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文档简介
掌握植物组织培养的基本过程了解影响植物组织培养的各种因素掌握培养基制备、外植体消毒、接种、培养、移栽以及栽培等基本操作技术,教学目标:,课题:组织培养,切取形成层,无菌接种,诱导愈伤组织的形成,形成试管苗,培养室中培养,移栽,脱分化,再分化,排列疏松无规则、高度液泡化、无定形状态、薄壁细胞,一、植物的组织培养的基本过程,whezliling,原理:,植物细胞的全能性,二、影响植物组织培养的因素,(1)植物材料的选择,菊花,胡萝卜,枸杞,形成层,1.植物种类,2.取材部位,二、影响植物组织培养的因素,(1)植物材料的选择,2013.5.28晚9:00采集,2013.5.29早7:00采集,3.器官年龄,4.保存时间,二、影响植物组织培养的因素,(1)植物材料的选择,烟草和胡萝卜的组织培养较为容易,枸杞愈伤组织的芽诱导比较难,同一植物材料的部位、年龄、保存时间的长短会影响实验结果,不同植物的组织培养难度不同,(2)营养条件MS培养基主要成分包括:,A、大量元素:N、P、S、K、Ca、Mg等,B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等,C、有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等,常用的植物激素:,(3)植物激素的影响,生长素、细胞分裂素和赤霉素,生长素和细胞分裂素对实验的影响,生长素和细胞分裂素同时使用,用量的比例对植物细胞发育方向的影响,(4)pH、温度、光照等,(5)无菌技术,三、尝试通过组织培养进行菊花的大量繁殖,制备培养基,外植体消毒,接种,培养,移栽和栽培,选取外植体,制备培养基,选取外植体并消毒,接种,培养,移栽和栽培,三、尝试通过组织培养进行菊花的大量繁殖,(二)选取外植体并消毒,阅读教材P34,思考下列问题:,1、什么是外植体?如何选择?2、用哪些方法对外植体消毒?3、如何避免已经消毒的外植体被再次污染?,选取菊花茎段时,要取生长旺盛的;,外植体消毒流程图:,嫩枝,无菌水清洗3次,冲洗外植体,刷洗,冲洗20分钟左右,无菌吸水纸吸干表面水分,放入70%酒精摇动2-3次6-7秒,无菌水清洗并吸干表面水分,放入氯化汞溶液浸泡12分钟,流水,洗衣粉,(三)接种,1.无菌技术主要包括哪几个方面?,1.技术范围:,(1)实验操作空间清洁和消毒,操作者的手、衣着消毒,(2)实验中培养器皿、接种用具和培养基等灭菌,(3)实验操作过程,酒精灯火焰旁操作,超净工作台,(4)实验中应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触,请比较以下两组图
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