生物技术制药第2版 第5章 疫苗及其制备技术

第五章疫苗及其制备技术、疫苗、传统概念：由病原微生物(细菌、病毒、真菌等)制成的预防传染病的免疫制剂。)及其代谢物，通过人工衰减、灭活或基因工程等。世界卫生组织的扩大免疫措施(EPI)儿童免疫计划表，成人，现代疫苗：治疗性疫苗，非传染性疾病疫苗学，本章的学习要求，掌握：疫苗的概念，基因工程疫苗，组合疫苗和普通疫苗的制备技术熟悉：疫苗的原理，类型，特点和主要用途。了解：疫苗发展的历史和趋势，疫苗行业的特点和应用。本章概述了疫苗的组成、作用原理、类型和特点、疫苗的制备方法、疫苗生产的质量控制、疫苗产业的特点和应用，以及第一节的概述。第一，疫苗生产“在12世纪，中国开始给人们接种天花疫苗”疫苗可预防疾病的流行病学与预防学第6版，由美国疾病控制和预防中心(CDC)于2000年出版。首先是疫苗生产，天花是由天花病毒引起的一种烈性传染病，天花病毒呈砖状，能抵抗干燥和低温。它能在结痂的皮肤、灰尘和衣服上存活数月至一年半。其临床表现主要是严重的毒血症状、皮疹、丘疹、疱疹、脓疱、结痂、去焦痂和麻子。传播途径：喷雾吸入或直接接触。特点：发展迅速，未感染人群感染后15-20天内死亡率高达30%。(998-1023)人痘法，从天花病人身上吸入结痂粉来预防天花。明代隆庆(1567-1572)出现了痘衣、痘浆、干痘病毒、水疫苗等多种接种方法。清朝顺治死于天花，康熙继承了患天花的皇位。天花疫苗接种方法的缺点：有时它也能引起严重的天花。第一，疫苗的产生，欧洲1721年预防和治疗天花，1796年人类痘疫苗接种方法传入英国，1798年英国医生埃詹纳利用牛痘预防天花，医学界正式承认“疫苗接种确实是一种有效的免疫方法”。获得天花病毒痘苗疫苗的细胞培养方法。1，疫苗生产，疫苗之父法国免疫学家卢伊斯帕斯图尔鸡霍乱弧菌减毒株(第一种细菌减毒活疫苗)，1、疫苗生产、巴斯德和狂犬病疫苗异基因传代方法：狂犬病病毒在兔体内通过连续传代，获得减毒株，巴斯德在疫苗分离和细菌培养领域的杰出贡献；获得减毒菌株；连续亚文化；高温培养；同种异体传代培养；巴氏杀菌疫苗的发明：实验免疫学的基础。疫苗及其技术发展简史，(1)减毒活疫苗技术第一次疫苗革命，(2)基因重组疫苗技术第二次疫苗革命，(3)反向疫苗技术第三次疫苗革命，2.疫苗及其技术发展简史。(1)减毒活疫苗技术细胞水平人工治疗导致病原微生物丧失或降低毒力的例子：卡介苗(BacillusCalmette-Gurin，卡介苗，由活的无毒牛结核病制成)，炭疽疫苗，狂犬病疫苗，2.疫苗及其技术发展简史。药物毒理学：结核分枝杆菌是一种胞内寄生细菌。初次感染是通过人工接种无毒的卡介苗(结核分枝杆菌)进行的。经巨噬细胞处理后，抗原信息被传递到免疫活性细胞，使T细胞分化和增殖形成致敏淋巴细胞。当身体再次遭遇结核分枝杆菌感染时，巨噬细胞和致敏淋巴细胞被迅速激活以发挥免疫功能并引起特异性免疫反应。疫苗及其技术简史，(2)基因重组疫苗技术分子水平基因重组技术研究相关基因和蛋白产品实例：乙型肝炎疫苗(乙肝表面抗原)；(2)疫苗及其技术发展简史，血源性乙型肝炎疫苗：从无症状乙肝血浆中提取的乙型肝炎表面抗原基因重组(转基因)乙型肝炎疫苗：利用转基因技术构建含乙型肝炎病毒表面抗原基因的重组质粒，转入酵母(或重组CHO细胞)表达乙型肝炎表面抗原，在繁殖过程中产生非糖基化的表面抗原多肽。重组质粒是通过破碎酵母体、释放颗粒状非糖基化HBsAg多肽、纯化、灭活和添加佐剂制备而成。疫苗及其技术的发展简史，基因工程技术在疫苗领域中构建无毒或减毒疫苗的应用：通过毒素基因突变构建载体活疫苗：将靶基因克隆成用于常规临床应用的活疫苗，疫苗及其技术的发展简史，(3)反向疫苗学技术蛋白水平筛选具有全基因水平保护性免疫应答的候选抗原的具体步骤：1。基因组信息分析结合基因芯片筛选候选疫苗成分2。高通量基因重组表达候选疫苗蛋白组分3。免疫保护试验，2.疫苗及其技术发展简史。例如：脑膜炎球菌属首先用计算机分析脑膜炎球菌B的基因组，找到600个潜在的候选疫苗，在大肠杆菌中表达其中的350个，然后纯化蛋白免疫小鼠，其中29个蛋白可以诱导小鼠产生抗体，从而达到预防免疫的效果。第二节疫苗的组成、作用原理、类型和特点。疫苗组合物抗原佐剂防腐剂稳定剂灭活剂缓冲液，盐和其他非活性成分1。疫苗组合物1。免疫原性是抗原(银)疫苗的主要活性成分，刺激特异性免疫细胞免疫效应因子的激活、增殖、分化和产生。免疫反应性：与免疫效应物特异性结合产生免疫反应。(1)疫苗组合物，常见抗原包括：灭活病毒或细菌活病毒或细菌(减毒株)病毒或细菌纯化有效蛋白组分类毒素细菌多糖合成肽核酸，(2)佐剂(佐剂)非特异性增强抗原免疫反应或改变免疫反应类型的物质。要求：在非冷藏条件下安全、无毒和稳定的作用机制：改变抗原的物理形状，延长抗原在体内的滞留时间，刺激单核细胞对抗原的呈递能力，刺激淋巴细胞的分化，增加扩大免疫反应的能力，1。疫苗组合物，1。疫苗组合物，常用佐剂：用于人体：铝佐剂/MF59(水包油乳剂)动物试验：弗氏完全佐剂/弗氏不完全佐剂.3.大多数灭活疫苗都使用防腐剂。目的：防止外来微生物的污染。常用：0.01% 0.02%硫柳汞2-苯氧乙醇氯仿副作用：接触性皮炎，过敏性结膜炎，耳毒性，1。疫苗组合物，4.稳定剂用途：确保病毒或其他微生物作为抗原存活，并在免疫原性冻干疫苗中保持常用：乳糖、明胶、山梨醇等(1)疫苗的组成，(5)用灭活剂灭活病毒或细菌抗原的方法：物理方法(如加热、紫外线照射等)。)化学方法(丙酮、苯酚、甲醛等。)对人体有一定的毒性作用，因此灭活抗原后，必须及时从疫苗中取出并严格验证，以确保疫苗的安全性。(1)疫苗的组成，(6)缓冲液的种类、盐缓冲液和盐含量都会影响疫苗的功效、纯度和安全性，因此有严格的质量标准。(1)疫苗的组成，(2)疫苗作用的原理。当通过口服或注射给身体接种疫苗时，当身体再次与相同致病菌的抗原接触时，缓冲溶液中的抗原分子刺激身体的免疫系统产生具有高价特异性的免疫保护物质。根据免疫记忆，免疫系统迅速产生保护性物质来阻止病原菌的入侵，从而使身体获得针对病原体的特异性免疫并保护其免受入侵。疫苗的类型和特性(1)减毒活疫苗(2)灭活疫苗(3)亚单位疫苗(4)联合疫苗(5)核酸疫苗(6)治疗性疫苗(3)疫苗的类型和特性(a)减毒活疫苗(liveattenuatedvaccine)是由病原体的致病性通过某种方法减弱或丧失后获得的完整微生物组成的疫苗产品。它能引起机体感染而无临床症状，但其免疫原性能引发机体免疫反应，刺激机体产生特异性记忆B细胞和记忆T细胞，并起到获得长期或终身保护的作用。疫苗的种类和特点，优点：接种次数少，反应少，免疫效果好(体液免疫、细胞免疫、粘膜免疫)，成本低；缺点：稳定性差、毒性返祖现象、环境污染、不能给免疫缺陷者接种疫苗；疫苗的类型和特点；疫苗的类型和特点；和(2)含有几乎所有病原体成分的疫苗产品，所述病原体成分是通过用灭活的疫苗培养、增殖、灭活和纯化病原体而获得的。特点：病原体感染消失，但保留了较强的免疫原性和较好的安全性。第三，疫苗的种类和特性具有稳定性好、反应小的优点，免疫缺陷者也可以接种，但缺点是：需要多次接种，免疫效果差(体液免疫)，需求量大；第三，疫苗的种类和特性；第四，疫苗的种类和特性；第四，亚单位疫苗是利用微生物的某些表面结构成分诱导机体产生抗体的疫苗产品。分类：纯化亚单位疫苗：单一蛋白或寡糖组合物，佐剂合成肽亚单位疫苗：抗病毒/肿瘤/细菌，寄生虫感染基因工程亚单位疫苗，3，疫苗类型和特性，基因工程亚单位疫苗(基因工程亚单位疫苗)，在分离的病原特异性抗原编码基因的基础上，将外源基因转入非病原微生物中表达产物，经分离纯化得到特异性蛋白。原核细胞(大肠杆菌)、真核细胞(酵母)活载体疫苗(细菌、病毒)、转基因植物疫苗、三、疫苗类型和特点、三、疫苗类型和特征，(四)组合疫苗(组合疫苗)通过物理混合两种或多种抗原制成的疫苗制剂。多组合疫苗：多价疫苗，用于预防由不同病原微生物(如百白破)引起的传染病：用于预防由同一病原微生物的不同亚型引起的传染病(如23价肺炎球菌多糖疫苗)。3，疫苗的类型和特性，3、疫苗的类型和特点，(5)核酸疫苗(核酸疫苗)又称基因疫苗，包括核酸疫苗和核酸疫苗。它由抗原编码基因和载体组成，导入人体细胞后，通过宿主细胞的转录系统表达蛋白抗原，诱导宿主产生细胞和体液免疫反应。疫苗的类型和特征脱氧核糖核酸将编码外源抗原的基因插入含有真核表达系统的质粒，并将其导入宿主细胞以表达抗原蛋白，从而诱导免疫反应。特点：免疫效果好，制备方便，可重复使用，可用于免疫治疗和联合免疫，三。疫苗的类型和特性，三。疫苗的类型和特征(六)治疗性疫苗是一种疫苗产品，用于通过在感染病原微生物或患有某些疾病的生物体中诱导特异性免疫反应来治疗或预防疾病恶化。最早的治疗性疫苗：狂犬病疫苗，三。疫苗的类型和特点。1.基于组成和性质的分类(1)通过蛋白质重组重建的治疗性疫苗修饰靶抗原的结构或组合，使其与传统疫苗的靶抗原相似但不同，从而再次激发患者的功能性免疫反应，进而打破和逆转患者的免疫耐受状态。修饰方法：蛋白质修饰，结构/构型修饰，蛋白质复合物/多肽偶联，三。疫苗的类型和特性，(2)基因疫苗的DNA疫苗：核糖核酸疫苗，如埃博拉疫苗、乙型肝炎(HBV)疫苗、丙型肝炎(丙型肝炎)疫苗、人类免疫缺陷病毒(艾滋病毒)疫苗、核糖核酸修饰的树突状细胞(DC)疫苗，三。疫苗的类型和特点，(3)多水平基因修饰细胞疫苗肿瘤治疗性疫苗：肿瘤细胞/DC细胞疫苗制备工艺：嘿。3、疫苗类型及特点，2。基于治疗性疾病的分类(1)用于传染病的治疗性疫苗(2)用于肿瘤的治疗性疫苗(3)用于自身免疫疾病的治疗性疫苗(4)用于移植的治疗性疫苗，第三节疫苗的制备方法，灭活全病毒疫苗流感全病毒灭活疫苗减毒活疫苗卡介苗基因工程重组亚单位疫苗重组乙型肝炎疫苗生化提取亚单位成分疫苗吸附破伤风疫苗治疗性疫苗前列腺癌疫苗西普乐-T，疫苗生产的一般过程。一、灭活全病毒疫苗流感全病毒灭活疫苗(灭活全病毒灭活疫苗)该产品是通过将世界卫生组织(世卫组织)推荐并经国家食品药品监督管理局批准的流感病毒株分别接种于鸡胚，培养，收获病毒液，灭活，浓缩和纯化病毒而制成。它用于预防由这种病毒引起的流感。theinfluenzavaccineisannalvaccinationusingavaccinethatissspecificacryapyrotoptegainthehighlvariableinfluzavirus .每个季节性流感病毒ccinecontainantigenspresentingthree(trivalentvacine)或our(quadrovalentvacine)流感病毒株： two流感病毒株avirustrains，Andeitheroneortunitypebvirusstrains.流感病毒、流感病毒(甲型流感病毒)是最容易发生突变(抗原转化、抗原漂移)的世界性流感大流行：甲型流感病毒新老亚型的出现导致甲型流感病毒重新出现，根据H(血凝素、血凝素)和N(神经氨酸酶)抗原分为许多亚型。H有17个亚型(H1 H17)，N有10个亚型(N1 N10)。H1、H5和H7亚型是高致病性的，流感病毒和流感病毒抗原变异缓慢，流行有限，对人类低致病性流感病毒抗原的稳定致病性相对较弱。它们主要侵害幼儿和免疫力低下的人群，只对人体造成轻微或轻微的上呼吸道感染，I .灭活的丁弗伦萨全病毒疫苗，流感疫苗接种疫苗。美国服务中心6个月前发布了asecontrolandprevent