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文档简介
实验一人群中PTC味盲基因频率的分析,一、实验目的:,三、实验材料及方法:,四、操作要求:,五、结果分析:,二、实验原理:,六、参考文献:,一、实验目的,通过对人体遗传性状的分析及基因频率的计算,认识孟德尔定律的普遍意义和选择对改变基因频率的作用。,二、实验原理,根据人类遗传学的研究已知人体的许多性状是按照孟德尔方式遗传的。如人体对PTC(苯硫脲)尝味的能力是由一对等位基因(Tt)所决定的遗传性状。其中T对t为不完全显性。,PTC.,味盲。,是一种白色结晶状有机化合物。由于含有NC=S硫酰胺基而具有苦味。在人群中,正常尝味者的基因型为TT其尝味能力高,能尝出1/750,0001/6.000,000的PTC溶液的苦味:具有基因型Tt的人,尝味能力较低,只能尝出1/480,0001/380,000的PTC,溶液的苦味,而基因型tt的人,只能尝出1/24,000的PTC溶液的苦味,甚至PTC的结晶也尝不出苦味来,这类人在遗传上称为,小资料,小资料,有些研究者从他们的研究数据中发现不能完全的用孟德尔遗传来解释,因而提出其他遗传方式,如:复等位基因(RychkovDraynaetal,2003)。2003年Drayna等通过连锁研究把对PTC敏感的一个主要基因定位与第7号染色体上,第2个基因可能在第16号染色体上。而第7号染色体上负责该性状的主要基因有被确定为TAS2R苦味受体基因家族中的TAS2R38(Kimetal,2003).,PTC尝味的敏感性与某些疾病存在着一定的相关性,如甲状腺肿、糖尿病、青光眼、呆小病、慢性消化溃疡、抑郁症、乃至某些癌症等。研究者发现PTC味盲者更易患结节性甲状腺肿,而先天愚型者中PTC味盲率大大高于正常群体。今年来西欧等国学者利用PTC等位基因进行味觉试验以研究原发育性青光眼的遗传病因,Parr的研究表明PTC尝味者中的抑郁症患者显著高于味盲者。,二、实验原理,有人用阙值法测定,我国黑龙江省1050人的PTC尝味能力,其中味盲共99人,占9.43%,即所测的人群中,比基型频率:,则T基因频率p=1q=10.31=0.69,根据群体遗传学的Hardy-weinberg平衡法则,如果没有其它因素的干扰,在人群中,t的频率将会世代相传不会发生变化。,更多,世界上不同民族与地区的PTC味盲率与隐性基因的频率有很大的差异,世界上味盲值最高在印度,为52.8%,澳大利亚土著也高达49.3%。欧洲的英国、德国、挪威、瑞士及芬兰等人群味盲率在30%左右,南欧的意大利、西班牙人群味盲率只有24%-25%。亚洲的尼泊尔人为22.8%,日本人、韩国人均在8%-15%,中国人味盲率在7.27%-10.13%。黑人中味盲率在3%-4%,而印第安人中味盲率比较低,有的仅有1.2%,甚至为零。,二、实验原理,如果我们假定,某种选择作用对隐性纯合子(tt)不利,使其适合值=0时,则基因(t)频率将会发生改变。改变规律如下表所示:,适应值:指某一基因型跟其他基因型相比较时,能够存活并留下后代的相对能力,适应值=0,即表示100%被淘汰。,二、实验原理,选择后基因(t)的频率:,(1),选择后基因(t)频率的改变量为:,(2),根据(1)式可以预计:,若基因型(tt)的个体的适应值为0,下一代群体中,基因(t)的频率将降到:,二、实验原理,根据(2)式可算得基因(t)频率的改变量:,该结果与直接由:,=q1q0=0.240.31=0.07是一致的。,以上分析说明,选择强有力的作用,使隐性基因频率在一代之后比初始频率降低0.07(7%),于是群体的基因频率的平衡被打破,生物体就会产生某种方式的进化。,三、实验材料及方法,1PTC溶液的配制:,原液:取PTC结晶1.3g,加蒸馏水1000ml,不时摇动,在室温(20)左右12日即完全溶解。,其他13种浓度的溶解度稀释法及PTC含量见附表所列。,2将配制好的14种PTC溶液,分别取若干置于消毒好的滴瓶中。,3若干毫升蒸馏水及洁净滴管。,表:13种浓度的PTC溶液的配制方法,四、操作要求,1受试者坐于椅上,仰头张嘴,实验者用滴管先吸取14号PTC溶液,滴5-10滴于舌根部,令受验者徐徐下咽品味。,2询问受验者能否鉴别此两种溶液的味道,若不能鉴别,或鉴别不准确(如认为PTC溶液的味道是酸、咸、辣或其他说不出药味等等),则再用稍浓的13号溶液重复尝试直至能明确地说出PTC的苦味为止。,3当交验者鉴别某一号溶液时,应当用此号溶液重复尝味三次,三次结果相同才是可靠的。,4测定过程中应将PTC溶液和蒸馏水反复交替给受试者,以免由于受试者的猜想及其他心理作用而影响结果的准确性。,5测定的结果按记录所要求的内容详细记载。,实验建议,实验操作比较简单,测试者要采用一些技巧迷惑受试者,避免使受试者由于心理作用而影响结果的准确性。配液过程所用的烧杯、容量瓶、试剂瓶等应高压灭菌,给受试者滴药液时切记悬空加样,不要碰到受试者,避免交叉感染。,五、结果分析,1按给定的阈值范围将数据作分类统计,首先算出味盲者(tt)基因型频率,然后求t和T的频率。,2证明在随机婚配的情况下,t基因频率是怎样按Hardy-Weinberg法则保持平衡的?,3若便是使tt基因型的适应值=0,按公式(1)及(2)分别计算选择后基因(t)的频率(q1)及其改变量(q)。,4以班为单位统计TT,Tt和tt人数,分析并讨论实验结果,写出实验报告。,平衡群体的判断,若假定你所测试的群体是一个平衡群体,那么平衡群体中上下代之间基因频率,基因型保持不变,所以可以依据基因频率来推算各种基因型频率的理论预期值,再与实际测定结果进行X2检验,即可判
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