纤维素最新PPT演示课件

课题3分解纤维素的微生物的分离,1,教学目标:,1、知道纤维素酶的种类及作用,2、初步掌握从土壤中分离出分解纤维素的微生物的实验方法,2,阅读书页课题背景、纤维素是什么化合物？、构成纤维素的基本单位是什么？、为什么说纤维素是世界上含量最多的多糖类物质。、纤维素为什么能被某些微生物分解。,课题背景,3,课题背景,、草食性动物是怎样消化食物中纤维素的？,4,草食性动物肠胃中的共生微生物。除自然环境中存在分解纤维素的微生物外，在草食性动物等的消化道内，也共生有分解纤维素的微生物，其原理也是产生纤维素酶而分解纤维素，而人没有分解纤维素的能力。,5,课题背景,、纤维素酶在生产中有什么用？,提高出酒率去除植物细胞的细胞壁处理秸秆饲料，增加饲料转化率利用秸秆生产酒精处理服装面料，如生产牛仔裤,6,棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物，木材、作物秸秆中也含大量的纤维素。纤维素的分解需要在纤维素酶的催化作用下完成，请完成下列过程：,基础知识,（一）纤维素与纤维素酶,7,葡萄糖苷酶,(一)、基础知识,纤维素酶是一种_，它包括_、_和_，具有催化分解纤维素的作用,复合酶,C1酶,CX酶,8,下列生物能分解纤维素的是（）人兔牛蘑菇纤维杆菌,A.B.,C.D.,C,9,纤维素酶活性的测定实验：,10,在一支试管中添加纤维素酶，另一支试管不添加纤维素酶；尽管醋酸醋酸钠缓冲液用量不同，但都能维持相同的pH。,思考1实验分析：P27的小实验是如何构成对照的？,11,练一练：,1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是,A.纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B.纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C.纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D.葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖,12,(二)、纤维素分解菌的筛选,方法,-选择培养基,以纤维素为主要碳源,-刚果红染色法,红色复合物,红色消失，出现透明圈,13,2.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是,A.刚果红能与纤维素形成红色复合物B.刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C.刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D.若培养基上产生了透明圈，则说明已筛选出了纤维素分解菌,14,(三)、实验设计,土壤取样,选择培养,梯度稀释,将样品涂布到鉴别培养基,挑选菌落,微生物培养,15,三、实验操作,土壤取样,选择培养,梯度稀释,将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上,挑选产生透明圈的菌落,16,本实验流程与课题2中实验流程有哪些异同?,前者直接稀释涂布在以尿素为唯一N源的选择培养基上，直接分离得到目的菌落；后者先进行选择培养，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液稀释涂布到鉴别培养基,17,土壤取样,取样的环境是怎样的，作出这种选择的理由是什么？,选择纤维素丰富的环境，如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等等。生物与环境的互相依存关系，在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境,18,将滤纸条埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸条应该埋多深？,将滤纸条埋在土壤中可以使纤维素分解菌聚焦在滤纸上，应该埋在cm左右的腐殖质土壤中。,19,酵母膏是采用新鲜酵母为原料，经酵母酶解自溶、分离过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物，易溶于水。酵母膏富含蛋白质、氨基酸类、肽类、核苷酸、B族维生素、微量元素。主要作用是补充氮源和提供微生物生长的各种维生素及氨基酸等生长因子。,水解酪素：微生物培养基的氨基酸氮源，由酪蛋白水解得到，酪蛋白水解后富含21种氨基酸，氨基酸种类齐全。,选择培养,20,1、纤维素分解菌选择培养基属于_（固体、液体）培养基，原因是_,【资料二】选择培养,阅读资料二“选择培养基”，回答以下几问题：,液体,没有添加琼脂,21,2、该培养基对微生物_（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是_。,以纤维素粉为主要碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖,具有,22,若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是将_改为_。,3、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用？,葡萄糖,纤维素粉,23,思考2实验流程中“选择培养”的目的是什么？,其目的是增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。,24,旁栏思考题为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。,25,经过选择培养后，培养基中是否只有纤维素分解菌？,26,选择培养操作方法：,将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下震荡培养12天，直至培养液变浑浊。也可重复选择培养,27,按照课题1的稀释操作方法，将选择培养后的培养基进行等比稀释，稀释最大倍数到106,梯度稀释,将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上,28,鉴别纤维素分解菌的培养基,(水溶性羧甲基纤维素钠),29,【资料三】刚果红染色法阅读教材页,方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应,方法二：在倒平板时就加入刚果红,30,方法一中NaCl溶液的作用？,思考：,漂洗作用，洗去与纤维素结合不牢的刚果红，以免出现的透明圈不够清晰。,31,颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用,操作繁琐，刚果红会使菌落之间发生混杂,操作简便，不存在菌落混杂问题,产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈，有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈。,思考：这两种方法各有哪些优点与不足,32,挑选产生透明圈的菌落,挑取产生明显的透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在300C370C培养，可获得纯培养。,33,为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行_实验，纤维素酶的发酵方法有_发酵和_发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的_含量进行定量测定。,课题延伸,发酵产纤维素酶,液体,固体,葡萄糖,34,分解纤维素的微生物的分离,纤维素酶,种类、作用,刚果红染色,筛选原理,实验设计,土壤取样,选择培养,涂布培养,鉴别培养,后置染色法前置染色法,富含纤维素土壤,增大分解菌含量,染色鉴别,分离出分解菌,课堂总结,35,D,1、下列材料中纤维素含量最高的是()A杨树B小麦C玉米D棉花,36,C,2、纤维素酶能够分解()A纤维素的微生物B淀粉的微生物C纤维素D淀粉,37,B,3、刚果红能与哪项物质形成红色复合物()A纤维二糖B纤维素C葡萄糖D麦芽糖,38,B,4、寻找纤维素分解菌应到()A湿润的环境中B富含纤维素的环境中C富含无机盐的环境中D池塘中,39,D,5、纤维素分解菌的选择培养基有选择作用，原因在于其含有()ANaNO3BKClC酵母膏D纤维素粉,40,A,6、下列哪种生物能产生纤维素酶()A纤维素分解菌B牛C羊D兔,41,D,7、选择培养时应将锥形瓶固定在()A桌子上B温箱里C窗台上D摇床上,42,B,8、选择培养的结果