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016食品安全国家标准食品添加剂 0161 食品安全国家标准食品添加剂 乳酸链球菌素1 范围本标准适用于经乳酸乳球菌(酵后提取而制得的食品添加剂乳酸链球菌素。2 分子式、子式141构式27位氨基酸为组氨酸(27位氨基酸为天冬酰胺(对分子质量2013年国际相对原子质量)2013年国际相对原子质量)3 官要求感官要求应符合表1的规定。0162 表1 感官要求项目要求检验方法色泽浅棕色至乳白色状态粉末将适量试样均匀置于白瓷盘内,化指标理化指标应符合表2的规定。表2 理化指标项 目指 标检验方法效价/(IU/w/%w/%b)/(mg/品化的乳酸链球菌素产品应以符合本标准的乳酸链球菌素为原料,可添加氯化钠、乳固体等辅料而制成,其效价符合声称。生物指标微生物指标应符合表3的规定。表3 微生物指标项 目指 标检验方法菌落总数/(g)g)<g)<0163 附 录 般规定本标准除另有规定外,所用试剂的纯度应为分析纯,所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品,应按601、602、603的规定制备,试验用水应符合6682中三级水的规定。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时,均指水溶液。酸溶液:。氧化钠溶液:5。脂牛奶:脂肪含量<1%。蕊牛奶培养基。测菌:乳酸乳球菌(样储备液制备取1于1液效价约为1000IU/酸溶液的稳定性试验用盐酸溶液将试样储备液稀释至约50IU/成试样溶液。将该试样溶液煮沸5效价测定方法测煮沸过的试样溶液中算煮沸过的试样中算结果在其效价值的(100%5%)内,表明无显著活性损失。碱溶液的稳定性试验用盐酸溶液将试样储备液稀释至约50IU/成试样溶液。将该试样溶液煮沸5持30却。效价测定方法测定最终溶液中按照上述操作处理后会出现抑菌活性的几乎完全损失。酸乳球菌的培养:乳酸乳球菌(工作菌株)(无菌脱脂牛奶中培养,30培养18h。备1个或多个装有100121灭菌150下培养24h。测菌(乳酸乳球菌)可在该效价的试样(约1000IU/生长,但不能在相似浓度的其他抑菌物质中生长。0164 酸链球菌素标准品(效价:1106IU/g)。酸溶液:。温溶液:吐温20水=11。养基(测菌:黄色微球菌(测菌(测菌的培养用无菌接种环从甘油管或冻干管中取一环检测菌(接种在无菌的行自然分离,挑出饱满、边缘光滑的菌落,扩大,接在30恒温箱中培养24h,放入25冰箱中。株悬浮液的制备取在冰箱中的检测菌(用无菌生理盐水洗脱下来,制成108用。板的制备配制比例先把琼脂溶化,依次加入各组分溶解,磷酸氢二钠溶解后加入),经121、20冷至70左右,加入4分摇匀,等冷却到5055左右,加入已制备好的菌株悬浮液适量,06个/匀,倒入水平放置的已灭菌的平板中,等完全凝固后,用直径为7平板上打出所需的孔数,小心挖掉孔内琼脂,风时间按空气中的湿度大小而定,同时控制室内温度最低,尽量不要让检测菌生长),吹干后,置25冰箱中,到次日使用。准品溶液的制备准确称取乳酸链球菌素标准品(溶于盐酸溶液中,使最终浓度为2mg/000IU/摇匀,用盐酸稀释成300倍、600倍,即成高、低剂量标准溶液。样溶液的制备称取一定量的试样(用盐酸溶液溶解后,稀释成高、低剂量试样溶液,其乳酸链球菌素含量,按估计单位高、低剂量与标准品溶液大致相当。加溶液取出存放在冰箱中的平板,用移液器,取70L80机滴加在平板的孔中,滴6个孔,再取70L800165 孔中。试样溶液和标准品溶液滴在同一平板上,其操作同标准品。温培养等孔内的溶液渗透完全后,移入30恒温箱中培养16h24量抑菌圈直径。果计算用卡尺测量抑菌圈直径,取其平均值,按式(算效价:BHk(中:试样溶液的效价,单位为国际单位每毫克(IU/标准溶液的效价,单位为国际单位每毫克(IU/高剂量试样溶液所致的抑菌圈直径,单位为毫米(低剂量试样溶液所致的抑菌圈直径,单位为毫米(高剂量标准
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