《论文写作》PPT课件

论文(学位或学术)撰写规范,遵义医学院珠海校区主讲：孙万邦,论文格式是论文的骨架,是论文内在逻辑的视觉化。合理的格式可以充分表现主题,使抽象的理论变得易于理解。,学位论文和学术论文的撰写格式根据学位条例暂行实施办法,国发8189号文件,国务院学位办1998659号文件,国际医学期刊编辑委员会于1979年公布生物医学期刊投稿的统一要求,我国于1987年颁布科学技术文件和国家新闻总署关于期刊管理规范遵义医学院学报有关要求,提出论文撰写规范,国际生物学编辑委员会对医学科研论文的定义为：必须是首次公布的应提供足够的资料，使同行们能够进行：评价所观察到的结果；评价其推理过程；重复实验。分为以下两种：临床研究(clinicalstudy)；基础研究或实验研究（experimentalstudy),医学科研论文定义,前置部分包括文题、作者单位、作者署名、内容提要、关键词；主体部分包括前言、材料与方法、结果、讨论、结论、致谢、参考文献、外文摘要；附录部分包括图表、照片和作者附言等。,三个主要部分,熟悉写作主题有关的理论和基本概念;论点鲜明,论据充分,论证有力.常采用论点-论据-例证的方法撰写。说理为主，举例说明的内容仅是旁证的衬托，应点到为止，不可长篇大论.逻辑严密，层次分明.,撰写要求,论文撰写的基本格式,文题(题名、题目、标题)是读者认识全文的窗口是对论文内容的高度概括,以最简明、最恰当的词语反映论文中最主要的特定内容的逻辑组合。,一、文题,1.新颖醒目：文题应突出论文的创新性、特异性,以吸引读者的兴趣。2.具体确切:文题应具体、确切地表达论文的特定内容及其特点,恰如其分地反映研究的范围和深度.,【要求】,3、简短精炼：文题宜简短、精焊，高度概括，一般20个字左右。4.准确而得体:文题应紧扣主题,即须文题相符、文要切题、题要得体.,不用非公知公用的缩略词、首字母缩写字、符号、代号、公式等；避免用疑问句、主谓宾结构的完全句,以及宣传鼓动方式的状语;,【注意】,忌冗长、繁杂、笼统、夸张、不切题或含义不清;论文用作国际交流,应有外文题名,一般不超过10个实词;一般不加标点符号。,1、T淋巴细胞性白血病病人CCR9的功能转变2、大鼠心肌梗塞后心肌炎症反应和细胞因子表达3、顽固性咽部溃疡中T淋巴细胞亚群的分布4、用于大容量噬菌体抗体库的表达载体的构建及鉴定,题目举例,5、狼疮肾炎外周血单个核细胞IL-16活化的初步观察6、家兔供体细胞体外分离及定向培养内皮细胞7、血红素加氧酶-2基因敲除对脑出血后损伤的保护作用,技术与方法11.蛋白质相互作用的研究方法陈谋通刘建军12.18O内标质谱法比较定量蛋白质组学计量的数学算法齐孟文13.双向凝胶电泳技术及其应用冯海燕景志忠房永祥莫斯科14.转基因技术在玉米遗传育种中的应用张英穆楠朴红梅,15.单克隆抗体在畜禽病毒性传染病研究中的应用李永亮杨苏珍田美娜研究报告16.外源PDI基因导入CHO细胞及其对HBsAg分泌的影响蔡振荣易小萍张元兴17.基于序列分析的天蚕素A串连融合表达载体的构建杨细媚文阳安万祥辉涂植光18.状病毒VP7基因的克隆及其植物表达载体的构建柴晓杰靳非王宇航王晓庆,二、作者及单位署名,医学论文的撰写与发表,均应署上作者的姓名及其单位,以表示对论文内容负责(文责自负,是作者对医学科学事业付出辛劳应得的荣誉和著作权的依据,也是文献检索的需要。,作者署名的条件应是论文课题的创意者、设计者论文课题的实施者,是论文的执笔者,能对关键性的学术问题作解释和答辩。应实事求是，按贡献大小、工作主次依次排名。,【要求】,署真名、全名,不署笔名。学位论文署名应实事求是地论功署名,不计资历深浅,不论学术高低,而是按在研究工作中所负的责任和作用而定。,署名不宜过多,一般不超过6人.,【注意】,1、发表时署名,2、论文答辩时署名专业名称学生姓名导师姓名,3、忌争署名,争名次,奉送署名。,空肠弯曲菌PEB1重组蛋白的表达及单抗的制备任思坡，孙万邦1，杜联峰，余妍，黄俊琼，罗军敏(遵义医学院珠海校区免疫学教研室，广东，珠海519041)基金项目：贵州省优秀人才省长基金课题（黔科教办200607）资助。通讯作者：1孙万邦，E-mail:sunwb7224作者简介：任思坡(1979年一)，男，免疫学硕士，主要从事细胞培养和单克隆抗体制备的研究。,专业代码：100102中图分类号：R392.7遵义医学院2007届硕士研究生毕业论文空肠弯曲菌PEB1重组蛋白的表达及单抗的制备ExpressionofRecombinantPEB1ProteinofCJandPreparation,IdentificationofMcAbsagainstIt研究生：任思坡年级：2004级专业：免疫学导师：孙万邦教授研究起止时间：二五年九月二七年四月论文交稿时间：二七年五月,三、内容摘要,内容摘要是从论文中提炼出来的要点,扼要地向读者介绍论文的主要内容和观点,是全文的高度浓缩。内容摘要对论文内容不加注释和评论,以便于读者以最短的时间了解全文概貌,有利于做文摘和检索。,三、内容摘要,摘要确切地反映原稿的精华、要点、突出创新和主要发现.摘要有数据有结论,是一篇完整的短文,可独立使用,可引用可推广。,【要求】,摘要撰写应规范,内容包括：研究目的和范围;基本方法和步骤；主要结果和重要发现；主要结论;主要经验教训和应用价值。,结构式摘要（半）（1）目的（objective）（2）方法（methods）（3）结果（results）（4）结论（conclusion）,摘要简明扼要,高度概括全文主要内容,不读全文可获主要信息。学术论文摘要字数以200字左右,硕士学位论文摘要800-1200字左右。摘要用电报体裁书写即第三人称书写,不分段,每个字、每句话都要提供信息。,摘要提要应写得繁简得当,以交待清楚为度,不要与前言、结论重复；摘要一般不用图、表、化学结构式和非公知公用的符号与术语;缩略语、代号在首次出现处必须加以说明；一般使用结构式摘要。,【注意】,摘要目的表达CJPEB1重组蛋白，制备并鉴定CJPEB1蛋白的单克隆抗体。方法诱导培养工程菌E.coliBL21(DE3)表达CJPEB1重组蛋白，经镍琼脂糖凝胶层析柱纯化，透析并定量后，以PEB1蛋白溶液与等体积的佐剂作为免疫原常规免疫BALB/C小鼠，无菌取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合，建立杂交瘤细胞株，用小鼠单抗分型试剂盒确定所分泌的抗体的亚类。将建株的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔诱生腹水制备抗体，应用间接ELISA法和双向琼脂扩散试验检测腹水中抗体的效价，应用Western-blot和玻片凝集试验检测抗体的特异性。,结果得到高纯度的CJPEB1重组蛋白，蛋白质分子量大小与预计的理论值相符。获得两株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为1D7和5G2；两株杂交瘤细胞所分泌的抗体分别属于IgG1和IgG3亚类。两株杂交瘤细胞诱生的腹水，经间接ELISA法检测，抗体效价分别为1:8000和1:5000，经双向琼脂扩散试验检测效价均为1:16。通过Western-blot鉴定，两株杂交瘤细胞分泌的抗体均与PEB1蛋白特异性地结合；玻片凝集试验显示两株杂交瘤细胞诱生的腹水与CJ菌液混合出现凝集现象，而与非CJ菌均未出现凝集现象。,结论成功建立了2株稳定分泌抗CJPEB1重组蛋白抗体的杂交瘤细胞株并制备了抗CJPEB1蛋白的单克隆抗体，为今后建立血清学方法检测CJ创造了条件,关键词是用以表示全文主题内容信息款目的规范化名词或词组单词或术语,是论文的信息点和检索点,四、关键词,1.关键词是从文稿内容中提炼出最能反映文稿主要内容的名词、词组或短语,并最能说明全文含义。2.关键词应正确反映论文的关键内容。所选的词应与正式出版的主题词表医学主题词表、MeSH和医学主题词注释字顺表以及以后逐年新增加的主题词中所列的词或词典提供的规范词一致。,【要求】,3.关键词可使用自由词当词表中没有某一特定概念的主题词供选用,而该特定概念又是不可忽视的主题,就只好选词表以外的自由词作关键词。4、关键词的排位一篇论文的文题、提要、正文可看成文稿的三个层次的内容扩展，提要是正文的浓缩,文题是提要的浓缩，关键词是文题的浓缩。,关键词要写原形词而不用缩略词;一般不选用冠词、介词、连词、代词、情态动词,以及无检索意义的副词、形容词等;有英文提要者,关键词要中、英文相对应,同时其数量要一致。关键词之间无标点,相互空一格书写,最末一个词后不加标点（有的杂志要求加标点）。关键词3-6个。,【注意】,关键词空肠弯曲菌PEB1重组蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞中图分类号R392.7文献标识码A【Keywords】Campylobacterjejuni;RecombinantPEB1protein;Monoclonalantibody;Hybridomacells,前言引言、导言、序言是论文的引子或开场白,是论文的序论部分,每篇论文均有,或长或短。前言是对正文的主要内容的简要说明,对正文起到提纲擎领和引导阅读兴趣的作用。,五、前言,【要求】,1.前言简明扼要地介绍研究工作的来龙去脉及课题的概貌、价值和意义。,2.前言应开门见山地向读者交代本文的研究目的、范围和主要收获历史背景及国内外现状本研究的设想、理论根据、预期结果及其意义3.前言应言简意赅,生动而有吸引力,学术论文字数200字左右,学位论文字数800-1000字左右。,前言只起引导作用，不要涉及本研究中的数据或结论，少与提要和正文重复；前言回顾历史择其主要者，切忌过长过繁、详述历史或作冗长的文献综述；,【注意】,前言评价论文的价值要恰如其分,实事求是,慎用“首创”、“首次发现”、“达到国际水平”等提法;学术论文一般不著列“前言、“引言字样标题。,空肠弯曲菌（Campylobacterjeuni，CJ）是一类微需氧型嗜热革兰阴性杆菌，20世纪80年代起被认识到是引起人类腹泻的主要病原菌之一1。世界卫生组织已将该菌引起的腹泻列为最常见的食源性传染病之一。在我国由CJ引起的腹泻与沙门菌引起的腹泻同样普遍，并已超过了志贺菌引起的腹泻；据报道，我国从腹泻婴幼儿的粪便中分离CJ的分离率达13%左右2。因此CJ感染后若能快速准确的检测对于预防和控制CJ病的暴发流行，早期治疗感染病人以及防止严重并发症的发生均有重要意义。,由于CJ营养要求高，培养条件特殊3，传统的检测方法费时费力4。基因检测方法虽然有其快速准确的优点，但是不易做定量检测，而且实验条件要求高不易推广应用5。血清学方法以其简便、快速、特异性强的特点在CJ检测的研究中受到广泛的关注。PeiZ等6研究发现CJ的甘氨酸提取物中蛋白质PEB1(28kd)分子，具有保守性，无血清型改变，能够作为共同抗原检测不同血清学来源的CJ，在本室79前期对CJ一系列研究的基础上制备PEB1蛋白单克隆抗体，为建立血清学方法检测CJ感染创造条件。,方法方法或材料、对象与方法,是实验研究、临床试验和现场调查的手段,是科技论文的基础,是判断论文的科学性、先进性的主要依据。,六、方法,方法写作时按研究设计的先后顺序依次说明,应写得具体真实,以便读者评价研究结果的可信程度,照此重复实验得到相同的结果,对论文质量起保证作用.介绍繁简程度应视其研究工作的性质、特点、要求而论。,1.临床研究应提供的材料病例来源及选择标准,诊断及分型标准一般资料治疗方法2.实验研究需写明的情况:实验条件;实验方法;季节温度、湿度及其它条件等。,【要求】,3.学术论文方法如属前人所用过,公知公认的,只写明其方法名称;引用他人的方法应注明文献出处；对已发表但尚未为人们所熟悉的方法，要提供参考文献。4.学位论文材料和方法一定要详细叙述。,4.材料中所用的试剂、药品的批号、效期、生产厂家,仪器的规格、型号,研究对象,抽样方法,分组依据,实验观察,测试,调查以及统计分析方法等都应一一交待清楚。,5.一般实验研究用“材料与方法”，调查研究用“对象与方法”;临床试验用“病例与方法”等。6.统计等处理方法,应介绍具体的统计方法,包括统计学评价强度。,材料与方法交待不清或不交待,他人难以验证,使论文可信性差;陈旧过时的方法重复介绍或罗列无关的材料,给人以低水平重复的印象。,【注意】,1材料与方法1.1材料基因工程菌peb1E.coliBL21(DE3)为本教研室制备，空肠弯曲菌标准株（编号：ATCC700819）购于美国典型培养物保藏中心，痢疾杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌、产气荚膜杆菌、葡萄球菌为遵义医学院微生物教研室提供。SP2/0-Ag14为遵义医学院中心实验室提供，SPF级BALB/C小鼠购自中山大学实验动物中心。镍琼脂糖凝胶层析柱为北京卓冠科技有限公司产品，BCA蛋白定量试剂盒为上海闪晶生物公司产品，CFA、IFA为美国ANTIGENIX公司产品，标仪购自美国Bio-TEK公司。,蛋白质Marker购自上海生命科学院，DMEM为美国INVITROGEN公司产品，HAT、HT为德国sigma公司产品，HRP标记的羊抗鼠多克隆抗体为北京索莱宝生物公司产品，PEG为美国MERK公司产品，胎牛血清为天津灏洋生物公司产品，小鼠单抗分型试剂盒为荷兰HBT公司产品，垂直蛋白电泳装置为北京六一仪器厂制造，CO2培养箱购自美国SHEL公司。,1.2方法1.2.1CJPEB1蛋白的表达、纯化、定量及SDS-PAGE分析诱导培养工程菌E.coliBL21(DE3)表达CJPEB1重组蛋白，通过镍琼脂糖凝胶层析柱纯化，然后经透析、浓缩后运用BCA法进行蛋白定量并通过SDS-PAGE分析纯化后的蛋白。浓缩后的蛋白溶液分装保存于-80冰箱备用。,1.2.2检测CJPEB1蛋白单克隆抗体的酶标板的包被用pH9.6的包被缓冲液将PEB1蛋白溶液稀释成5g/ml，加入96孔酶标板，每孔100l，置37孵箱1h，然后4放置12h后弃去孔内液体，PBS-T洗涤三次，每次3min，然后每孔加入封闭液200l，置37孵箱2h，然后弃去孔内液体，PBS-T洗涤三次，每次3min，冷风吹干，锡箔纸包装好置4冰箱保存备用。,1.2.3杂交瘤细胞株的建立以纯化的PEB1蛋白联合佐剂免疫BALBC小鼠，待ELISA法检测小鼠血清效价满意后，取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0在50PEG4000作用下融合，运用间接ELISA法筛选阳性克隆，经有限稀释法3次连续克隆化后，选择生长良好、抗体分泌稳定且抗体水平高的杂交瘤细胞建株，扩大培养后液氮保存。,1.2.4单克隆抗体的制备及效价检测调整杂交瘤细胞密度至2.5106ml，每只小鼠腹腔接种0.2ml，诱生腹水，以SP2/0细胞诱生的腹水作为阴性对照。710天后，收集腹水，把收集的腹水在4下4000r/min离心5min，收集上清液，通过双向琼脂扩散试验和间接ELISA法检测腹水中的抗体效价。,1.2.5杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体的亚类鉴定取杂交瘤细胞培养上清，用小鼠单抗IgG分型试剂盒检测单抗的亚类。1.2.6腹水中单克隆抗体的效价测定通过间接ELISA法和双向琼脂扩散试验检测腹水中抗体的效价。1.2.7单克隆抗体的特异性鉴定通过Westernblot和玻片凝集试验检测腹水中抗体的特异性。,七、结果,结果是作者调查、观察或实验研究成果的结晶,是论文的核心部分,全文的结论由此得出,讨论由此引发,判断推理由此导出。,结果的写作技巧在于统计分析,应当善于将调查、实验、观察得到的原始资料或数据,按研究目的、要求作统计处理,分析其意义、价值,借助图表和文字加以表达。,1.将研究所得到的原始资料或数据,先进行认真的审查核对,再经过分析归纳和统计学处理,使原始数据由难理解到易理解，从原始数据的偶然性中揭示其中的某种必然规律,【要求】,2.根据内容的要求结合图、表、文字的特点,有选择性地、按逻辑顺序在图表中描述研究结果。一个图、一个表说明一个问题。3.有的临床医学论文中也可将治疗结果和并发症写在结果内。,无论研究结果如何,是成功的或失败的,只要是真实的都是有价值的,不可随意摒弃;未经统计学处理的实验观察记录和数据叫原始数据,由此得出的结论是不可靠的;,【注意】,统计数字计算不准确,影响论文价值;结果和“材料方法”的内容不相呼应,或用“大约”、“多见”、“少数”代替具体数字等,影响论文的科学性;图、表不规范或繁杂,内容与文字重复,表题与表内容不符或表内数据与正文不一致，影响论文的科学性。,2结果2.1纯化后的CJPEB1重组蛋白经SDS-PAGE分析结果通过SDS-PAGE分析，纯化后的CJPEB1重组蛋白分子量大小与理论值相符，与本室前期实验结果一致，经纯化后的蛋白质纯度高，如图1所示。,2.2杂交瘤细胞株的建立及单克隆抗体的制备经连续克隆筛选，得到两株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为1D7和5G2。以诱生腹水法制备抗体，每只小鼠可收集到约10ml腹水。,2.3单克隆抗体亚类的鉴定经小鼠单抗IgG分型试剂盒检测，单抗的亚类分别为IgG1和IgG3亚类。2.4腹水中单克隆抗体的效价两株杂交瘤细胞诱生的腹水中的抗体效价，通过间接ELISA法检测，效价分别为8104和5104；通过双向琼脂扩散试验检测效价均为1:16。,2.5单克隆抗体的特异性鉴定通过Western-blot试验，观察到2株杂交瘤细胞分泌的单抗和PEB1蛋白特异性结合。通过玻片凝集试验，发现CJ菌液和2株杂交瘤细胞诱生的腹水混合后出现凝集颗粒，液体由均匀混浊变为澄清；待检菌菌液和SP2/0细胞诱生的腹水以及除CJ外的其余待检菌菌液和2株杂交瘤细胞诱生的腹水混合后未出现变化，依然为混浊状态。如图2，表1所示。,表1杂交瘤细胞和SP2/0细胞诱生的腹水与各种细菌菌液的反应结果Tab1.thereactionresultoftheascitesinducedbyhybridomacellsandtheSP2/0cellswithbacteria细菌名称1D7株细胞诱生的腹水5G2株细胞诱生的腹水SP2/0细胞诱生的腹水空肠弯曲菌大肠杆菌痢疾杆菌伤寒杆菌产气荚膜杆菌变形杆菌葡萄球菌菌液,八、讨论,讨论是论文的精华部分,是对研究结果的科学解释与评价。是作者对实验观察结果的思考、理论分析和科学推论,阐明事物间的内部联系与发展规律,揭示研究结果在理论与实践中的意义，是作者学术思想的展示，论文水平的显示。,讨论的水平高低取决于作者的理论思维、学术素养取决于作者知识的深度与广度，取决于作者以及专业写作技巧。,讨论要围绕研究目的、突出主题、抓住重点阐明研究结果及明与其结论的理论意义、指导作用和实践意义。讨论要着重讨论该研究中新的发现和重要的发现,并从中得出结论。,【要求】,讨论要与国内外同类研究进行比较,突出本研究的创新与先进之处,提出作者的观点和见解。讨论要实事求是地对本研究的限度、缺点、疑点等加以分析,和解释,解释因果关系,说明偶然性与必然性。讨论要展示有待解决的问题,提出今后研究的方向与问题。,讨论是围绕结果阐明学术观点,着重新发现或阳性结果,新论点、新启示；讨论在引证必要的文献作为结论的论据时,切忌作文献综述；,【注意】,讨论是实事求是,恰如其分地评价讨论避免重复前言、结果中已详细描述过的数据和资料,3讨论CJ是一种重要的人畜共患病病原菌，除引起腹泻外，还可引起多种严重的并发症，CJ感染后若能快速准确的检测对于预防和控制CJ病的暴发流行，早期治疗感染病人以及防止严重并发症的发生均有重要意义。目前研究1,8表明CJ的甘氨酸提取物中蛋白质PEB1(28kd)分子，具有保守性，无血清型改变，能够作为共同抗原检测不同血清学来源的CJ。本室杜联峰9利用基因工程技术成功构建了表达CJPEB1重组蛋白的基因工程菌peb1E.coliBL21（DE3）。检索文献，国内尚未发现制备针对CJPEB1蛋白单克隆抗体的报道。,我们通过诱导培养基因工程菌peb1E.coliBL21（DE3）高效表达CJPEB1重组蛋白，经镍琼脂糖层析柱纯化得到的PEB1蛋白,其纯度可以达到95%以上，蛋白回收率达80%以上，以其联合佐剂免疫BALBC小鼠，通过应用淋巴细胞杂交瘤技术并通过运用间接ELISA法和有限稀释法反复克隆筛选，获得了2株稳定分泌抗PEB1重组蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，鉴定结果表明，2株杂交瘤细胞所分泌的单抗分别为IgG1和IgG3亚类。,将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔诱生腹水制备抗体，通过间接ELISA和双向琼脂扩散试验检测所制备的抗体效价理想，通过Western-blot鉴定和玻片凝集试验检测，证明两株杂交瘤细胞分泌的抗体特异性好抗CJPEB1蛋白单克隆抗体的成功制备及其对其相关性质的研究，为今后进一步研究建立血清学方法检测CJ感染创造了条件。,结论是把结果与讨论分析后的认识,以简明形式表现出来,起着概括主题的作用。归纳为几条,并指明理论和实际意义。学术论文的文稿,一般不要写结论。,九、结论,是作者对本项研究工作有过实质性的贡献的单位或个人,或写作过程中给予过指导和帮助的单位或个人表示谢意的一种方式,是对他人的贡献与责任的肯定。其对象包括对研究方案和写作提纲提出建议、指导、修改者。,十、致谢,是作者为了标明论文中某些论点、数据、资料与方法的出处,供读者参阅、查找而引用的有关文献；是论文的一个重要组成部分；它有助于证实论文的科学性；文献引用近5-10年内发表的；学位论文要求30-60篇,学术论文20篇以内。,十一、参考文献,参考文献1ManninenKI，PrescottJF，DohooIR.PathogenicityofCampylobacterjejuniisolatesfromanimalsandhumansJ.InfectImmun，1982，38(1)：4652.2吴斌，秦成，钱斯日古楞.肉及肉制品中空肠弯曲菌的污染情况调查J.中国微生态学杂志，2004，16(4)：212214.3肖政，孙万邦，胡蕖，等.改良卵黄培养基培养空肠弯曲菌的生物学性状初步研究J.遵义医学院学报，2004，27(4)：334336.4孙玉兰.空肠弯曲菌的实验诊断J.职业与健康，2002，18(2)：5556.5YangC，JiangY，HuangK，eta