洁净室(区)沉降菌检测标准操作规程

. . 名名称称：洁净室（区）沉降菌测试标准操作规程洁净室（区）沉降菌测试标准操作规程共共 6 页页 编号：编号：SOP-QC-002版本号：版本号：00 起草起草:日期：日期： 审核审核:日期：日期： 变更原因：变更原因： 批准批准:日期：日期：执行日期：执行日期： 颁发部门：质量保证颁发部门：质量保证 部部 分发部门：质量总监、质量保证部、质量控制部分发部门：质量总监、质量保证部、质量控制部 目的目的 制定标准的洁净室（区）沉降菌的测试方法，指导沉降菌的测试工作。 范围范围 适用于洁净室（区）沉降菌的测定和验证。 责任责任 QC 微生物室检验员负责洁净室（区）沉降菌的测试，QC 主管和 QA 部门 负责对测试的数据进行统计分析。 程序程序 1.定义 1.1. 菌落：微生物培养后，由一个或几个微生物繁殖而形成的微生物集落，简 称 CFU。 1.2. 沉降菌：通过自然沉降原理收集在空气中的活微生物粒子，通过专用的培 养基，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数。 1.3. 动态测试：洁净室（区）已处于正常生产状态设备在指定的方式下进行， 并且有指定的人员按照规范操作的状态。 2.测试方法 2.1. 测试过程 2.1.1.设备和培养基：恒温培养箱、购买预灌装 TSA 平皿或者自制 TSA 平皿。 2.2. 测试条件 2.2.1.洁净室（区）的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应（无特殊要 求时，温度在 1826，相对湿度在 45%65%为宜）。 2.2.2.风速、压差应在合格范围内。 . . 2.2.3.动态测试。 2.3. 测试方法 2.3.1.将准备好的培养皿按采样点要求放置或放在沉降架上（约 1.0m）。将采样 台面取样位置或采样辅助设施表面消毒，打开培养皿，将培养皿盖置于已 消毒位置，将培养皿置于培养皿盖上，使培养基表面充分暴露后，将培养 皿盖盖上后倒置。 2.3.2.在每一只培养皿上标记好具体的取样位置及取样日期，将所有培养皿在 QC 微生物室进行培养观察。 2.4.培养观察计数 2.4.1.全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养，在 2025培养箱中 培养 3 天，3035培养箱中培养 2 天后观察计数。 2.4.2.每批培养基应有阴性对照试验，检验培养基本身是否污染。可每次选定 2 只培养皿作对照培养。 2.5.计算 2.5.1.平均菌落数= M M1M2Mn n M11 号培养皿菌落数 M22 号培养皿菌落数 Mnn 号培养皿菌落数 n培养皿总数 2.5.2.结果判定 2.5.2.1. 最终结果采用平均值。但每个碟的菌落数亦不得多于标准规定。 2.5.2.2. 如有一个碟的菌落数超过标准规定，平均却符合规定，也以不合格论。 2.5.2.3. 静态测试时，若某洁净室（区）内的平均菌落数超过评定标准，则必须对 此区域先进行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。 2.6.注意事项 2.6.1.若培养皿上有 2 个或 2 个以上的菌落重叠，可分辨时仍以 2 个或 2 个以 上菌落计数。 . . 2.6.2.采取一切措施防止人为因素对样本的污染。 2.6.3.由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正 面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培 养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。 2.6.4.采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔 除。 2.6.5.对于沉降菌测试，符合最少采样点数时，还必须符合最小培养皿数。最 少采样点数与最少培养皿见附表。 2.7.日常监控 2.7.1.对于沉降菌的监控，宜设定纠偏限和警戒限 ，以保证洁净室（区）的 微生物浓度受到控制。应定期检测以检查微生物负荷以及消毒剂的效力， 并做趋势分析。静态动态监控都可以采用此方法。 2.7.2.对于沉降菌的取样频次。如果出现下列情况应考虑修改，在评估以下情 况后，也应确定其他项目的检测频次： 2.7.2.1. 连续超过纠偏限和警戒限 2.7.2.2. 停工时间比预计长 2.7.2.3. 关键区域内发现污染存在 2.7.2.4. 在生产期间，空气净化系统进行任何重大的维修 2.7.2.5. 日常操作记录反映出倾向性的数据 2.7.2.6. 消毒规程的改变 2.7.2.7. 引起生物污染的事故等 2.7.2.8. 当生产设备有重大维修或增加设备时 2.7.2.9. 当洁净室（区）结构或区域分布有重大变动时 2.8. 洁净车间采样点分布图详见洁净区洁净度监控管理规程 。 2.9. 微生物实验室采样点分布图详见微生物实验室环境测试规程 。 相关文件和记录相关文件和记录 序号文件/记录名称文件/记录编号备注 1沉降菌测试记录SOP-QC-002a-00 2洁净区洁净度监控管理规程SMP-QA-015 . . 3微生物实验室环境测试规程 SMP-QA-031 变更变更 /修订记录：修订记录： 原版本生效日期本次变更/修订的原因、依据及详细变更内容 附图：附图： 最少采样点数目最少采样点数目 洁 净 度 级 别 面 积 m2 A 级 C 级D 级 102322 10 20422 20 40822 . . 40 1001642 100 20040103 200 40080206 400 10001604013 1000 200040010032 200080020063 注：对于 A 级的单向流洁净室（区） ，包括 A 级工作台，面积指的是送风口的表面积。对于 C 级以 上的非单向流洁净室（区） ，面积指的是指房间面积。 . . 沉降菌测试记录沉降菌测试记录 编号：编号：SOP-QC-002a-00 测试人： 测试日期： 测试时间： 测试依据： 测试级别： 级