核期花药方法：应当选择完全未开放的花蕾，微生物少，易消毒。,-,20,（二）材料的消毒,5、无菌水冲洗35次,1、花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒,2、无菌水清洗,3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分,4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中24分钟（质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）,-,21,（三）接种和培养,1、灭菌后，要在下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。,3、通常每瓶接种花药，温度控制在左右，。幼小植株形成后才。,2、在剥离花药时，要尽量（否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。,一般经过20-30d培养，花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。若释放出胚状体，则需及时将幼小植株分开。,4、进一步鉴定和筛选：常常会出现染色体倍性的变化,无菌条件,不损伤花药,去除花丝,7-10个,25,不需要光照,需要光照,主要原因是花粉管核和生殖核融合造成的,-,22,植物组织培养和花药培养技术比较,有丝分裂的过程，染色体数量不变。,1.得到的单倍体植株，弱小且高度不育。2、秋水仙素处理，染色体加倍，恢复正常的染色体数，为纯种。,-,23,【回扣教材】1花粉是_的生殖细胞，是由花粉母细胞经过_形成的。2被子植物花粉的发育要经历_时期、_期和_期等阶段，其中单核期又分为_期和_期两个时期，双核期包括花粉管细胞核和_细胞核。,单倍体,减数分裂,小孢子四分体,单核,双核,单核居中,单核靠边,生殖,-,24,3产生花粉植株(即单倍体植株)的两种途径：一是花粉通过_阶段发育为植株，二是通过_阶段发育为植株。这两种途径的区别主要取决于培养基中_的种类及其_的配比。4诱导花粉植株能否成功及诱导成功率高低，受多种因素的影响，其中_与_是主要的影响因素。5选择花药时，一般要通过_来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，最常用的方法有_，但某些植物的花粉细胞核_，需采用_法，这种方法能将花粉细胞核染成_色。,胚状体,愈伤组织,激素,浓度,材料的选择,培养基的组成,镜检,醋酸洋红法,不易着色,焙花青铬矾,蓝黑,-,25,6在使用焙花青铬钒溶液时，需要首先将花药用_处理20min。该试剂的配制方法是将_按体积比为_的比例混合均匀。7花药培养中，特别是通过_形成的花粉植株，常会出现_的变化，因此需对培养出来的植株作_。,卡诺氏固定液,无水酒精和冰醋酸,31,愈伤组织,染色体倍性,进一步鉴定和筛选,-,2