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文档简介
心肌梗塞心肌损伤脑梗塞,冠状动脉结扎过程:,大鼠, ip 戊巴比妥钠45 ml/kg麻醉,气管内插管,接人工呼吸机(65次/分, 8-10 ml/次)。连接微电脑生理记录仪,描记正常II导联心电图(ECG)。沿前正中线切开胸骨前皮肤,暴露2-5肋,连同肋骨一起结扎肋下动脉,紧靠胸骨旁左缘处用纯头剪刀剪开5、4、3肋。 暴露心脏,轻捏右胸廓,抵压左胸背部肋骨挤出心脏。找到肺动脉圆椎,拨起左心房(耳)根部。 结扎冠状动脉:用5/0号丝线,在肺动脉圆椎右缘、平左心耳下缘1-2 mm处冠状静脉走行处浅层心肌用小圆针穿线、结扎。记录结扎时间。 将心脏纳入胸腔,缝合切口,停止人工呼吸。 记录ECG,观察S-T段变化。 缺血6 小时时,再次记录ECG。取下心脏,用NBT染色法测心肌梗塞范围,心室内取血,离心制备血清,用比色法测血清乳酸脱氢酶(LDH)含量。,心梗测定指标,心电图(ECG)记录:用微电脑生理记录仪记录结扎前、结扎后10 min、结扎后6 h的II导联ECG,观察S-T段变化。心肌梗塞范围测定:于结扎后6 h取下心脏,剪去心房,将心室横切为3-4片,立即置0.5% NBT(溶在0.1 mmol/L磷酸缓冲液中, pH 7.4)溶液中,37 孵2 min,以拒染部分为梗塞区,蓝染部分为未梗塞区( 见图1),剪下拒染部分心肌,称重,计算该部分心肌占心室全重的%,作为心肌梗塞范围,如下式:心肌梗塞范围/%= 100%,冠状动脉结扎部位,大鼠心梗NBT染色,大鼠心梗ECG变化,心室内压及心室收缩功能曲线,脑缺血模型的复制方法,颈外血管阻断法( 双侧颈总动脉夹闭, 沙土鼠结扎一例颈总动脉,双侧颈总动脉夹闭加放血,双侧颈总动脉夹闭加一例或两侧椎动脉结扎 ) 颅内动脉阻塞法 主要是大脑中动脉的阻塞(直接暴露大脑中动脉电凝或结扎),穿线法阻断大脑中动脉(02mm的尼龙线)栓子法:脑表面血管阻塞法血管周围注射促凝剂应用光敏剂,MCA解剖,大鼠大脑中动脉(MCA)血栓形成模型,模型制备:大鼠术前禁食12小时。0.3%戊巴比妥钠(30 mg/kg)腹腔注射麻醉。右侧卧位固定,沿左眼外眦与左外耳道连线中点垂直线做一约2 cm纵切口,钝性分离颞肌,咬去颧弓,撑开颞颌关节,在蝶骨大翼处用牙科钻打薄骨质,牙科探针挑去骨片,开一约4 mm3 mm骨窗,可见大脑中动脉沿嗅束垂直走行。取3 mm长4号手术丝线,浸50%FeCl3 10 L,将此丝线置MCA嗅束-大脑下静脉之间,即置MCA中段表面,损伤血管诱导血栓形成,每5分钟重置一根,20分钟后除去丝线,用生理盐水洗净创面,缝合皮肤伤口。,指标检测:,神经损伤症状检测:术后待大鼠清醒后及24小时进行脑缺血行为评分,按以下标准进行:尾部倒提时,患侧上肢内收,肩外旋,4分;向对侧推左(右)上肢,患侧抵抗力下降,1-3分;将上肢置金属网上,患侧肌张力下降,1-3分;向患侧旋转,1分。总分11分。,梗塞面积,:术后24小时将大鼠断头取脑,去除小脑,肉眼可见MCA中段呈黑色,血栓形成。沿冠状面切四刀,切成3 mm厚脑片,将脑片置2%TTC(红四氮唑)溶液中,37温孵30 min染色,用图象分析仪摄像,计算梗死灶(未着色区)面积,脑梗塞面积以梗死灶面积与脑总面积百分比表示。,脑含水量,:脑片TTC染色摄像后,沿正中矢状线将脑片切为左右两半,取左侧(病变区)及右侧(无病变区)皮质,分别称取左右大脑的湿重,60 96h干至恒重,称干重,计算脑含水量。脑含水量(湿重干重)/湿重100%,正常MCA位置,氯化铁致右侧MCA血栓形成,大鼠脑梗 TTC染色,未着色区为梗塞区,异丙肾上腺素诱发大鼠心肌肥厚,SD大鼠,体重136.511.2 g,随机分为4组:生理盐水对照组,异丙肾上腺素 (ISO) 组,给药前准确称大鼠体重,麻醉状态下描记大鼠标准导联、单极加压肢体导联及CR和CL胸前导联ECG,将心电图异常的动物剔除,然后ISO组用ISO(0.02 mg/kg)sc,每日2次,共6 wk。给药6 wk时,末次给药24 h后,在麻醉状态下描记心电图,然后迅速剖取心脏,用滤纸拭干血液,称取全心重、心室重、左心室重、右心室重和室间隔重,以上均为湿重,测量右心室壁厚、左心室游离壁厚和室间隔厚,取左心室心尖部分组织做常规病理切片,余左心室组织置4冰箱保存,待后供SOD活性和MDA含量测定用。,结果,大鼠心肌肥厚模型中,持续给异丙肾上腺素6周,可使大鼠的心电图J点异常抬高,病检显示大鼠心肌细胞广泛损伤,同时使全心重/体重(hw/bw)、左心室重/体重(lvw/bw)和室间隔重/体重(vsw/bw)增加,左室游离
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