医院感染实验课ppt课件

医院感染的标本检验和环境卫生学监测,长海医院实验诊断科临床微生物实验室,1,.,实验目的,熟悉医院感染相关标本的检验流程；熟悉医院感染环境卫生监测的基本内容；掌握医院感染环境卫生监测的标本采集、培养以及结果分析的方法。,2,.,实验内容一,临床标本的采集和接种1、咽拭子（每组采1份）轻柔、迅速地擦拭两腭弓、咽及扁桃体接种血平板+麦康凯平板+流感嗜血杆菌巧克力平板2、尿标本（每组一份）定量接种(10l)接种血平板+麦康凯平板,3,.,实验内容二,医院环境监测标本的采集和检验1、空气培养标本M-H平板，每组3块2、物品培养标本每组采2份标本3、手消毒效果监测标本每组2位同学,4,.,空气培养标本采集,沉降法布点方法:室内面积30m2,设内,中,外对角线3点,内,外点布点部位距墙壁1M处;室内面积30m2,设4角及中央5点,4角的布点部位距墙壁1m处。将普通营养琼脂平板(直径为9cm)放在室内各采样点处,采样高度为距地面1.5m采样时将平板盖打开,扣放于平板旁,暴露5min,盖好立即送检。,5,.,空气培养标本结果判定,平板暴露法结果计算公式:细菌总数(cfu/m3)=50000N/(AT)=156N式中A为平板面积(64cm2);T为平板暴露时间(5min);N为平均菌落数(cfu)前提：100cm2平板空气中暴露5min相当于10L空气,6,.,物体表面标本采集,采样方法:采样面积100cm2取全部表面，100cm2物体采集100cm2,用浸有无菌肉汤的棉拭子1支,横竖往返均匀涂擦5次,并随之转动棉拭子,剪去手接触部位后,将棉拭子投入3ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内.门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样取0.25ml接种到MH平板，用接种环涂匀后放35培养箱,7,.,物体表面标本培养结果判定,细菌数（cfu/cm2）=（平板菌落数稀释倍数）/采样面积（cm2）=12平板菌落数/采样面积（cm2）稀释倍数：3ml/0.25ml12,8,.,手部微生物学监测标本采集,采集材料无菌洗脱液A（吐温1g，蛋白胨10g，氯化钠8.5g，蒸馏水1000ml)-用于普通洗手和酒精类消毒剂.无菌洗脱液B（吐温1g，蛋白胨10g，氯化钠8.5g，亚硫酸钠2g，蒸馏水1000ml)-用于含碘消毒剂.无菌洗脱液C（吐温1g，蛋白胨10g，氯化钠8.5g，软磷脂2g，蒸馏水1000ml)-用于含氯己定消毒剂.无菌肉汤增菌液-用于普通洗手,9,.,10,.,手部微生物学监测标本采集,采样方法：直接按压法被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌脱洗掖的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次，并随之转动棉拭子，剪去操作者手接触部分，将棉拭子投入相应的无菌脱洗液试管内，立即送检。,11,.,手部采集标本结果判定,细菌数（cfu/cm2）=（平板菌落数稀释倍数）/60（cm2）=40平板菌落数/60（cm2）=2平板菌落数/3（cfu/cm2）洗脱液10ml，取0.25ml，稀释40倍,12,.,注：不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其他致病性微生物。,13,.,四区接种,14,.,15,.,注意事项,无菌操作使用接种环、棉签及时封口使用后的物品放入黄色生物危害垃圾袋注意生物安全保持教室安静,16,.,流程,Part2病房空气培养标本采集病房物品表面标本采集物体表