第20章 立克次体 教育学习

立克次体,第20章,主讲人：中华医学检验全书主编北华大学临床微生物学教授海南医学院外聘教授李影林2011年4月,1,优选内容,目的要求,掌握：立克次体的概念、共同特点和生物学性状。熟悉：几种主要致病立克次体的传播媒介及所致疾病，外斐试验的原理和应用。了解：立克次体病的防治原则。,2,优选内容,概念立克次体（Rickettsia）是一类生物学性状介于细菌与病毒之间的，形态与结构与细菌相似，生活要求近于病毒,严格细胞内寄生，并以节肢动物为媒介传播疾病的原核生物界微生物。,第一节概述,3,优选内容,通性1.大小介于细菌与V之间，形态结构与细菌相似（有C壁；二分裂；DNA+RNA；有较复杂的酶系统；对抗生素敏感)2.生活要求近于病毒高度的专性细胞内寄生，需在活C或具活组织的特殊培养基，供给养料才能繁殖。但与病毒的不同点是在宿主C代谢低下时，繁殖发育旺盛。3.在自然条件下，除Q热外，均寄生在多种节肢动物的体内（虱、蚤、蜱、螨等）。或为寄生宿主，或为储存宿主，或同时为传播媒介。4.多为人畜共患。5.对抗生素的敏感性：对多种抗生素敏感，磺胺可刺激其生长。,4,优选内容,5,优选内容,分类,Bergeys鉴定细菌学手册（1994）第9版列为第9部分立克次体目立克次体科对人类致病的有5个属。,立克次体属(Rickettsia)柯克斯体属(Coxiella)东方体属(Orientia)原恙虫病群埃立克体属(Ehrlichia)巴通体属(Bartonella),斑疹伤寒群斑点热群,立克次体(Rickettsia)贝纳柯克斯体(Coxiellaburnetii)埃立克体(Ehrlichia)活巴哈体(Wolbachiapersica)亚群巴通体(Bartonella)亚群日本立克次体(R.japonica)埃菲比体(Afibia)查菲埃立克体(E.chaffeensis)考德里体(Cowdria),遗传学分类,(根据16SrRNA序列分析),6,优选内容,寄生在宿主C内，根据它在细胞内分布的位置不同对鉴别立克次体有一定帮助。普氏散在于宿主C的胞浆中恙虫病靠近核旁成堆排列斑点热胞浆胞核内均可找到Q热柯克斯体在胞浆空泡（吞噬溶酶体）内繁殖,7,优选内容,生物学性状,形态与染色：1.大小介于细菌和病毒之间，均可在光学显微镜下观察到。2.多形性，以球杆或杆状为主。3.有细胞壁，G-，但不易着染，Giemsa染色，被染成紫蓝色，两极浓染。也可用Gimenez法染色。结构：结构与G-细菌相似有细胞壁和细胞膜。细胞壁由肽聚糖、蛋白质、脂多糖和外膜组成；脂质含量高于一般细菌；细胞膜由脂质双层组成，含大量磷脂。DNA+RNA。有微荚膜。核糖体由50S和30S大小亚基组成。培养特性：1.专性细胞内寄生；2.生长速度缓慢；3.二分裂；3.可用细胞培养和鸡胚卵黄囊接种；4.多种立克次体在豚鼠和小鼠体内生长繁殖。,8,优选内容,抗原构造：,3.Ag构造,寒,寒群,9,优选内容,抵抗力较弱,1.耐冷不耐热5630min被灭活，冷冻干燥可保存6个月。2.对常用消毒剂（5g/L石炭酸、75%酒精）敏感。3.对氯霉素、四环素敏感。4.磺胺类药物可刺激其生长。,10,优选内容,致病性和流行环节,流行环节：以节肢动物为传播媒介/储存宿主，啮齿类动物为寄生宿主/储存宿主。所致疾病：人畜共患性疾病。自然疫源性疾病。致病机制：致病物质为脂多糖（内毒素）和磷脂A（破坏红细胞膜引起溶血；促进立克次体从细胞内的吞噬体释放到细胞质中繁殖）。早期病变由内毒素引起，晚期主要是免疫病理所致。疾病过程出现两次菌血症。免疫力：细胞免疫为主。病后可获得持久的免疫力。,11,优选内容,大小：介于细菌和支原体之间,染色：G-常用Giemsa和Giemenez染色,形态：多形态，主要为球杆状。排列不规则,结构：有细胞壁和细胞膜，结构似G-菌,第二节主要致病性立克次体,Macchiavello红色,紫色蓝色,形态结构：,一、立克次体属,（一）普氏立克次体,12,优选内容,培养特性：,专性活细胞内寄生，以二分裂方式繁殖常用培养方法：动物接种、鸡胚卵黄囊接种及细胞培养,抵抗力：1.与一般细菌繁殖体相似。对热敏感,耐低温和干燥。2.5石炭酸和来苏儿可灭活。3.对四环素、氯霉素、土霉素等药物敏感磺胺类药物能促进其繁殖,基因组：MadridE株染色体由1111523bp组成为环形DNA。,13,优选内容,这里值的提出的是斑疹伤寒等立克次体具有的耐热多糖Ag与变形杆菌的某些菌株OX2、OX19、OXK有共同Ag，可发生交叉反应。因此，可利用这些变形杆菌代替有关立克次体做凝集反应，以检查人或动物血清中的相应Ab这种交叉凝集反应称为外-斐（Weill-Felix）反应。,立氏立克次体,+,+,贝纳柯克丝体,-,-,-,14,优选内容,致病物质,内毒素：与肠道杆菌内毒素相似磷脂酶A：溶解吞噬体膜微荚膜样黏液层立克次体的直接破坏：在血管内皮细胞中繁殖血管通透性增加,血压降低，休克。抗原抗体复合物：血管炎(皮疹),对抗宿主的免疫作用,15,优选内容,致病机制,1.传播途径,16,优选内容,传染源：病人传播媒介：体虱,人虱,人,人虱,人,叮咬（抓伤接种感染）、呼吸道吸入、眼结膜,病后有持久免疫力,普氏立克次体流行性斑疹伤寒（虱传斑疹伤寒）的病原体,发热、头痛、肌痛、皮疹、淋巴结肿大、皮肤虫咬溃疡（焦痂）、眼结膜充血、DIC、休克。,17,优选内容,典型症状：黑色焦痂，恙螨幼虫叮咬处先出现红色丘疹，成水疱后破裂，中央溃疡而成,18,优选内容,微生物学检查法,1.标本的采集（1）病人血液标本分离立克次体或做免疫学试验。(2)血清学诊断，需在病程早期及恢复期分别采集血清（即双份血清）试验。（3）活检或尸检材料：采集野生小动物和家畜器官及节肢动物等供流行病学调查用。,19,优选内容,1.标本直接检查(1)直接镜检意义不大（因立克次体量太低）(2)免疫荧光检测多用脏器标本(3)核酸检测PCR敏感性高，早期诊断，鉴别流行病调查均有意义。2.分离培养(1)动物接种分离斑疹伤寒立克次体常用雄性豚鼠。(2)活检标本（皮肤、组织病变）鸡胚卵黄囊或细胞培养，用免疫学试验加以鉴定。,检验方法,20,优选内容,(1)外斐反应(2)间接免疫荧光（IFA）试验常用(3)ELISA:间接法常用，捕捉IgM对早期诊断更有价值。(4)补体结合试验（CF）方法繁琐敏感性不如IFA和ELISA，但特异性强。常用于Q热诊断。(5)其他试验如微量凝集（MA）、间接血凝（IHA）、乳胶凝集（LA）等也有应用。,3.抗体检测,21,优选内容,防治原则,灭鼠、灭蜱、灭恙个人防护特异预防：尚未有理想的疫苗。特异治疗：氯霉素、四环素、强力霉素。,22,优选内容,（二）斑疹伤寒立克次体,生物学性状基本同普氏立克次体。但链状排列少见。,致病性和免疫性,传播媒介：鼠蚤、鼠虱储存宿主：啮齿类,鼠,鼠蚤,鼠虱,鼠蚤,鼠,人虱,人,人,人虱,发病（较轻）,又称为莫氏立克次体,引起地方性斑疹伤寒,23,优选内容,微生物学检查法基本同普氏立克次体,接种雄性豚鼠腹腔，可出现发热，同时伴有明显的阴囊红肿和鞘膜反应（-）,24,优选内容,防治原则,1.改善居住条件。2.提高民族素质，讲究个人卫生。3.灭虱、灭蚤和灭鼠。4.接种疫苗。5.治疗原则同流行性斑疹伤寒。,25,优选内容,斑点热群立克次体,斑点热的病原体,传播媒介：蜱、野生动物、家禽储存宿主：蜱,家禽、鼠蜱卵蜱人家禽、鼠,26,优选内容,微生物学检查,1.标本的采集：2.分离培养：（1）动物接种：（2）细胞培养:（3）卵黄囊接种。3.血清学检测：采取双份血清补体结合反应群特异性免疫荧光种特异性外斐反应：非特异性4.早期快速诊断：PCR,27,优选内容,二、恙虫病立克次体,恙虫病立克次体在宿主细胞内近核内（姬姆萨染色）,生物学性状,形态染色,短杆状法染色呈暗红色，其他染色特性同普氏立克次体。结构：无肽聚糖、脂多糖和微荚膜样黏液层。培养特点：对小白鼠不致病。可在鸡胚卵黄囊和传代细胞中生长。抵抗力：在外界环境中较其他立克次体低。,恙虫病立克次体又叫东方立克次体（R.orientalis）是引起恙虫病的立克次体。,28,优选内容,致病性,.传播媒介及储存宿主恙螨既是传播媒介，又是储存宿主。恙虫病立克次体在恙螨体内可经卵传代.主要流行地区主要流行于东南亚，西南太平洋岛屿。我国：东南和西南特别是沿海各省、自治区如台湾、福建、浙江、江苏、广东、广西。,29,优选内容,恙螨在丛林杂草或河流沿岸杂草中生活,叮咬鼠或其他动物,卵成虫稚虫幼虫幼虫稚虫成虫卵,第二代叮咬人或其他动物,.传染过程,恙虫病是一种自然疫源性疾病。,（1）传染源：主要流行于啮齿类动物，野鼠、家兔感染后多无症状，但体内长期保留病原体故为主要传染源。此外兔类、鸟类也能感染或携带恙螨而成为传染源。,人畜进入疫源地也受感染。叮咬处先出现红色丘疹水疱破溃中央溃疡形成黑色焦痂。,30,优选内容,典型症状：黑色焦痂，恙螨幼虫叮咬处先出现红色丘疹，成水疱后破裂，中央溃疡而成,病后有较持久的免疫力,31,优选内容,三、埃立克体属,（一）传播媒介：蜱，患埃立克体病宠物如犬、猫也可通过节肢动物传染给人。（二）致病性查菲埃立克体人类病原性埃立克体腺热埃立克体嗜吞噬细胞埃