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文档简介

黔北【黔北麻羊基因克隆与生物信息学分析】 摘要:选择与羊同源性较高的牛基因组序列设计特异性引物,提取黔北麻羊脾脏总,通过-技术对基因进行克隆测序及序列分析。结果表明,成功克隆了黔北麻羊基因,其序列 ,登录号 ,编码个氨基酸。生物信息学分析表明,黔北麻羊基因蛋白二级结构螺旋占8,延伸链占,无规则卷曲占;没有跨膜螺旋结构域且没有糖基化位点。 关键词:黔北麻羊;基因;克隆;生物信息学分析 :; : :0439114(12)153362-04 cDNA Sequence Cloning of RERGL Gene of Qianbei Ma Goat and Bioinformatics Analysis -, , -, -, -, - ( , , , , ) : () , ; the 8 : ; ; ; 基因属于超家族基因。超家族是一类重要的功能蛋白。它们介导生长因子、细胞因子和多种细胞外信号的通路,对细胞生长、分化、存活、增殖等多种功能的调节发挥重要作用。超家族在细胞信号转导中可作为信号转换器或分子开关,它们通过与结合(激活态)和结合(失活态)的转换导致信号的转导或终止。与部分超家族成员的同源性可达。其蛋白与( )蛋白功能高度相似。 黔北麻羊是贵州省三大优良山羊品种之一。其历史悠久,具有耐粗饲、繁殖率高、产肉性能良好、膻味轻、肉鲜美可口、板皮品质优良等优点,为当地群众所喜养。罗卫星等对黔北麻羊的肉用性能和肉质特征进行研究,表明黔北麻羊肉用性能和肉质性质良好,具有很好的开发价值。在分子水平上,关于黔北麻羊基因的研究国内外尚未见报道。本研究以黔北麻羊为研究对象,通过分子克隆技术对基因进行克隆后测序,并对结果进行生物信息学分析,以期为进一步开展黔北麻羊基因的表达调控以及与生长性状相关分析研究提供一定的理论基础。 材料与方法 材料 从贵州省习水县采集成年黔北麻羊的脾脏,液氮中保存备用。 试剂和载体 提取试剂盒()购自公司;培养基;氨苄青霉素()( );缓冲液;和琼脂糖购自公司;- 、反转录试剂盒()、酶和购自大连公司;菌种、 、去离子甲酰胺、引物及其他常用试剂均购自上海生工生物工程技术服务有限公司。 提取前的准备工作 玻璃制品用 的浸泡过夜,用自来水反复冲洗,再用去离子水冲洗遍, 烘烤 ;研钵、电泳槽等用的水冲洗浸泡,由于未灭活的对反应有影响,可用 的处理;头、管用 的水浸泡过夜,高压灭菌使失活,烘干备用;提取前在超净工作台紫外照射 。 总的提取及质量、浓度测定 根据提取试剂

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