专题3、生物植物组织培养技术课件(视导课).ppt

,专题3植物组织培养技术,（一）植物组织培养的基础知识（二）实验操作过程（三）影响植物组织培养的因素,1、植物组织培养的基本概念(1)概念:在无菌培养的条件下，将离体的植物器官（根，茎，叶，花，果实等）、组织（形成层，花药组织等）、细胞（体细胞，生殖细胞等）以及原生质体等培养在人工配制的培养基上，并给予适当的培养条件，使其长成完整植株的过程。,(2）原理：,植物细胞具有全能性。,(3）优点：,P31,离体的植物器官、组织细胞,根、芽,植物体,脱分化避光,再分化光照,愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程,一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。,2、植物组织培养的基本过程：,例如：1）菊花组织：嫩枝愈伤组织根、芽植株,愈伤组织,高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。,花粉,胚状体,愈伤组织,从芽,生根,移栽,分化,再分化,诱导,脱分化,2）花粉植株的培养途径(P38),这两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于：,培养基中植物激素的种类及浓度配比,与合子胚类似,2、下面关于植物组织培养的叙述，正确的是()A叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞B叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织C通过植物组织培养，可培育出性状更优良的品种D植物体的任何一个体细胞经离体培养都表现出全能性,A,对点练习1,1、培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是:,植物组织培养,3、下列有关植物组织培养的叙述，正确的是()A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子D.植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得,二、实验操作,培养基的配制,材料的选择与消毒,接种、培养,移栽、栽培,1）培养基的配制（P33）,营养成份：常用的培养基是_，主要成分包括：_、_、_及_等。在配制好的培养基中，常常需添加和两种植物激素。,一般先配制成培养基母液储存在4冰箱中，使用时根据浓缩比例，加水稀释。,启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。,使用顺序影响结果：,使用比例影响发育方向：,（记忆口诀）生前一分（裂），生后两分，同时高分（化率）。,记忆口诀：生大根，分大芽，等愈伤。,配制：,MS培养基,大量元素,微量元素,有机物,蔗糖,生长素,细胞分裂素,欲有利于根的分化，植物激素的用量比例应为_。,生长素多于细胞分裂素,2）取材及消毒,（1）取材：依据植物的生理状态选择a、菊花组织：原因：b、月季花药：原因：P39确定花粉发育时期的最常用的方法是将花粉细胞核染成色，染色剂呈性。此外还可用法，染成色。,生长旺盛的嫩枝,单核期的花粉（完全未开放的花蕾）,生理状态好，容易诱导脱分化和再分化,醋酸洋红,红,碱,焙花青-铬矾法,蓝黑,（2）消毒：,无菌水清洗,_溶液消毒,_消毒,_清水,1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉,70%的酒精,0.1%氯化汞,无菌水,3）接种、培养,（1）接种操作要求：,a、接种时要始终在旁进行，对于接种工具要用灭菌。菊花组织的茎段插入培养基时_。,酒精灯火焰,灼烧,不要倒插,b、灭菌后的花蕾、在无菌条件下除去_立即将花药接种到培养基上。剥离花药时，尽量不损伤花药，同时彻底去除花丝。,萼片和花瓣,（2）培养条件,菊花组织：18-22，每天日光灯照12h；花药培养：25，早期不需要光照，形成幼小植株后才需要光照。,4）移栽、栽培,移栽：栽培,去净培养基，可先在灭过菌的珍珠岩或蛭石上培养使根系发达再转移到土壤中。,(1)植物材料选择：,三、影响植物组织培养的因素,生长旺盛的的部位、单核期的花粉,（2）培养基的组成：,植物激素：,（3）外界因素:pH值、温度，光照，通气状况等,（4）无菌技术：外植体消毒、培养基灭菌、使用器械的灭菌等。,生长素、细胞分裂素,1、下图表示菊花的嫩枝和月季的花药离体培养的过程，请回答：,1)月季的花药培养过程中，花粉植株的形成除图中所示途径外，还可以通过_阶段发育而来，这两种途径的差别主要取决于_。,胚状体,培养基中激素的种类及其浓度配比,对点练习2,(2)对菊花来说，要选择生长旺盛的嫩枝来进行组织培养，其原因是_；对月季来说，适宜花药培养的时期是_期，为确定花粉是否处于该时期，最常用的镜检方法是_。(3)在培养嫩枝组织和花药的培养基中都要加入一定的植物激素，常用的植物激素有_。(4)两种植物材料的培养在进行接种时应注意：接种室要消毒；材料可用_进行浸泡，取出用无菌水冲洗后，再用0.1%的氯化汞溶液消毒；接种操作要在_进行；接种完毕后立即盖好瓶盖。(5)图中花粉植株属于_倍体，要使其能繁殖后代可采取的措施是_。,生理状况好，容易诱导脱分化和再分化,单核,醋酸洋红法,生长素和细胞分裂素,70%的酒精,酒精灯火焰旁,单,用一定浓度的秋水仙素处理幼苗,2、科学家将分离得到的成熟的胡萝卜韧皮部细胞进行如下处理，最终由单个细胞发育成了完整的新植株。请回答下列问题：说明:（1）科学家所用的这种生物技术叫做_。该技术表明，当植物细胞处于离体状态时，在一定的营养物质、_和其他外界条件的作用下，可能表现出_，发育成完整植株。（2）图中B过程称为_。通过B过程产生的愈伤组织细胞与根韧皮部细胞形态结构_（相同/不同），其根本原因是_。,植物组织培养,植物激素,全能性,脱分化,不同,基因的选择性表达,（3）某课外小组同学用愈伤组织同时进行了两组实验：甲组培养基中含3%的蔗糖，乙组培养基中不含蔗糖，经灭菌后接种，每组实验再分成两个小组，分别在光下和暗处培养。1个月后，观察植物体生长、分化情况，结果如下表：,由此得出的结论是：_；_。,愈伤组织生长、