Customer 病毒去除PPT课件

赛多利斯的病毒去除技术,精选,Seite2,病毒过滤,病毒灭活,病毒吸附,法规方面,内容概要,精选,Seite3,内容概要,VirusFiltration,VirusInactivation,VirusAdsorption,法规方面,精选,Seite4,检测原料血浆(献血者监控,检测/生产监控)生物工程(原料,细胞系,基因稳定性)哺乳动物细胞(细胞来源跟踪监控)验证病毒去除工艺病毒防护,病毒数降低程度,交叉污染控制检测成品,法规:安全策略,PaulEhrlichInstitute,精选,Seite5,病毒去除用户方面-,用户须形成完备的病毒去除观念综合采用病毒灭活和病毒分离截留的方法缺少相关的内源和外源病毒样品法规要求病毒去除率应在12to20log10至少使用两种病毒去除方法至少有一种方法是针对无包膜的小病毒,CPMP/ICH/295/95:NoteforGuidanceonQualityofBiotechnologicalProducts.“ViralSafetyEvaluationofBiotechnologyProductsDerivedfromCellLinesofHumanorAnimalOrigin.October1997”,精选,Seite6,病毒污染-污染机会-,病毒颗粒和相关病毒潜在的污染-病毒意外污染-细胞系源于被病毒侵染的动物操作处理中污染污染的试剂,ICHQ5A:ViralSafetyEvaluationofBiotechnologyProductsDerivedfromCellLinesofHumanorAnimalOrigin,1997,精选,Seite7,病毒去除工艺总结-,精选,Seite8,病毒去除主要供应商-,精选,Seite9,完整的病毒去除平台,成品灌装,亲和层析柱或其他纯化步骤,病毒截留滤芯,抛弃型滤器病毒去除针对所有病毒,紫外灭活,抛弃型紫外灭活装置病毒灭活针对非包膜小病毒,膜吸附,抛弃型层析装置病毒吸附针对所有病毒还可去除HCP,DNA/RNA和内毒素,精选,Seite10,内容概要,病毒截留过滤,VirusInactivation,VirusAdsorption,RegulatoryAspects,精选,Seite11,VirosartCPV病毒截留过滤器-,膜材质为聚醚砜典型病毒截留率PPV或PP7(约20nm粒径)，LRV4PR772(约50nm粒径)，LRV6完整性测试使用水(4.5barmax22ml/min/10”)Sartopore0,1m作为预过滤蒸汽或高压灭菌,精选,Seite12,病毒去除至少3-4log，并且蛋白收率95%相关的特定和非特定的标准病毒去除特性料液情况(大分子蛋白，宿主细胞，等)病毒截留滤器在工艺中的位置挑战性物质(细胞碎片，宿主细胞等)具有可放大性,病毒截留滤器应验证考察的方面,精选,Seite13,CPV上表面,CPV下表面,0,2m和CPV膜电镜对比,0,2m膜上表面,0,2m膜下表面,精选,Seite14,VirosartCPV挑战实验，料液为2%BSA，PBSpH6,9,DatadeterminedbyAnalysisGmbHKln,Germany2004,精选,Seite15,VirosartCPV产品线-,5cm抛弃型VirosartCPVMinisart20cm抛弃型VirosartCPVMidisart150cm抛弃型VirosartCPV囊式滤器0.7m抛弃型VirosartCPV囊式滤器1.4m抛弃型VirosartCPV囊式滤器2.1m抛弃型VirosartCPV囊式滤器,精选,Seite16,AnalysisDr.AndreasImmelmannBiomedizinischeTestGmbHGottfriedHagen-Strasse62D51105KlnGermanyPhone:+49-221-346-1800Fax:+49-221-346-1801Email:infoanalysis-gmbh.dewww.anaylsis-gmbh.de,德国独立的病毒实验室,NewLabBioQualityAGDr.KlausKellingsMaxPlanck-Srasse15AD40699ErkrathGermanyPhone:+49-211-92-55-300Fax:+49-211-92-55-333Email:infonewlab.dewww.newlab.de,精选,Seite17,VirosartCPV文件-,VirosartCPVlaunchpackage,精选,Seite18,VirosartCPV完整的文件-,精选,Seite19,VirosartCPV标准滤芯订货信息-,精选,Seite20,VirosartCPV囊式滤器定货信息-,精选,Seite21,内容概要,VirusFiltration,病毒紫外灭活,VirusAdsorption,RegulatoryAspects,精选,Seite22,紫外灭活,自1940s紫外灭活病毒方法已经被证实有效WolfAM,MasonJ,etal.(1947).Ultravioletirradiationofhumanplasmatocontrolhomologousserumjaundice.JAMA135:476-477.最新的研究已经确认紫外法是一种有效的病毒灭活方法HartH,ReidK86(4):230-8.,精选,Seite23,紫外灭活技术,X-rays,UltravioletLight,VisibleLight,Infrared,780,400,315,280,200,100,Hglowpressurelamp254nm,SpectralcurveofDNA/RNAdamage,Wavelengthnm,UVC,UVB,UVA,VacuumUV,破坏病毒的DNA/RNA,精选,Seite24,DeanVortices迪恩涡技术优化病毒灭活工艺,DeanVortices,lightintensity,depthofpenetration,Minimisedresidencetimes;controlledmixing86(4):230-8.,病毒灭活:蛋白确认研究,光照处理抗体(2mg/mlPBS缓冲液)侵染法检测PPV病毒去除log10值4log10PPV抗体性质研究(二维凝胶电泳,Maldi-Toff)紫外光照处理未进行紫外光照处理,精选,Seite31,赛多利斯公司与用户进行研发和临床前研究研究紫外光照对目标蛋白的影响在赛多利斯公司或用户处进行单体活性裂解理化分析SDS电泳,HPLC,二维凝胶电泳.赛多利斯公司与用户进行临床研究1st生产期临床样品前进行病毒挑战研究2nd生产III期临床样品前进行病毒挑战研究,病毒灭活研究,精选,Seite32,内容概要,VirusFiltration,VirusInactivation,病毒吸附,RegulatoryAspects,精选,Seite33,膜层析技术:基本原理,膜层析产品与颗粒胶电镜照片对比,精选,Seite34,孔径颗粒胶与层析膜对比-,颗粒胶颗粒胶粒径分布为：15-160m孔径分布为：15-40nm,层析膜高开孔结构孔径：250-3000nm,精选,Seite35,膜层析技术:基本原理,“不是过滤膜”开放孔结构3m低压力降单纯的对流传质扩散效应最小化应用于去除：宿主细胞蛋白，DNA，内毒素和病毒,膜层析产品与颗粒胶电镜照片对比,精选,Seite36,病毒去除至少3-4log，并且蛋白收率95%相关的特定和非特定的标准病毒去除特性物质平衡和独立的吸附机制具有可放大性,膜层析系统应验证考察的方面,精选,Seite37,层析膜形成层析床,单张层析膜厚度0.275mm最多60层叠加形成16mm厚柱床36cm膜面积=1ml床体积=30mg载量,精选,Seite38,膜床体积：1l到2.1ml载量：30g到60mg抛弃型技术捕获，精致和病毒去除,膜层析抛弃型实验室规模产品-,精选,Seite39,膜层析生产规模抛弃型产品-,膜床体积：7ml到530ml载量：0.2到16g抛弃型技术捕获，精致和病毒去除,精选,Seite40,膜层析可重复使用产品-,膜床体积：35ml到2.130ml载量：1到64g反复使用技术捕获和精制,精选,Seite41,膜层析去除病毒,Galliher,P.,Fowler,E.,MillenniumPharmaceuticalsInc.),“ValidationofImpurityRemovalbytheCMAPATH-1HBiomanufacturingProcess”IBCsBiopharmaceuticalProductionWeek,ParadisePointResortSanDiego,CA,November12-15,2001,精选,Seite42,膜层析去除病毒,ZhangR,BouamamaT,TaburP,ZapataG,GottschalkU,MoraJ,ReifO.ViralClearanceFeasibilityStudyWithSartobindQMembraneAdsorberforHumanAntibodyPurification.IBCs3rdEuropeanEventBioProduction2004.AntibodyProduction&DownstreamProcessing,26-27October,Munich:2004.,精选,Seite43,SartobindQ去除DNA,.去除低于检测限.,J.K.Walter