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文档简介
交叉配血试验,主讲人:,交叉配血试验,一、实验目的二、实验原理三、实验步骤四、方法学局限性五、临床意义六、临床新进展,实验目的,掌握凝聚胺交叉配血试验的原理、方法、结果判读熟悉交叉配血试验的临床意义,实验原理,交叉配血试验分两管:主侧:受血者血清+供血者红细胞次侧:供血者血清+受血者红细胞,实验原理,红细胞表面带有大量的负电荷,悬浮在电解质溶液中,会吸引大量阳离子,红细胞则被扩散的双层离子云所围绕,形成zeta电位。,实验原理,凝聚胺技术首先利用低离子溶液(LIM)降低介质的离子强度,减少红细胞周围的电子云,如有红细胞抗原相应的血清抗体存在,则可促进红细胞抗原与血清抗体的特异结合。,实验原理,再加入凝聚胺溶液,溶解后产生很多正电荷,中和红细胞表面带有的负电荷,红细胞zeta电位降低,缩短红细胞距离,无论是否有红细胞抗原相应的血清抗体存在,主、次侧管均可产生非特异性聚集。,实验原理,最后加入悬浮液,具有中和凝聚胺阳离子的作用,使正常红细胞的非特异性凝集散开,红细胞抗原与相应血清抗体的特异性凝集仍然存在。,实验步骤,一、取出供血者血浆及红细胞,并将冰冻血浆放入37温箱解冻15分钟。,实验步骤,二、受血者抗凝全血标本离心备用,3000r/min,5min,实验步骤,三、将受血者血浆2滴加入主侧管,红细胞1滴加入次侧管,实验步骤,四、剪下供血者血袋上的血辫,将供血者红细胞1滴加入主侧管,血浆2滴加入次侧管,实验步骤,五、在主次侧各加入低离子溶液各0.65毫升,混合均匀。,实验步骤,六、在主、次侧管分别加入2滴凝聚胺溶液,混匀后3400r/min离心10秒,弃去上清,观察红细胞的非特异凝集现象。,弃上清,实验步骤,七、最后各加入悬浮液2滴,轻轻转动试管混匀并观察结果。,实验步骤,八、如果在60秒内,主、侧管凝集均散开,说明是由凝聚胺溶液引起的非特异性凝集,配血相合。,实验步骤,九、如果凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应,配血结果不相合,如有疑问,可进一步镜检确认。,实验步骤,十、同时对受血者ABO和RH血型使用玻片法进行复查。,实验步骤,十一、对受血者ABO和RH血型使用玻片法进行复查。,临床意义,一、保证输血安全二、发现亚型和不规则抗体,方法学局限性,对罕见不规则抗体抗K敏感性低!,临床新进展,流式细胞术基因分型技术卡式微柱凝胶法,卡式微柱凝胶法,卡式微柱凝胶法,戴安娜全自动配血系统,卡式微柱凝胶法可实现自动检测,二实验原理,血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中,红细胞膜上抗原分A和B两种抗原,而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清(含有抗B抗体)与标准B型血清(含有抗A抗体)中,观察有无凝集现象,从而测知受试者
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