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文档简介

.,1,1实验室仪器设备2实验基本操作3植物组织培养流程,植物组织培养操作流程,1实验室仪器设备,2实验基本操作,一、母液的配制,1.MS母液的配制,2.激素母液的配制,大量元素(20倍)、微量元素(1000倍)、铁盐(100倍)、有机元素(100倍),6-BA、KT、ZT等浓度为0.5mg/ml；NAA浓度为0.1mg/ml,二、培养基的配制与灭菌,MS+6-BA2mg/L+琼脂粉5.5mg/L+糖30mg/LpH6.01L,适用于各种器皿、培养基、器皿、蒸馏水、棉塞、纸等。121维持2030min注意点：加足水、排尽气、气压降到0时，才能开盖。,1.培养基配制,2.培养基灭菌,三、外植体的消毒与无菌操作,1.外植体消毒,正确错误,取流水冲洗（至少5min）过的外植体，用一定的消毒剂浸泡消毒，用无菌水冲洗3-4次，放入无菌培养皿中，用无菌的接种器械进行分离、切割或其他处理。,1、用75%的酒精喷洒超净工作台。2、打开室内及超净工作台用紫外灯、无菌风及刀剪镊杀菌20min-30min。注意：台面上的用品不要放置太多或重叠放置，以免降低灭菌效果。3、关空间紫外灯，过5-10min进入缓冲间，以75%洗手和手臂，进入接种台。4、关闭超净台紫外灯，打开照明灯。5、试验操作。6、完毕后关闭照明灯、刀剪镊、无菌风开关。7、收拾无菌纸、材料瓶等。,。,2.无菌操作,注意（1）进行培养时，动作要准确敏捷，但又不必太快，以防空气流动，增加污染机会。（2）不能用手触及已消毒器皿，如已接触，要重新消毒。（3）为拿取方便，工作台面上的用品要有合理的布局，原则上应是右手使用的东西放置在右侧，左手用品在左侧。（4）工作由始至终要保持一定顺序性，组织或细胞在未做处理之前，勿过早暴露在空气中。同样，培养液在未用前，不要过早开瓶；用过之后如不再重复使用，应立即封闭瓶口，直立可增加落菌机会。,.,10,接种茎段：注意形态学下端插入培养基内，而形态学上端露于空气中,正确错误,3.植物组织培
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