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文档简介

脂肪酸的氧化,一、目的了解脂肪酸的氧化作用。二、原理在肝脏中，脂肪酸经氧化作用生成乙酰辅酶A。2分子乙酰辅酶A可缩合生成乙酰乙酸。乙酰乙酸可脱羧生成丙酮，也可还原生成羟丁酸。乙酰乙酸、羟丁酸和丙酮总称为酮体。,氧化的生化历程,乙酰CoA,RCH2CH2CO-SCoA,脂酰CoA脱氢酶,脂酰CoA,-烯脂酰CoA水化酶,-羟脂酰CoA脱氢酶,-酮酯酰CoA硫解酶,RCHOHCH2COScoA,RCOCH2CO-SCoA,RCH=CH-CO-SCoA,+,CH3COSCoA,R-COScoA,乙酰CoA,酮体的生成肝脏,羟甲基戊二酸单酰CoA（HMGCoA）,脂肪酸,硫解酶,2CH3COSCoA,CH3COCH2COSCoA,乙酰乙酰CoA,HMG-CoA合成酶,CH3COSCoA,CoASH,-氧化,CoASH,本实验用新鲜肝糜与丁酸保温，生成的丙酮在碱性条件下，与碘生成碘仿。剩余的碘，可用标准硫代硫酸钠溶液滴定。,在碱性的条件下，丙酮与碘生成碘仿。反应式如下：2NaOH+I2NaIO+NaI+H2OCH3COCH3+3NaOICHI3+CH3COONa+2NaOH碘仿剩余的碘，可用标准硫代硫酸钠滴定。NaOI+NaI+2HClI2+2NaCI+H2OI2+2Na2S2O3Na2S4O6+2NaI根据滴定样品与滴定对照所消耗的硫代硫酸钠之差，可以计算由丁酸氧化生成丙酮的量,三、器材酸式滴定管水浴锅移液管剪刀及镊子漏斗等四、试剂与材料鲜猪肝淀粉氯化钠丁酸三氯乙酸氢氧化钠盐酸碘等,1.肝糜制备取新鲜肝脏，用0.9%氯化钠溶液洗去污血。用滤纸吸去表面的水分。称取肝组织5g置研钵中。加少量0.9%氯化钠溶液,研磨成细浆。再加0.9%氯化钠溶液至总体积为10mL。2.取2个50mL锥形瓶，各加入3mL1/15mol/LpH7.6的磷酸盐缓冲液。向一个锥形瓶中加入2mL正丁酸，另一个锥形瓶作为对照，不加正丁酸。然后各加入2mL肝组织糜。混匀，置于43恒温水浴中保温1小时。,3.沉淀蛋白质保温1时后，取出锥形瓶，各加入3mL15%三氯乙酸溶液，在对照瓶内追加2mL正丁酸，混匀，静置15分钟后过滤。将滤液分别收集在2支试管中。4.酮体的测定吸取2种滤液各2mL分别放在另2个锥形瓶中，再各加3mL0.1mol/L碘溶液和3mL10%氢氧化钠溶液。摇匀后，静置10分钟。加入3mL10%盐酸溶液中和。然后用0.01mol/L标准硫代硫酸钠溶液滴定剩余的碘。滴至黄色时，加入56滴淀粉溶液作指示剂。摇匀，并继续滴到蓝色褪去。记录滴定样品与对照所用的硫代硫酸钠溶液的mL数，并按下式计算样品中丙酮含量。,5.计算肝脏的丙酮含量（mmol/g）=（A-B）cNa2S2O3/6式中：A为滴定对照所消耗的0.01mol/L硫代硫酸钠溶液的mL数；B为
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