组织与胚胎学绪论

组织学与胚胎学,刘明兮Mingxi.liu,AntonievanLeeuwenhoek,列文虎克,1674年他开始观察细菌和原生动物即他所谓的“非常微小的动物”。他还测算了它们的大小。1677年首次描述了昆虫、狗和人的精子。1684年他准确地描述了红细胞。,1665年，英国科学家胡克（R.Hooke，16351703）使用诞生不久的显微镜观察软木塞切片，首次发现蜂窝状的植物细胞。此后100多年间，许多学者对动植物细胞进行了广泛的观察，但对细胞的内在结构、功能及其在生物体内的地位尚不明了。1838年，德国植物学家施莱登（M.J.Schleiden，18041881）在前人研究成果的基础上提出：细胞是一切植物的基本构造；细胞不仅本身是独立的生命，并且是植物体生命的一部分，并维系着整个植物体的生命。1839年，德国动物学家施旺（T.A.H.Schwann，18101882）受到施莱登的启发，结合自身的动物细胞研究成果，把细胞说扩大到动物界，提出一切动物组织均由细胞组成，从而建立了生物学中统一的细胞学说。,组织学（histology）：研究机体微细结构及其相关功能的科学,细胞(cell)细胞外基质(extracellularmatrix),组织(tissue),上皮组织结缔组织肌肉组织神经组织,器官和系统(organ&system),人体,一、组织胚胎学的研究内容,Microscopicanatomy,（一）组织学研究内容：,生殖细胞,精子和卵子发生的研究,受精,受精和早期胚胎发育的研究,早期胚胎发生和发育,胚胎器官的发育,胚胎发育异常,胚胎学（embryology）：研究人体出生前发生、发育过程及其规律的一门科学,（二）胚胎学研究内容：,受精卵(zygote),胚(embryo)(28w),胎(fetal)(938w),儿(baby),产科学和计划生育解剖学器官位置、形态、变异出生缺陷,意义,二、组织胚胎学研究方法,（一）普通光学显微镜（lightmicroscope,LM）,分辨率：0.2m放大倍数：1000倍,组织切片标本,光学显微镜技术:组织标本制备方法：切片，涂片，撕片，磨片等切片制作过程：取材固定包埋切片染色,H-E染色：苏木精（Hematoxylin）伊红（Eosin）染色,碱性染料,将嗜碱性物质（本身酸性）染成紫蓝色,酸性染料,将嗜酸性物质（本身碱性）染成淡红色,细胞核中的DNA、RNA细胞质中的RNA,细胞质、膜性结构,smear,spreadsection,groundsection,2.其他制片技术涂片(smear)铺片(spreadsection)磨片(groundsection),（二）电子显微镜（electronmicroscope,EM）,分辨率0.2nm,是光镜1000倍所见结构称超微结构（ultra-structure）透射电镜（transmissionelectronmicroscope）观察细胞内部结构扫描电镜（scanningelectronmicroscope)观察组织或细胞表面的立体结构,（1）透射电子显微镜放大倍数几万倍到几十万倍。因此，电镜能观察到细胞的更微细结构。组织标本须用戍二醛或锇酸固定，树脂包埋，切厚5080nm超薄切片，经铅盐等重金属盐染色后镜下观察。电镜下所见结构称为超微结构。又称为电镜结构。,（2）扫描电子显微镜,固定后的标本，在其表面喷镀金，在荧光屏上即可显示细胞或组织表面的立体结构，如细胞表面的突起、微绒毛、纤毛等。,各种显微镜的分辨率与人眼的比较,应用化学反应或物理反应，使细胞、组织的某种化学成分形成有色终末产物，在镜下观察，从而对这种化学成分进行定位、定性和定量的研究。过碘酸-Schiff反应（PAS反应)：过碘酸氧化多糖，形成a-醛基，再与Schiff试剂结合，形成紫红色沉淀物。用于判定多糖的存在部位。过碘酸亚硫酸品红乙二醇基乙二醛基红色化合物,（3）组织化学技术,2、免疫组织化学（immunohistochemistry）利用抗原（antigen,Ag），抗体（antibody,Ab）特异结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。,标记物为荧光素、过氧化物酶或金颗粒,（4）免疫组织化学技术,（三）几种特殊显微镜术1、相差显微镜（phasecontrastmicroscope）2、荧光显微镜（fluorescencemicroscope）3、激光共聚焦扫描显微镜（confocallaserscanningmicroscope）,激光共聚焦,超高分辨率,透射电镜,（六）组织培养（tissueculture）,是将离体的细胞、组织或器官置于培养基中，在无菌和适宜温度及酸碱度条件下进行培养的一种技术