盐酸普鲁卡因半数致死量_LD50的测定.ppt

药物半数致死量(LD50)的测定,药理学实验,毒性试验,特殊毒性试验（致畸、致癌、致突变）长期（慢性）毒性试验急性毒性试验：17d,半数致死量（lethaldose50%,LD50）：是指能够引起试验动物一半死亡的药物剂量，通常用药物致死剂量的对数值表示。测定LD50意义(1)是衡量药物毒性大小的指标，评价药物优劣的重要参数(2)评价药物安全性-治疗指数TI=LD50/ED50(3)申报新药过程中必须提供的药理学资料,盐酸普鲁卡因产生毒性作用的原理:盐酸普鲁卡因是一种局部麻醉药，当被大量吸收后会产生全身性毒性反应，主要表现为中枢神经系统先兴奋后抑制，初期表现为眩晕、烦躁不安、肌肉震颤，进而发展为神经错乱、惊厥、昏迷、呼吸抑制等。患者可因呼吸衰竭而死亡。,LD50的测定方法有很多。如：目测机率单位法、加权机率单位法(Bliss法)、寇氏法、序贯法等。Bliss法是目前推荐使用的方法。此法对剂量分组无严格要求，不需要剂量组有0%和100%死亡率，是目前公认最准确的测定方法。但本法计算繁琐，故现多采用计算机程序计算。我国卫生部规定，Bliss法是作为新药LD50测定评定必须采用的方法。,实验部分,【实验目的】1.掌握药物的半数致死量测定的意义、方法、计算过程。2.了解药物给药后动物所产生的毒性反应及其严重程度。,【实验材料】,实验动物：小白鼠，体重18g，各半，实验前禁食12h,不禁水。实验器材：计算机（BL-410机能实验系统）、电子秤、注射器、小鼠笼。实验药品：盐酸普鲁卡因（Procainehydrochloride）,【实验步骤】,预备实验1探索剂量范围：根据经验或文献，通过实验找出100%死亡的最小剂量及0%死亡的最大剂量。此即上下限剂量（Dm，Dn）。2确定组数、计算各组剂量：组数（n）：5组按公式求公比r:按公比求各组剂量：D1，D2，,Dn，其中D1=Dn=最小剂量、D2=D1r,，Dn=Dn-1r,Dm3配制等比稀释溶液：要求各小鼠给药容积一样，一般0.1ml/10g，按下列公式计算浓度：,药液配制的具体步骤：预试中Dm=344mg/kg，Dn=141mg/kg，算出r=1.25，小鼠的平均体重为20g，每组10只，用药量为0.1ml/10g=10ml/kgC1=344mg/kg/10ml/kg=34.4mg/ml每组药液量=每组动物总重用药量=200g0.1ml/10g=2ml,【实验步骤】,正式实验1分组编号:取小鼠50只，随机分成5组，每组10只，各半。2计算给药：由腹腔注射给药。3观察记录：记录小鼠给药后反应，死亡时间，统计死亡数，列下表：,小鼠的腹腔注射方法,抓好后将小鼠保持头低位,4.实验观察30min后进行数据统计5.计算LD50及其95%可信限采用Bliss法程序计算各参数步骤：启动微机，运行BL-410程序，进入其数据处理选项，再进入半数有效量选项。一次输入各组剂量、动物总数、动物死亡数等相关数据。单击“计算”按钮，计算LD50等参数。,【注意事项】,给药剂量准