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2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体,乙肝病毒模式图,一般来说,医院如何检测人体内是否存在乙肝病毒?检测抗原乙肝病毒用什么检测?相应的抗体,思考题,诱导方式,物理法:离心、振荡、电融合技术,化学法:聚乙二醇,生物法:灭活的仙台病毒,一、动物细胞融合,鼠B淋巴细胞,鼠骨髓瘤细胞,人工诱导,杂交瘤细胞,动物细胞融合过程,动物细胞融合技术的意义和应用,植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较,二、单克隆抗体,单克隆由一个细胞经过无性繁殖(多次有丝分裂)形成的一个细胞群,叫一个克隆,即单克隆。,单克隆抗体由一个效应B淋巴细胞经过无性繁殖形成的一个细胞群产生的化学性质单一,特异性强的抗体,即单克隆抗体。,(1)传统抗体生产方法:,抗原,动物体内,抗体,(抗体不纯),筛选单一效应B细胞,不能增值,产生大量抗体,特异性差、纯度低;产量低、反应不够灵敏。,(2)单克隆抗体制备过程:,设计方案:,一个B淋巴细胞,小鼠骨髓瘤细胞,杂交瘤细胞,+,化学性质单一、特异性强的抗体。,特性:,思考问题,1、本过程利用了哪些原理?,免疫原理,细胞融合原理和动物细胞培养原理,这样融合成的杂交瘤细胞,继承了双亲细胞的遗传物质,不仅具有B细胞分泌抗体能力,而且还有无限增殖的本领,因而可以获得大量单克隆抗体,2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合?,单克隆抗体的应用:,疾病的诊断、治疗和预防,优点:特异性强,灵敏度高,优越性强,临床应用:单抗探针,正在研究:用单克隆抗体治疗癌症,动物细胞融合,单克隆抗体制备,过程:,原理:细胞膜的流动性,意义:突破有性杂交局限,使远缘杂交成为可能,应用:主要用于制备单克隆抗体,制备过程:,特点:特异性强,灵敏度高,产量大,应用:用作诊断试剂,治疗疾病和运载药物,1、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是()A结果是相同的B杂种细胞的形成过程基本相同C操作过程中酶的作用相同D诱导融合的手段相同,B,2、单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是()淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞ABCD,C,3、单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是()A由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合B由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成C由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成D由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成,D,4、生产单克隆抗体时,在培养液中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞,因为该试剂()A.能抑制淋巴细胞和杂交瘤细胞的DNA复制B.能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活C.选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制D.能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质合成,C,5、科学家们用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交瘤细胞,经培养可产生大量克隆抗体,与骨髓瘤细
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