硅胶薄层色谱板的制备和硅胶色谱柱的填装_第1页
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文档简介

硅胶薄层色谱板的制备和硅胶色谱柱的填装,天然药物学,一、实验目的,掌握硅胶薄层色谱板的制备方法。掌握硅胶色谱柱的填装方法。,二、原理及应用,吸附色谱。硅胶薄层板可用于化合物定性与定量。硅胶色谱柱可用于化合物分离和纯化。,装置图（一）,薄层色谱,层析缸,薄层板,装置图（二）,溶剂,石英砂或固定相,硅胶,砂芯或棉花,柱色谱装置,关于薄层色谱和柱色谱,相同点：薄层色谱和柱色谱都属于液固吸附色谱，都是经过在吸附剂和展开剂（洗脱剂）之间的多次吸附溶解作用，将混合物中各组分分离成孤立的样点，实现混合物的分离。,不同点：,薄层色谱：是将吸附剂涂布在玻璃板上，形成薄薄的平面涂层。干燥后在涂层的一端点样，竖直放入一个盛有少量展开剂的有盖容器中。展开剂接触到吸附剂涂层，借毛细作用向上移动。,柱色谱：是将吸附剂装于柱中，当待分离的混合物溶液流过吸附柱时，各种成分同时被吸附在柱的上端。当洗脱剂流下时，由于不同化合物吸附能力不同，往下洗脱的速度也不同，从而达到分离的目的。,三、实验步骤,、硅胶薄层色谱板的制备1、把一份硅胶H和三份0.75%CMC-Na水溶液（M:V）溶液置研钵中充分研匀。2、将玻璃板置一水平的平面上，取适量硅胶和CMC-Na混合物倒入玻璃板上，轻轻震动使混合物在玻璃板上铺匀，阴干。3、把阴干好的硅胶板在105的烘箱中烘30min。4、待板凉至室温后，至干燥器中保存。,、硅胶色谱柱的填装1、将一小团脱脂棉放于色谱柱底部。2、将硅胶慢慢倒入色谱柱中，轻轻敲击柱子外侧。3、打开活塞，将洗脱剂慢慢加入柱子中流过柱体，直至整个柱床全部润湿。关闭活塞备用。,三、实验步骤,四、注意事项,硅胶和CMC-Na要充分研匀，没有硅胶团和气泡。混合物的量要适中，不能铺的太厚。装柱时硅胶一次性全部加入。在洗脱剂没全部流
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